Enzime de inginerie genetică
restricție
Enzimele de restricție (cu endonucleaze de restricție, endonucleaze de restricție) - sunt enzime care recunosc și atacă anumite secvențe de nucleotide din molecula de ADN (situsuri de restricție).
In 1953, sa descoperit că ADN-ul unui anumit tulpina de E. coli, introdusă în celulele de o altă tulpină (de exemplu, tulpina ADN B - în celulele tulpina C) nu prezintă, de regulă, activitatea genei împărțită cât mai repede în fragmente mai mici.
In 1966, sa demonstrat că acest fenomen este legat de o modificare specifică ADN gazdă - acesta cuprinde mai multe baze metilați care lipsesc în ADN-ul nemodificat, metilarea (adăugare la baza grupării metil) are loc după replicare este finalizată. Bacteriile sunt capabile să distingă propriul lor ADN-ul de la orice invadator „străin“ este pentru tipul de modificare. "Eticheta" corespunde enzimelor modificatoare de metilare, așa-numitele metilaze ADN. Diferența de modificare face ca ADN-ul străin este sensibil la acțiunea enzimelor de restricție care recunosc absența grupărilor metil în siturile lor respective.
Sistemele de restricționare și modificare sunt răspândite în bacterii; existența lor joacă un rol important în protejarea ADN-ului rezident de contaminare prin secvențe de origine străină.
Restrictase, care a scindat ADN nemethylat, a fost izolat în 1968 de Mezelson și Yuan. Această enzimă a fost foarte specifică în raport cu o secvență ADN specifică, dar scindează molecula nespecific, în altă parte, la o oarecare distanță de locul de recunoaștere. Curând, în 1970 Dl. Smith și Wilcox izolat de enzimă de restricție primul Haemophilus influenzae care clivează o secvență de ADN bine definit (Hind III). Deoarece diferite bacterii etichetează în mod diferit ADN-ul lor, enzimele de restricție trebuie să recunoască, de asemenea, diferite secvențe. Într-adevăr, de atunci, s-au identificat enzime de restricție care recunosc mai mult de 150 de situsuri de restricție (situsuri de clivaj ADN).
Alte capitole ale secțiunii:
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: