Scopul lecției. Să familiarizeze studenții cu proprietățile stimulentelor și diagnosticelor de laborator ale sapa, melioidoză, pseudomonas de nurcă și preparate biologice.
Echipamente și materiale. Culturi de P. aeruginosa pe MPA în vase Petri, în MPB, un set de teste care caracterizează proprietățile enzimatice ale P. aeruginosa. capace pentru droguri "picătură zdrobită", biologici pentru prevenirea și diagnosticarea specifică a sapa și pseudomonaselor de nurcă.
Sap. Aceasta este o boală cronică infecțioasă a animalelor ungulate (cai, măgari, catâri, carne de vită); Reprezentanți re-sensibili ai familiei de feline și oameni. Caracterizată prin apariția în plămâni, pe membrana mucoasă a nasului și în diferite zone ale pielii cu noduli specifici, predispuși la dezintegrare cu formarea ulcerului festering.
Agentul cauzal este bacteria Pseudomonas mallei, genul Pseudomonas, familia Pseudomonadaceae.
Diagnosticul de laborator al SAP se bazează pe rezultatele studiilor de sulf-logice (DSC); cercetarea bacteriologică se efectuează în cazuri excepționale.
Examinarea bacteriologică, inclusiv a chaet o detectare a agentului patogen în hrană UI Todd-lumina microscopie si bioteste, izolarea unei inoculare culturi pure în medii de cultură și identificarea agentului cauzal al proprietăților culturale-morfologice și enzimatice.
Material pentru studiu. Sângele este trimis la laborator, ulcere purulent separate, descărcare nazală, ganglioni limfatici punctați, puroi din abcese; din animalele ucise iau țesutul afectat de plamani, ficat, splină, ganglioni limfatici, septum nazal, trahee, bronhii etc.
Microscopia preparatelor din materia primă. În frotiuri de material, Gram-colorată, agentul este detectat sub formă de drepte sau ușor curbate, cu rotunjite capete bacterii dimensiuni gram negative tija (1.4. 4) x 0,5 m, și nu capsule de spori (Fig. 108). Atunci când albastrul de metilen al Leffler este colorat în celule, granularitatea este văzută.
Izolarea și identificarea culturii agentului patogen. Agentul cauzal este sapa-aerob, optimul temperaturii fiind de 37,3 ° C, pH 6,8. 7, raza crește pe mediu cu adăugarea de glicerină (2,4%). Materialul investigat este însămânțat pe MPA și MPB glicerolizat. Creșterea agentului patogen apare în prima zi a doua, uneori mai târziu.
În MPB, agentul patogen crește cu turbiditatea mediului, se formează un precipitat de mucus alb-gri pe fundul benzii de testare, pe suprafața bulionului poate apărea un film. Pe planul MPA, agentul patogen se formează neted, translucid, gri-alb, cu o nuanță de perle a coloniei, care se îmbină treptat cu un strat subțire. Dintre culturile cultivate, frotiurile sunt făcute, colorate în conformitate cu Gram, microscopia dezvăluie tije polimorfe gram-negative; în culturile de bulion celulele patogenului sunt mai scurte - până la coccoid.
Caracteristic cred creșterea în cartof glicerol: după două - trei zile, există mici, translucide, cu Zheltov-lea umbra de colonii, care apoi se îmbina într-o placă din umbra des-tovatym ( „miere“), a șasea-a opta zi modificările de culoare la maroniu sau maro-roșcat.
În bacteriile cu proprietăți bacteriene și morfologice tipice pentru agentul patogen al glandei, sunt studiate semnele enzimatice. P. mallei încet, 6. 8-a zi, laptele coagulat, gelatina lichefiate, scindează pentru a forma gazul de acid, fără glucoză, lactoză, nu utilizează zaharoză, maltoză, om-filamente. În țările din zona tropicală din Asia de Sud-Est, agentul cauzator al "falsului sap" (melioidoza, boala Whitmore) este P. pseudomallei. provocând boala omului și a animalelor. Pentru diferențierea P. mallei și P. pseudomallei, se utilizează caracteristicile indicate în Tabelul 32.
Biotestare. Se prepară suspensia de țesut pe o soluție fiziologică sterilă (raport 1:10) și se injectează într-un volum de 0,5. 1 ml subcutanat în zona gâtului până la hamsteri de aur sau într-un volum de 3,5 ml cobai. Materialul steril luat (punctat) infectează animale intraperitoneal. Cazurile pozitive-TION în loc de injecții subcutanate formate ulcer cu up-lotnennymi margini dezvolta conjunctivită, rinită, de la zara-conjugat cobaii intraperitoneal masculi - orhita (Fe nomen Strauss). Moartea hamsterilor are loc în ziua a 5-a și a 7-a, cobai în a 8-a zi a celei de-a 15-a zi sau când boala trece într-o formă cronică. Animalele moarte și ucise sunt supuse unui examen bacteriologic.
Diagnosticul serologic se bazează pe rezultatele DSC. Titrul seric de diagnostic este considerat a fi diluție 1:10 cu o întârziere de hemoliză de patru sau trei cruci; întârzierea hemolizei cu una, două cruci cu diluție serică 1. 10 și la trei, patru cruci cu diluție ser 1: 5 este evaluată ca un rezultat discutabil.
Diagnosticul alergic. Metoda utilizată în ferme pentru a monitoriza bunăstarea cailor prin sapă (a pus o probă oftalmică sau un test intradermic cu mallein).
Biologics. Mallein - gena diagnostic Sapna Aller. La fabricarea cultivate cultura patogen glicerinată bulion timp de patru luni, a fost sterilizat prin autoclavare, filtrat printr-un filtru Seitz monitorizat pentru sterilitate, Inofensivitatea la șoareci albi, specificitate - la cabaline sănătoși, standardizează-dizolvată prin activitatea în unități în laborator Ms-votnyh .
antigen Sapna pentru DGC se prepară după cum urmează: cultura agar a spălare fenolizirovannym soluția fiziologică-cal patogen manual, sterilizate prin autoclavare, apărând-dizolvată. Ca antigen, este utilizat un lichid cultivat fără celule, testat pentru sterilitate, specificitate și activitate.
Serul de zer pozitiv este proiectat pentru a determina activitatea antigenului (DSC) și ca control în stabilirea DSC. Obțineți o hiperimunizare a cailor.
Melioidoza (sapă falsă, boala lui Whitmore). Infecțioasă-bolevanie pentru animale (cai, câini, iepuri, oi și capre) și la om, care apar sub formă de septicemie acută sau cronică sau septicopyemia.
Agentul cauzal este bacteria Pseudomonas pseudomallei, genul Pseudomonas. familia Pseudomonadaceae.
Diagnosticul de laborator al melioidozelor se bazează pe rezultatele cercetărilor bacteriologice.
Examinarea bacteriologică, inclusiv a chaet o detectare a agentului patogen în hrană UI Todd-lumina microscopie si bioteste, izolarea unei inoculare culturi pure în medii de cultură și identificarea agentului cauzal al proprietăților culturale-morfologice, enzimatice și serologice.
Material pentru studiu. Sânge, spută, urină, descărcare purulentă din abcese, zone de organe afectate sunt trimise la laborator.
Microscopia preparatelor din materia primă. Agentul cauzal este o bară polimorfică gram-negativă care măsoară (1,5,6) x (9,5, 10) μm, cu capete rotunjite, nu există spori și capsule; lofotrih. În amprentele imprimate din organe se află clusterele singulare sau compacte.
Izolarea și identificarea culturii agentului patogen. Agentul cauzal este aerobic, temperatura optimă este de 37 ° C, pH 6,8. 7,0, mediul nutritiv nu este necesar. Materialul de testare este placat pe agar și în bulion cu glicerină. Dacă materialul este contaminat cu o microflore străină, acesta este tratat cu penicilină (1000 U / ml).
În medii dense după 24 de ore de incubare excitatoare generează un mic, transparent, mutneyuschie albicios mai târziu colonii cu un luciu metalic, pot apărea colonie I în formă de linii mari (până la 7 mm) este în formă de M. Pe agar de sânge, mediile glicerinizate cresc odată cu formarea unei colonii de portocale cremoase. Pe medii lichide după 24 de ore, 48 de ore cauzează o înclinare a mediului, formarea unui film, care după adăugarea de roșu neutru are o culoare roșu portocaliu. Pentru culturile de bulion, un miros de mucegai este caracteristic. Agentul cauzal în frotiuri din culturi pure se găsește singură, în perechi, în lanțuri scurte sau în grupuri de 5. 7 bucăți.
Culturile cu culturi tipice P. pseudomallei și caracteristicile morfologice sunt investigate prin proprietăți enzimatice. Agentul cauzal fermentează cu formarea unui acid gluco-zu acid, sucroză, lactoză, maltoză, galactoză, dulcite; dextrina nu formează indol și hidrogen sulfurat, diluează lent gelatina, coagulează și peptonizează laptele, hidrolizează arginina.
Culturile izolate sunt, de asemenea, identificate în reacțiile serologice: RA, RNGA, RP.
Biotestare. O suspensie de material este infectată cu șobolani intraperitoneali (0,5, 1,0 ml) și porci de guinea. În cazuri pozitive, animalele mor în funcție de virulența tulpinii în ziua a 3-a 15-a. La cobai de sex masculin, Fe-nomenus Strauss se poate dezvolta.
În ceea ce privește semnele de diferențiere și P. mallei P. pseudomallei folosind criterii morfologice (a se vedea. Tabl.32), precum și capacitatea de a sintetiza P.pseudomallei pe agar cu sânge de portocale cremos lapte pigment peptonizirovat, gelatină hidrolizată, cauza infecție atunci când Gi-liner șobolani.
Pseudomonas de nurcă. Infecții acute cu scurgeri infecțioase. Se caracterizează prin pneumonie hemoragică, semne de sepsis. În plus față de găuri, vulpile și vulpile sunt sensibile; la animalele din alte specii, agentul cauzator poate provoca pneumonie, postpartum, complicații post-chirurgicale.
Agentul cauzal al pseudomonaselor de nurcă este bacteria Pseudomonas aeruginosa, genul Pseudomonas, familia Pseudomonadaceae.
Diagnosticarea la laborator a pseudomonelor de nurcă se bazează pe rezultatele examenului bacteriologic.
Examinarea bacteriologică, inclusiv a chaet o detectare a agentului patogen în microscopia UI Todd-lumină hrana, izolarea unei culturi pure de CMV însămânțate pe medii de cultură și identificarea agentului cauzal cultural-morfologice, enzimatice și proprietăți serologie cal.
Material pentru studiu. Laboratorul este trimis în zonele afectate ale plămânilor, ganglionilor limfatici regionali, zenku-sat, ficat, rinichi.
Microscopia preparatelor din materia primă. P. aeruginosa în frotiuri colorate de Gram este detectat sub formă de tije gram-negative negative drepte sau curbe de 0,5 în lungime. 1,4 pm, lățime 0,2. 0,4 μm, fără capsule și spori; formează flagelă. Este distribuită sub formă de celule singulare, lanțuri scurte.
Izolarea și identificarea culturii agentului patogen. Exciterul este aerobic, temperatura optimă este de 35,37 ° C, este neobișnuită pentru mediul nutritiv. Materialul cercetat este însămânțat pe MPA, în BCH.
După o creștere de 24 de ore în P. aeruginosa manifestat mediu pomutne-BCH niem, formarea peliculei de suprafață și grayish precipitat alb datorită miercuri pigment este de culoare albastru-verde, cu îmbătrânirea culorii coloniei de cultură devine maronie. La MPA excitatoare genereaza doua tipuri de colonii: mari (diametru de 2. 5 mm), semitransparent, gri, margine netedă, plană și centru de ridicat și mici dur. Tulpinile izolate din tractul respirator și din tractul genito-urinar pot forma colonii mucoase. Mediul înconjurător al coloniilor este colorat datorită pigmentului în culoarea albastru-verde. Pathogen sintetizeaza patru tipuri de P & G-ment: pyocyanin (albastru-verde sau galben-verde), fluo-restsein, piorubin și pigment negru-maro. Pentru depozitele kultivirova de P. aeruginosa în izolația primară a testului ma-Therians folosind medii selective speciale cu anti-biotics.
În culturile izolate, sunt studiate proprietățile enzimatice. Pentru P. aeruginosa caracterizat prin următoarele caracteristici: formarea de dihydrolase arginină, oxidaze, hidroliza gelatina despicarea glucoză, beta-alanină, D-, L-asparagina, denitrificare, și capacitatea de a crește la 4l ° C
Specia este eterogenă în antigeni somatici O. Pentru iden ident nivel-O-RA serogrup utilizat pe sticla, cu doar explora culturi care au marcat mini-MUM doua dintre cele trei proprietăți fiziologice caracteristice formei: formarea pigmentului pyocyanin divizarea gluco-PS, creșterea la 41. 42 ° S. Se utilizează un set de trei seruri monovalente polivalente și unsprezece. Antigenul este 18. O cultură de agar de 20 de ore de P. aeruginosa. inactivat prin fierbere într-o baie de apă timp de 1,5 ore [concentrație (3,5) * 109 / ml]. Antigenul a fost testat inițial cu seruri polivalenta, atunci când primește un rezultat pozitiv - monovalent, membri ai unui anumit ser polivalent. Rezultatul este luat în considerare după 3. 6 min.
Biologics. vaccin monovalent formolkvastsovuyu pseudomonosis nurci se prepară după cum urmează: tulpina vaccin cult py (Sixth serotipul) au fost crescute pe un mediu pit-TION, formol inactivat, adsorbit pe alum, a fost monitorizat pentru sterilitate, inofensivitatea, activ-Ness.
ser Diagnostic-O aglutinare pentru identificarea gri-grup P. aeruginosa includ trei livalentnye în ser: № 1 (03, 04, 05, 06, 07), № 2 (02, 08, 09), № 3 (010 , 011, 012) și unsprezece seruri monovalente corespunzătoare. Conceput pentru a identifica P. aeruginosa la nivelul serogrupului O.
REFERINȚE PENTRU LUCRĂRI INDEPENDENTE
1. Să se familiarizeze cu preparatele biologice pentru diagnosticul serologic și allegic al săpăturilor.
2. Să studieze proprietățile morfologice, tinctoriale, culturale și enzimatice ale P. aeruginosa.
3. Să se familiarizeze cu preparatele biologice pentru profilaxia și diagnosticarea specifică a pseudomonaselor de nurcă.
1. Care este semnificația cercetării bacteriologice pentru diagnosticul de laborator al sapa?
2. Ce metode imunologice sunt utilizate pentru a diagnostica bolile?
3. Care sunt proprietățile biologice ale agentului cauzal cauzat de pseudomonas?
4. Ce biologici sunt utilizați pentru profilaxia specifică a pseudomonaselor de nurcă și identificarea serologică a agentului patogen?
5. Care este studiul bacteriologic pentru melioidoză?
Articole similare
-
Stenoza etiologiei poștale, clasificarea, clinica, diagnosticul, diagnosticul diferențial
-
Ajutați-l pe doctorul doctor să se specializeze în diploma de diagnostic clinic de laborator și
Trimiteți-le prietenilor: