Metode microscopice de investigare
moduri de a studia diferite obiecte folosind un microscop. În biologie și medicină, aceste tehnici ne permit de a studia structura obiectelor microscopice, dimensiunile care sunt dincolo de puterea de rezoluție a ochiului uman. Baza M.M.I. lumină și microscopie electronică. În activitățile practice și științifice ale medicilor de diverse specialități -. Virusologie, microbiologie, citologie, morfologie, hematologi, etc., în plus față de microscopie optică convențională folosind contrast de fază, interferență, luminiscent, polarizarea, stereoscopic, ultraviolete, microscopie în infraroșu. Aceste metode se bazează pe diferitele proprietăți ale luminii. În microscopia electronică, imaginea obiectelor de investigare rezultă din fluxul direct al electronilor.
Pentru microscopie ușoară și alte MM bazate pe ea. determinarea valorii în plus față de rezoluția microscopului a are natura și direcția fasciculului luminos, precum și caracteristicile obiectului studiat, care pot fi transparente și opace. În funcție de proprietățile obiectului, proprietățile fizice ale schimbării luminii - culoarea și luminozitatea acesteia, asociate cu lungimea și amplitudinea undei, faza. planul și direcția propagării valurilor. Cu privire la utilizarea acestor proprietăți ale luminii, sunt construite diferite MW. Pentru microscopia ușoară, obiectele biologice sunt de obicei colorate pentru a identifica anumite proprietăți ale acestor obiecte (figura 1). În acest caz, țesuturile trebuie fixate, deoarece colorarea dezvăluie anumite structuri ale celulelor moarte. Într-o celulă vie, colorantul este izolat în citoplasmă ca un vacuol și nu-i pată structura. Cu toate acestea, într-un microscop luminos, se pot studia, de asemenea, obiecte biologice vii utilizând metoda microscopiei vitale. În acest caz, se folosește un condensator de câmp întunecat. care este încorporat într-un microscop.
Phase-contrast microscopy este, de asemenea, folosit pentru a studia obiecte biologice vii și nevopsit. Se bazează pe difracția unui fascicul de lumină în funcție de caracteristicile obiectului de radiație. Aceasta schimbă lungimea și faza undei luminoase. Lentila microscopului special cu contrast de fază conține o placă de fază translucidă. Obiectele microscopice vii sau microorganismele și celulele fixe, dar nu colorate, din cauza transparenței lor, practic nu modifică amplitudinea și culoarea fasciculului luminos care trece prin ele. provocând doar o schimbare de fază a valului său. Totuși, după trecerea prin obiectul studiat, razele de lumină deviază de la placa de fază semitransparentă. Ca rezultat, o diferență de lungime de undă are loc între razele transmise prin obiect și razele fondului de lumină. Dacă această diferență nu este mai mică de 1/4 din lungimea de undă, apare un efect vizual în care obiectul întunecat este vizibil în mod clar pe un fundal ușor sau invers în funcție de caracteristicile plăcii de fază.
O varietate de microscopie cu contrast de fază este contrastul amplitudinii sau microscopia anoptrală, în care se utilizează o lentilă cu plăci speciale care schimbă doar luminozitatea și culoarea luminii de fundal. Ca urmare, se extind posibilitățile de a studia obiecte vii nevopsite. Phase-contrast microscopy este utilizat în microbiologie și parazitologie în studiul de microorganisme, protozoare, celule de plante și animale; în hematologie pentru numărarea și determinarea diferențierii măduvei osoase și a celulelor sanguine; precum și în studiul celulelor de cultură tisulară etc.
microscopie Polarizarea ne permite de a studia obiecte de cercetare din lume, format de cele două fascicule polarizate în plane reciproc perpendiculare, și anume, în lumină polarizată. În acest scop, filmy sau Polaroid Nicols, care este plasat în microscop între sursa de lumină și de pregătire. Polarizarea variază în timpul trecerii (sau reflexia) de raze de lumină prin diferite componente structurale ale celulelor și țesuturilor, ale căror proprietăți nu sunt uniforme. În așa-numitele structuri izotrope viteza de propagare a luminii polarizate nu depinde de planul de polarizare în structurile anizotropice viteza de propagare variază în funcție de direcția luminii de-a lungul axei longitudinale sau transversale a obiectului. Dacă indicele de refracție a lungul structurii mai mult decât în direcția transversală, există o birefringență pozitiv cu relația inversă - birefringență negativ. Multe obiecte biologice au o orientare moleculară strictă, sunt anisotropice și au o refracție dublă pozitivă a luminii. Aceste proprietăți sunt myofibrils, cilia neurofibrils epiteliului ciliat, fibre de colagen si altele. Compararea naturii refracție a razelor de lumină polarizată și mărimea anizotropiei obiectului oferă o indicație a organizării moleculare a structurii (Fig. 2). microscopie Polarizarea este una dintre tehnicile histologice (studii de metode histologice), diagnosticarea microbiologice (metoda de diagnosticare microbiologice), își găsește aplicarea în studii citologice (citologie) și altele. În lumina polarizata pot fi investigate ca vopsite și nevopsite și nefixate, așa-numitele preparate native ale secțiunilor de țesuturi.
Microscopia luminescentă este utilizată pe scară largă. Se bazează pe proprietatea anumitor substanțe pentru a da o luminescență - o luminescență în razele UV sau în partea albastru-violetă a spectrului. Multe substanțe biologice, cum ar fi proteine simple. coenzimele, unele vitamine și medicamente, au propriile luminescențe (primare). Alte substanțe încep să strălucească numai atunci când li se adaugă coloranți specifici - fluorochromi (luminescența secundară). Fluorocromii pot fi distribuite într-o celulă difuzează sau selectiv pete structuri celulare individuale sau anumiți compuși chimici ai unui obiect biologic. Aceasta este baza pentru utilizarea microscopiei luminescente în studiile citologice și histochimice (vezi metodele histochimice de investigare). Cu ajutorul imunofluorescenței într-un microscop luminos, se identifică antigeni virali și concentrația acestora în celule, se identifică viruși. antigeni și anticorpi. hormoni, diverse produse metabolice etc. (Figura 3). În acest sens, microscopia luminescentă este utilizată în diagnosticul de laborator al infecțiilor, cum ar fi herpesul. epidemia parotitei. virus hepatitic. și influenza al. utilizat în diagnosticul rapid al infecțiilor virale respiratorii, examinând amprentele cu mucoasa nazală a pacienților, și diagnosticul diferențial al diferitelor infecții. În Pathomorphology folosind microscopie fluorescente recunosc tumori maligne histologice și specimene citologice, determina zonele ischemice ale mușchiului cardiac în stadii incipiente de infarct miocardic, a detecta amiloid in tesutul biopsie, etc.
microscopie UV bazat pe capacitatea unor substanțe care fac parte din celule vii, microorganisme sau fixe, dar nu colorate, transparente în țesuturi de lumină vizibilă absorb radiațiile UV cu o anumita lungime de unda (400-250 nm). Această proprietate este posedată de compuși cu înaltă moleculară. cum ar fi acizii nucleici. . (. Tirozină, triptofan, metilalanii) Proteine, baze de acid aromatic piramidinovye și purinice, etc. Cu ajutorul microscopiei ultraviolete specifica locația și cantitatea acestor substanțe, iar în cazul studierii obiectelor vii - ele schimbă în timpul vieții.
Microscopia în infraroșu face posibilă investigarea obiectelor opace la lumina vizibilă și la radiațiile UV prin absorbția lor cu structuri de lumină cu o lungime de undă de 750-1200 nm. Pentru microscopia în infraroșu, nu este necesar un tratament chimic preliminar al preparatelor. Această specie este M.M.I. cel mai adesea folosit în zoologie, antropologie, alte ramuri ale biologiei. În medicină, microscopia în infraroșu este folosită în principal în neurologie și oftalmologie.
Microscopia stereoscopică este utilizată pentru studierea obiectelor volumetrice. Construcția de microscoape stereoscopice face posibilă vizualizarea obiectului investigației cu ochiul drept și stâng la diferite unghiuri. Explorați obiectele opace cu o creștere relativ mică (de până la 120 de ori). Microscop stereoscopic găsește utilizare în microchirurgie (microchirurgie) în Pathomorphology cu studiu special de biopsie, materialul operațional și secționate, studii criminalistice de laborator.
Microscopia electronică este utilizată pentru a studia structura celulelor, țesuturilor de microorganisme și a virușilor la niveluri subcelulare și macromoleculare. Acest M.M.I. a permis trecerea la un nivel calitativ nou al studiului materiei. Acesta este utilizat pe scară largă în morfologia, microbiologie, virusologie, biochimie, oncologie, genetică, imunologie, creșterea bruscă a rezoluției microscop electronic este furnizat de fluxul de electroni care trec sub vid prin câmpuri electromagnetice generate de lentile electromagnetice. Electronii pot trece prin structura obiectului de test (microscopie electronică de transmisie) sau reflectate de la acestea (microscopie electronică de scanare), deviate la unghiuri diferite, rezultând într-o imagine pe ecranul fluorescent al microscopului. În microscopia electronică de transmisie (transmisie), se obține o imagine plană a structurilor (Figura 4), în timp ce scanarea (volum) (figura 5). Combinația de microscopie electronică cu alte metode, cum ar fi autoradiografie, metode histochimice, imunologice (metode imunologice) permite electroni radioautographic, electron-histochimic, studiile de electroni imunologic.
Microscopia electronică necesită pregătirea specială a obiectelor de cercetare, în special fixarea chimică sau fizică a țesuturilor și a microorganismelor. Biopsiile și materialul secțională este deshidratată după fixare, se toarnă în rășini epoxidice, tăiate de sticlă sau de diamant cuțite pe ultratome specială care permite să se obțină secțiunile de țesut ultrasubțiri 30-50 nm grosime. Ele sunt contraste și apoi studiate într-un microscop electronic. La microscop de scanare (raster) electroni studiind suprafața diferitelor obiecte prin împroșcarea pe ele într-o cameră de vid a unei substanțe densitate de electroni, și au examinat așa-numita proba replica repetarea contururi. Vezi și Microscopul.
Fig. 2b). Slide-uri infarct în lumină polarizată la moarte subită de insuficiență coronariană acută - identifică zonele care nu au o caracteristică transversală striații a cardiomiocitelor; × 400.
Fig. 2a). Micro-pregătirea miocardică în lumină polarizată este normală.
Fig. 3. Micro prepararea macrofagului peritoneal în cultura celulară, microscopie luminescente.
Fig. 1. Microparticule miocardice în moarte subită de insuficiență coronariană acută: Colorarea Lee dezvăluie re-tăierea contrafibrizată a miofibrililor (zone de culoare roșie); × 250.
Vezi ce "metode de cercetare microscopice" în alte dicționare:
Metode microscopice de cercetare - examinarea obiectelor examinate cu ajutorul unui microscop. Practica de specialitate de cercetare aplicată în lumina transmisă, în lumina incidente (pe metodele de câmpuri de lumină și întuneric), în lumină polarizată, contrast de faza, ... ... Encyclopedia Medicină Legală
METODE DE INVESTIGAȚIE MEDICALĂ - I. Principiile generale ale cercetării medicale. Creșterea și aprofundarea cunoștințelor noastre, echipamente din ce în ce mai tehnice ale clinicii, bazate pe utilizarea celor mai recente realizări în fizică, chimie și tehnologie, legate de această complicație a metodelor ... ... Marea Enciclopedie Medicală
ARHEOLOGIE. METODE ȘI METODE DE RECEPȚIE - Arheologii sunt, în esență, similari cu detectivii implicați în recrearea și înțelegerea vieții oamenilor din epoca trecută; așa că nu este surprinzător faptul că pentru a extrage informații de la urme de materiale lăsate de oamenii vechi, ei folosesc o mare varietate ... ... Enciclopedia din Collier
Examinarea pacientului - Sondajul pacientului Examinarea pacientului a unui set de studii care vizează identificarea caracteristicilor individuale ale pacientului, stabilirea diagnosticului bolii, raționamentul rațional al tratamentului, definirea prognosticului. Volumul cercetărilor de la ... Enciclopedie medicală
Bone - I Bone (os) este un organ musculoscheletal construit în principal din țesutul osos. Un set de K. asociat (intermitent sau continuu) cu țesut conjunctiv, cartilaj sau țesut osos, formează scheletul. Numărul total de schelet K. ... ... Enciclopedie medicală
Diagnosticul microbiologic - bazat pe identificarea agentului patogen sau identificarea răspunsului imun al corpului pacientului la acesta. Etapa inițială a MD. este alegerea materialului și transportul probelor la laborator. Tipul de material pentru cercetare este determinat de caracteristicile ... ... Enciclopedii medicale
Protozoarele sunt Protozoa, tipul de animal reprezentat de organisme unicelulare. Clasificarea este general acceptată, conform căreia tipul de P. este împărțit în 4 clase: sarcodic, flagelum, sporoviks, infusoria. Tipul II combină aproximativ 30 de mii de specii ... Enciclopedie medicală
Microscop - I Un microscop este un dispozitiv pentru obținerea de imagini mărită a obiectelor sau a detaliilor structurii lor care nu sunt vizibile cu ochiul liber. Ochea poate distinge detaliile obiectului, separate de cel puțin 0,08 mm; cu ajutorul luminii M poate fi ... ... Enciclopedie medicală
Spută - I spută (sputa) emise in timpul expectorație modificat patologic amestec de secreție traheobronșic cu secreție de salivă și membranei mucoase nazale și paranazale (paranazale) sinusurile. În mod normal, este format din secretii traheobronsice de mucus ... ... Enciclopedii medical
Anatomie patologică - științe biomedicale, care studiaza bazele structurale ale proceselor patologice la oameni și animale și aspectele morfologice ale patogenezei: o componentă majoră a patologiei (boala). Distingem generalul P. a. studiind tipic ... ... Enciclopedia medicală
Microbiologie - I Microbiologie (greacă Mikros mici știință + Biologie de microorganisme, studierea lor taxonomie, structura, fiziologie, biochimie, genetica si variabilitatea, distribuția și rolul în natură, în viața umană, precum și modalități de dezvoltare ... ... Enciclopedii medical.
- Metode microscopice de cercetare a materialelor. E. Clark, K.N. Eberhardt. În ultimele decenii, sa făcut un salt imens în domeniul științei materialelor. În același timp, dezvoltarea foarte rapidă a metodelor optice de cercetare materială. În computer ... Mai mult Cumpărați pentru 454 руб
- Metode microscopice de cercetare a materialelor. E. R. Clark, K. N. Eberhardt. În ultimele decenii, sa făcut un salt imens în domeniul științei materialelor. În același timp, metodele optice pentru studiul materialelor au evoluat foarte rapid. În computer ... Mai mult Cumpărați pentru 387 руб
- Metode microscopice de cercetare a materialelor. Clark E.R. În ultimele decenii, sa făcut un salt imens în domeniul științei materialelor. În același timp, metodele optice pentru studiul materialelor au evoluat foarte rapid. În computer ... Citește mai mult Cumpărați pentru 356 руб
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: