Test de sânge
Rezistența osmotică a eritrocitelor
Pentru a evalua proprietățile fizico-chimice ale eritrocitelor examina rezistența lor la diferite influențe. Cel mai adesea, în practică, se determină rezistența osmotică a eritrocitelor. Există rezistență minimă și maximă. rezistență minimă este determinată de eritrocit concentrație hipoton maximă (mai puțin de 0,85%) soluție de clorură de sodiu (într-o serie de concentrații reduse treptat), la care cel puțin hemoliza pornire stabilă de eritrocite în soluție timp de 3 h. Rezistența maximă este determinată de soluție hipotonă maximă a hematiilor concentrația de clorură de sodiu, provocând timp de 3 ore hemoliza tuturor celulelor roșii din sânge.
Procedura unificată pentru determinarea rezistenței osmotice a eritrocitelor la modificarea LI Idelson
Principiul. Determinarea cantitativă a gradului de hemoliză a eritrocitelor în soluțiile hipotonice tamponate de clorură de sodiu.
Reactivi. soluție vrac (la o concentrație osmotică corespunde cu 10% soluție de clorură de sodiu), pH 7,4: anhidru fosfat acid de sodiu (Na2 HPO4) - 27,31 g sau cristaline (Na2 HPO4 x 2H2 0) - 34,23 g; Clorură de sodiu 4,86 g - - dihidrogenfosfat (NaH2 PO4 x 2H2O) sodiu cristalin 180 g; apă distilată - până la 2 litri. Soluția poate fi depozitată într-un container închis în frigider timp de mai multe luni.
Soluția bazică este diluată de 10 ori cu apă distilată și se obține o soluție la o concentrație osmotică corespunzătoare unei soluții de clorură de sodiu 1%. Din această soluție se prepară soluții de lucru corespunzătoare soluțiilor de clorură de sodiu cu următoarele concentrații: 0,85; 0,75; 0,70; 0,65; 0,60; 0,55; 0,50; 0,45; 0,40; 0,35; 0,30; 0,20; 0,10 %%. Se recomandă prepararea a 100 ml din aceste soluții de lucru. A se păstra la frigider, sunt adecvate timp de 2 săptămâni.
Echipament special. 1) colorimetru fotoelectric; 2) termostat la 37 ° C
Proba de control - supernatant într-un tub de testare care conține o soluție de lucru cu o concentrație de clorură de sodiu de 1%.
Calcul. Pentru hemoliza completă (100%), hemoliza este administrată într-o eprubetă cu soluție de clorură de sodiu 0,1%. Procentul de hemoliză din fiecare tub este calculat prin compararea cantității de extincție a supernatantului cu extincția luată ca 100% prin formula:
unde E1 - extincția supernatantului într-o eprubetă cu soluție de clorură de sodiu 0,1%; Ex este extincția probei de testare; 100 - hemoliză completă într-un eprubetă cu soluție de clorură de sodiu 0,1%.
A doua zi, repetați studiul cu sângele incubat timp de 24 ore la 37 ° C.
Valori normale. La persoanele sănătoase în hemoliza sânge proaspăt (rezistența minimă a eritrocitelor) începe la o concentrație de clorură de sodiu 0,50-0,45%, iar hemoliza totală (rezistența maximă a eritrocitelor) se observă în soluție de clorură de sodiu 0,40-0,35%.
Semnificația clinică. Acest studiu se desfășoară cu suspiciune de anemie hemolitică. Cel mai puțin rezistent la spherocytes soluții hipotonice (apariție a hemolizei eritrocitelor observată la concentrații mai mari de clorură de sodiu 0,75-0,70%). Coborârea stabilitatea osmotică este observată nu numai în microspherocytosis ereditară, dar, de asemenea, în unele anemie hemolitică nesferotsitarnyh ereditară, anemia hemolitică autoimună. Creșterea rezistenței osmotice a celulelor sanguine roșii caracteristice de talasemie, tulburări ale hemoglobinei, eventual cu icter obstructiv.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: