Pentru a evalua proprietățile fizico-chimice ale eritrocitelor, se investighează rezistența (rezistența) eritrocitelor la diferite efecte. Cea mai mare răspândire în practica clinică a fost studiul rezistenței osmotice a eritrocitelor.
O metodă unificată pentru determinarea rezistenței osmotice a celulelor roșii din sânge
în modificarea lui LI Idelson (1974).
Determinarea cantitativă a gradului de hemoliză a eritrocitelor în soluțiile tampon hipotonice de clorură de sodiu.
Soluția de bază (pentru concentrația osmotică corespunde soluție de clorură de sodiu 10%) are un pH de 7,4, compoziția soluție: fosfat dibazic de sodiu (Na2 HPO4) d -27.31 (sau Na2 HPO4 * 2H2 O- 34,23, g) fosfat diacid de sodiu (NaH2 PO4 * 2H2O) -4.86 g, clorură de natriya- 180 g apă distilată - până la 2 litri. Soluția poate fi depozitată într-un recipient etanș în frigider timp de câteva luni.
Soluția de bază este diluată de 10 ori și se obține o soluție corespunzătoare unei concentrații osmotice de soluție de clorură de sodiu 1%. Din această soluție se prepară soluții de lucru de clorură de sodiu în următoarele concentrații: 0,85; 0,75; 0,70; 0,65; 0,60; 0,55; 0,50; 0,45; 0,40; 0,35; 0,30; 0,20; 0,10%. Puteți prepara 100 ml din aceste soluții de lucru și le puteți păstra în frigider. Sunt potrivite timp de 2 săptămâni.
Echipament special
- Photoelectrocolorimeter.
- Termostat la 37 ° C
Cursul determinării
O probă martor este un supernatant într-un tub conținând soluție de clorură de sodiu 1%.
Pentru hemoliza 100%, hemoliza este luată într-un tub de testat care conține soluție de clorură de sodiu 0,1%. Se calculează procentul hemoliza în fiecare tub, comparând valoarea extincției extincției supernatant ca 100%, cu următoarea formulă:
Procentul de hemoliză = Ex * 100 / E1, unde
E1 - extincția supernatantului într-un eprubetă cu soluție de clorură de sodiu 0,1%;
EX - extincția probei de testare;
100% din hemoliză într-un tub cu soluție de clorură de sodiu 0,1%.
A doua zi, un studiu a fost repetat cu sângele incubat timp de 24 ore la 37 ° C.
Valori normale
În sănătos hemoliza sânge proaspăt punct începe la o concentrație de clorură de sodiu 0,50-0,45%, iar hemoliza completă - la soluție 0,40-0,35% de clorură de sodiu.
Semnificația clinică
Studiul se desfășoară cu suspiciune de anemie hemolitică. Coborârea rezistenței osmotice, adică. E. Apariția hemoliza celulelor roșii din sânge la mai mare decât în mod normal, concentrația de clorură de sodiu (0.70-0.75%) se observă în ereditar și microspherocytosis nesferotsitarnyh unele anemie hemolitică ereditare și uneori cu hemolitică autoimună anemie. Într-o serie de cazuri, scăderea rezistenței osmotice este dezvăluită numai atunci când sângele incubat este examinat. Creșterea caracteristicii de rezistență osmotică a talasemie, tulburări ale hemoglobinei.
Literatura.
Idelson LI În cartea: Manualul de diagnosticare funcțională / Ed. IA Kassirsky. - M. Medicine, 1970, p. 401.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: