Recomandări metodice pentru lecția practică №12
Pe tema: "Familia de bacterii intestinale (Escherichia, Salmonella)".
1.Reprezentarea cunoștințelor privind studiul morfologiei, biologiei și rezistenței Escherichia, Salmonella, metodele de diagnosticare în laborator și prevenirea bolilor cauzate de acestea.
2. Să studieze regulile de luare, direcționare, înregistrare și livrare a materialului la laboratorul bacteriologic pentru infecții intestinale.
3. Să stăpânească tehnica și tehnica efectuării primei etape de examinare microbiologică a fecalelor pentru izolarea enterobacteriilor.
4. Să studieze mijloacele de prevenire și terapie specifice a bolilor cauzate de Escherichia, Salmonella.
Studiați proprietățile morfologice și tincturale ale Escherichia, Salmonella prin microscopia preparatelor finite și conform tabelului, desenați, semnalizați.
o infecții intestinale acute (sau suspiciune);
o la copiii sub 2 ani la admiterea la spital;
o în contact cu pacienții cu infecții intestinale;
· Introduceți un număr corespunzător numărului în direcția sticlei pe un tub;
· Scoateți un tampon steril din tubul de testare, umeziți tamponul (30% glicerol + 70% ICH), excesați-l, înmuiați tubul de testare de perete.
· Mișcările de rotație introduc un tampon în rectul examenului, care se află pe partea stângă, cu picioarele aduse la abdomen pe canapea;
· Scoateți tamponul, plasați-l într-un tub steril uscat, fără să atingeți marginile acestuia;
· Înainte de a le lua la laborator, eprubetele sunt plasate în frigider timp de două ore.
În plus, mișcările intestinului sunt colectate imediat după defășare din vas, oală, tavă specială sau folosind o tijă de sticlă, o bucla de sârmă, o spatulă din lemn. Dacă în excremente există impurități patologice (mucus, sânge, puroi), ele trebuie incluse în eșantionul eșantionat. Scaunele care nu sunt plasate într-un conservant sunt suspendate în ICN steril într-un raport de 1: 5 sau 1:10 și inoculate nu mai târziu de 2 ore după colectare. Materialul este plasat într-un conservant și depozitat până la începerea studiului la o temperatură de 4-6 0 C în frigider.
1. Studiați regulile pentru direcția, recepția și înregistrarea materialului care intră în rezervor pentru investigație. laborator (a se vedea anexa nr. 2).
2. Studiați regulile de luare și livrare a materialului pentru infecții intestinale (vezi anexa nr. 1).
Efectuați prima etapă de cercetare bacteriologică a materialului nativ (excreta) pentru a izola enterobacteriile.
· O picătură de semințe cu o buclă bacteriologică (o tijă de sticlă, un tub, o pipetă) se aplică pe suprafața unuia dintre mediile plăcilor într-un vas Petri, retragându-se la 1,5-2 cm de marginea cărnii;
· Însămânțarea se face cu o spatulă, frecarea materialului pe întreaga suprafață a mediului nutritiv, conform procedurii general acceptate;
· Atenție! În studiul scaunului, materialul de la un subiect este inoculat pe plăci Petri cu următoarele suporturi.
Pentru a izola Escherichia (37 ° C, 18-20 ore).
Pentru a izola Shigella (37 ° C, 18-20 ore).
- Ploskireva cu antibiotice;
- Ploskirev fără antibiotice.
Pentru izolarea salmonelei (37 ° C, 18-20 ore).
O bucla din materialul de testare este inoculată într-un tub cu bulion selenit (mediu de stocare pentru shigella și salmonella 37 0 C, nu mai mult de 18 ore.
Completați tabelul, indicând mijloacele de prevenire și terapie specifice a escherichiozei, febrei tifoide, paratifoidului A și B.
CERCETAREA BACTERIOLOGICĂ A MATERIALULUI
- Materialul este făcut un frotiu, colorat de Gram, microscopic și da un răspuns preliminar.
- Materialul dintr-un examinator este inoculat pe 6 vase Petri cu mediu: Endo și Levina - pentru izolarea EPE; Ploskireva cu antibiotic și Ploskireva fără antibiotic - pentru a izola shigella; BCA - pentru a izola salmonela; SPA - pentru alocare yersiniy. Toate culturile sunt incubate la 37 ° C timp de 24 de ore, exceptând o ceașcă cu ICA, care este incubată timp de 48 de ore.
- Materialul a fost inoculat în bulionul de selenită și incubat la 37 ° C timp de 14-16 ore.
- Materialul este fagodiagnostic (cu ciumă, tifoid, salmonella, bacteriofag polivalent de șigeloză), adică metoda accelerată de identificare, care permite un răspuns preliminar, dar nu exclude desfășurarea cercetărilor bacteriologice.
- Pe un vas Petri cu mediu Endo (Levin), sunt selectate 10 izolate, tipice pentru coloniile EPE.
- 1/3 din fiecare colonie este verificată pentru apartenența la E. coli. cu ajutorul RA pe sticlă cu ser polivalent escherichian OCA.
- A doua treime a aceleiași colonii este transferată într-unul din mediile de identificare primare: Kligler sau Russell sau Olkenitsky pentru a determina accesoriu generic al culturii și pentru a incuba la 37 ° C timp de 24 de ore.
- Partea rămasă (a treia) a aceleiași colonii este transferată într-o SPA înclinată în scopul izolării și acumulării unei culturi pure și identificării sale serologice și incubării la 37 ° C timp de 24 de ore.
- Identificarea primară a culturii (determinarea accesoriilor sale generice) se realizează în funcție de natura creșterii în mediul Kligler (Russell, Olkenitsky)
- Se cultivă o cultură pură pe mediu Giss și SPB cu două hârtii indicator (pentru indol și hidrogen sulfurat) și se incubează la 37 ° C timp de 24 de ore.
- Se însămânțează pe mediu Simmons și se incubează la 37 ° C timp de 24 de ore.
- Se însămânțează într-o coloană de agar semi-lichid și se incubează la 37 ° C timp de 24 de ore.
- Proba pentru oxidază.
PS. Primele 5 teste se referă la testele seriei diferențiale minime de enterobacterii.
- RA pune pe sticla cu esherihioznymi polivalenta OKA, RCF, ACS, CPR, CKE seruri (aparținând genului confirmat și cantitatea de seruri pentru a determina serotip EPE).
- RA pune pe sticla cu o cultură vie și OK-imunoglobulina pentru determinarea antigenului K și RA pe sticlă cu o cultură încălzită (la 100 ° timp de 30 minute într-o baie de apă) și Group și factorial O - serurilor pentru determinarea O - antigen EPE.
- Dacă nu este OK - factor de imunoglobuline și de grup și 0 seruri, pot fi determinate prin setarea serotip EPE dislocat RA cu culturi vii și încălzite (la 100 ° C timp de o oră) și grup OK - seruri.
- O probă pentru sensibilitatea tulpinii izolate la antibiotice și incubată la 37 ° C timp de 24 de ore.
- Contabilizarea rezultatelor tuturor testelor.
- La tulpinile mobile, se determină suplimentar antigenul H în RA pe sticlă cu Escherichia H-sera.
- Scrieți răspunsul (concluzie):
"Izolate E. coli .020: K 84, sensibil la levomicină și kanamicină, intermediar la tetraciclină, rezistent la penicilină și ampicilină".
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: