Pentru diagnosticul de infecție în laborator sunt utilizate următoarele metode directe
Reacția în lanț a polimerazei.
Acesta permite detectarea agentului patogen direct în materialul patologic studiat cu ajutorul diferitelor microscoape.
Metode microscopice de cercetare sunt expuse la o varietate de materiale biologice derivate de la pacienți, sânge, frotiuri din membranele mucoase ale gâtului, amigdale, nas, urina, secrețiile uretrale, lichidul cefalorahidian, un extract din frotiuri de măduvă osoasă de imprimeuri carbunculul Or fierbe.
Smeile sunt preparate din materialul biologic obținut în laborator folosind diferite tehnologii. După prepararea frotiului, este uscat, fixat și colorat. O culoare simplă pentru care se utilizează numai un singur colorant (purpuriu, albastru de metilen) vă permite să vă familiarizați cu morfologia generală a microbului. Metode complexe de colorare sunt folosite pentru a diferenția microbii. Semnificația cea mai practică este colorarea lui Gram, Tsilyu-Nilsson, Neisser și alții. Aplică de asemenea metoda de a studia microbii într-o formă viu, nevăzută. Această metodă are avantajul că microbii sunt studiați intacte. Metoda este folosită de obicei pentru a determina mobilitatea microorganismelor și pentru a studia structura fină a paraziților mari (fungi, protozoare)
Metoda luminiscente-serologice (imunofluorescență), care a găsit aplicații în primul rând pentru diagnosticarea infecțiilor virale, poate fi de asemenea menționată la metode microscopice de examinare. Sunt utilizați anticorpi specifici de diagnostic marcat cu coloranți fluorescenți. Combinația de anticorpi marcați cu antigeni de microorganisme face posibilă judecarea prezenței și localizării antigenului (toxinei). Rezultatul reacției este luat în considerare la examinarea medicamentului într-un microscop fluorescent. Această metodă are o sensibilitate ridicată și se caracterizează prin universalitatea aplicării pentru detectarea diferitelor antigene, atât în celulele vii cât și în cele moarte. Cel mai adesea această metodă de diagnostic de laborator este utilizată în infecțiile virale, alte metode de examinare microscopică a virușilor sunt folosite relativ rar.
Pe langa gasirea microorganisme pentru diagnosticul infecțiilor, materiei străine în studierea celule individuale și produse vibrios reacție cu dispersie de celule - vițel Babes-Negri în rabiei, etc.
Luminozitatea microscopică este, de asemenea, utilizată pentru detectarea incluziunilor intracelulare sau intranucleare care conțin acizi nucleici virali.
Metodele bacteriologice fac posibilă obținerea unei culturi pure a agentului cauzal al bolii, care este necesară pentru un studiu cuprinzător al proprietăților patogene, culturale, morfologice, biochimice, antigenice și de altă natură. În practică, este mai des necesară abordarea materialului biologic care conține un amestec de microorganisme. Izolarea agentului patogen în forma sa pură este baza cercetării bacteriologice. Trebuie reamintit faptul că metoda de abstractizare a materialului biologic pentru cercetare afectează în mare măsură eficacitatea rezultatului final.
Norme obligatorii pentru colectarea materialului biologic pentru cercetarea bacteriologică:
1. Materialul trebuie colectat înainte de inițierea terapiei etiotrope.
2. Respectați cu strictețe sterilitatea în gard.
4. Pentru a atinge intervalul de timp minim între materialul peretelui și placarea pe medii nutritive, atunci este imposibil pentru prima plantare 3 chasa folosit amestec conservant (apă-glicerină 7: 3, și Cary Blair și colab.). În absența conservanților, materialul este depozitat în frigider sau pe gheață.
Studiul bacteriologic este supus tuturor materialelor biologice.
Materiile de testare sunt placate pe medii nutritive utilizând o tehnică specială de însămânțare, se obțin colonii separate, care sunt apoi transferate în tuburi de agar oblice. Pentru cultivarea microorganismelor se folosesc diferite medii nutritive: simple (bulion de peptonă pe bază de carne, agar) și mediu complex (ser).
Pentru izolarea și depozitarea microorganismelor utilizate mediu (amestec de glicerol) conservant, mediu de îmbogățire (apă peptonată alcalină) și electivă (selectiv) mediu (bulion biliar). În unele cazuri, medii nutritive utilizate pentru detectarea microorganismelor (mediu de Endo, Levin Ploskareva - pentru diagnosticarea bacteriilor intestinale).
Natura creșterii microorganismelor (proprietăți culturale) este unul dintre criteriile de recunoaștere a acestora. Valoarea este magnitudinea, forma, consistența, densitatea, culoarea, coloniile de suprafață pe suporturi nutritive dense și în bulion - prezența turbidității, sedimentului, filmului.
Una dintre principalele metode de diagnostic pentru recunoașterea microorganismelor este studiul proprietăților lor biochimice. Acest lucru are o importanță deosebită în diagnosticul infecțiilor intestinale. Este studiată capacitatea microorganismelor de a ferma carbohidrații prin formarea acidului sau acidului cu gaz, pentru a descompune produsele proteice, capacitatea de a forma catolize, etc.
Pentru a detecta toate proprietățile, materialul este plasat pe medii de diagnostic diferențiate care conțin substanțe pentru care microorganismele își manifestă activitatea enzimatică. Adăugarea de medii de schimbare a culorilor în mediul înconjurător facilitează recunoașterea rezultatelor. Această metodă de diagnostic bacteriologic se numește "însămânțare pe seria motley".
Detectarea agenților patogeni ai infecțiilor virale are propriile particularități, cauzate de particularitățile virușilor - parazitizarea intracelulară. Embrionii de pui și culturile țesuturilor sunt folosite pentru cultivarea virușilor. Embrionii de pui sunt adesea utilizați în ziua a 8-a a 12-aa incubării. Materialul este injectat în cavitatea amniotică, în sacul de gălbenuș sau pe membrană. Ouăle infectate sunt plasate în incubator timp de 3-10 zile. Timpul de incubație depinde de virus, de metoda de infectare și de scopul studiului.
Culturile de țesut numesc un amestec de celule care pot exista în afara corpului. Virusurile sunt cultivate în toate culturile de țesuturi. În cultura de țesut, virusurile sunt determinate de un număr de caracteristici și indicatori.
Metodele biologice sunt metode de infectare a animalelor de laborator. Reproducerea bolii la animale este un indicator absolut al patogenității microorganismelor. Pentru a studia proprietățile biologice ale parazitului sunt doar animalele cele mai sensibile la acestea (la o tuberculoza - cobaii, infecțiile pneumococice si antrax - soareci albi, cu o infecție streptococică - iepuri, etc.).
Metoda de infectare a animalelor de laborator este adesea folosită în infecțiile virale. Locul de introducere a materialului biologic este ales ținând cont de tropism (afinitate) a virusului de test pentru anumite țesuturi umane și animale (neurotrope - injectat in creier, pneumotropic - trahee, etc.).
După infecția animalelor, se constată multiplicarea paraziților în ele:
1. În imaginea clinică;
2. Modificări patofiziologice în corpul animalului;
3. Privind găsirea de microorganisme în corpul animalului;
4. Prin găsirea de anticorpi în serul de sânge al animalului:
În unele cazuri, animalele de laborator sunt folosite pentru a izola o cultură pură, atunci când este introdus un material puternic contaminat, prin diferite microorganisme patogene. După moartea animalului, o cultură curată este izolată de corpul său. Cu ajutorul animalelor de laborator se poate determina, de asemenea, virulența sușei patogene izolate a microorganismelor.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: