Diagnosticul de laborator al bolii lui Aujeszky

Boala Aujeszky (AD, pseudorabiei, paralizie tabloid infecțioasă, ciuma mâncărime, senzație de mâncărime nebun) - boală acută Leaky cu specii de animale / fermă Sun ?? ex de animale cu blană și rozătoare. Primatele sunt stabile de la mamifere. Animalele tinere sunt mai sensibile decât adulții. Păsările nu sunt sensibile. AD este caracterizata prin semne de leziuni ale creierului și măduvei spinării, mâncărimi severe și zgârierea (de la soare ?? specii de ex, altele decât cele de porc ?? s).







Boala apare în toate țările europene, America de Sud și de Nord, Africa, Asia sub formă de enzootică și provoacă mari daune economice.

Virusul bolii Aujeszky (BWA) aparține familiei Herpesviridae. subfamilia Alphaherpesvirinae. genul Varicellavirus. În primul rând stabilit și a descris boala in Europa, maghiar de știință A. Aueski în opțiunile 1902ᴦ.AG la BWA ustanovleno.Metodom nu cruce AG înrudire BWA și simplu gerpesa.Virus izofluranul induce BHA, KSA, PA.

Diagnosticul se bazează pe date epizootice, simptome ale bolii, modificări pathoanatomice și rezultate ale studiilor de laborator.

Principalele metode de diagnosticare de laborator: izolarea virusului, imunofluorescența directă și indirectă, PDR, metoda radioimunologică, testul cutanat, pH, RSK, ELISA și biotest.

Izolarea virusului. Luarea și pregătirea materialului. Pentru izolat excite ?? Eniya a Spune bolii Aujeszky folosind felii de creier pulmonar, sat ?? ezenki, ficat, noduli limfatici, amigdale obținute la autopsie animalelor moarte. În viața de la pacienții cu porcine, virusul poate fi izolat din secrețiile nazale, în care apare în ziua a 4-6a a bolii și persistă timp de 5-11 zile după recuperare. De la animalele avortați se utilizează fructe și placente.

Atunci când colectarea de materiale pentru examenul virusologic trebuie să fie atenți nu sunt distribuite uniform ?? virus enii în diferite zone ale creierului, în acest sens, pentru a evita erorile de diagnostic, trebuie luate cel puțin 2-3 eșantioane din diferite părți ale creierului, situate la o anumită distanță de la fiecare altele. De obicei, la disecție, se selectează bucăți de cerebel, creier alungit din diferite părți ale emisferelor cerebrale ale creierului.

Materialul colectat este plasat în sticle sterile de penicilină sau tuburi de testare și este livrat la laborator într-o sticlă termos. Materialul poate fi conservat într-o soluție tamponată de 50% glicerol (pH 7,2-7,4). Secretele cavității nazale sunt colectate cu tampoane sterile de bumbac, care sunt injectate în căile nazale și apoi imersate în eprubete cu soluție Hanks. conținând antibiotice.

Este extrem de important în documentul de însoțire să se furnizeze informații privind imunizarea animalelor și a vaccinurilor utilizate.

În laborator, materialele sunt prelucrate prin metodele uzuale: se prepară o suspensie de 10%, se centrifughează la 3-5000 rpm timp de 15-30 minute. Materialele conservate cu glicerină sunt spălate preliminar din acesta.

Pentru o mai mare probabilitate de izolat ?? Eniya virus și de a reduce numărul de biți ale probelor din diferite părți ale creierului printr-un fir-votnogo combinate în eșantion total, care a fost apoi pulverizat antibiotice obrabaty-vayut și testate. Pentru o retenție mai bună a virusului în suspensie, se pot adăuga 1-2% din vițelul sanguin inactivat. Înainte de utilizare, suspensia trebuie depozitată într-o formă înghețată și congelată (minus 30 ° C) sau la 4 ° C.

Infecția animalelor. Ca model de laborator pentru ?? virus Eniya izolate din materiale patologice Aujeszky obicei folosesc doi iepuri cântărind 2-2,5 kg, care se administrează intramuscular sau subcutanat cu 1 ml de 10% suspensie din materialul testat. Perioada de incubare-lea, în acest caz durează 36-48 ore, uneori, se poate prelungi Xia 4-6 zile, iar în unele cazuri -., chiar și până la 12 zile.

Distinge encefalitic. meningeal, paralitic, zudnevuyu și forme șterse ale bolii. Cursul infecției experimentale depinde în mare măsură de modul de infectare.







Forma encefalitară începe cu anxietate. care trece într-o excitație puternică, - se execută în jurul valorii de animale de companie cușcă-nervos oglya dyvayas, el a remarcat midriază, agățării sau urechi, macinarea dintilor, scurgerea excesiva de saliva din gura. Excitația se înlocuiește cu depresie - pacienți iepuri se află pe partea ta sau pe stomac, spate labe întinse de multe ori, atunci când încercarea de a obține animalele își pierd echilibrul și cad. Moartea are loc în perioada unui atac de excitare sau opresiune; Moartea este adesea precedată de paralizia membrelor.

Forma Zune este cea mai tipică pentru iepurii cu injecție intramusculară sau subcutanată a materialului. În cazuri pozitive la animale, după o perioadă de incubație de 2-3 zile, există o mâncărime puternică la locul inoculării. Inițial, se observă anxietate generală, animalul se trezește adesea, privind înapoi la locul introducerii materialului, apoi începe să lingă și să scoată lana din această zonă. De multe ori se poate observa cum un iepure, cu amărăciune, răstoarnă pielea și țesuturile musculare care stau la locul injectării. Uneori mâncărimi se observă în alte părți ale corpului, ceea ce duce la anxietate deosebit de severă. Iepurele cade pe lateral și poate muri brusc, fără a dezvolta paralizie, sau apare cu puțin timp înainte de moarte.

Forma meningeală se caracterizează prin excitație puternică, răzuire a dinților și opistoton. Animalul cade pe partea sa și moare cu convulsii clonice ". În același timp, la autopsie în plicuri meningeale, macroscopic, uneori nu sunt detectate urme de inflamație. Og poate fi detectat numai histologic (urme de meningită limfocitară).

Cu forme încețoșate și fulgere ale bolii lui Aujeszky, majoritatea iepurilor nu prezintă simptome ale bolii. De obicei mor noaptea. Seara, în ajunul morții, animalul pare destul de normal, iar dimineața se descoperă corpul său într-o poziție caracteristică - pe partea sa.

Bioîncercările considerat pozitiv, dacă iepurii sunt ucise cu semne clinic-glet ale bolii Aujeszky (clinica nervos, prurit, zgariere) 2-10 zile după inoculare o suspensie a materialului patologic. Ec dacă iepurii sunt ucise fără semne de bioanaliză bolii Aujeszky a fost repetată folosind materialul patologic al primului pasaj. Se crede că materialul călugăr-lyatsiya în camera anterioară a ochiului de iepure zudnevoy conduce la o formă caracteristică a bolii. Material pentru eliberarea ?? Eniya virus de la iepuri morți sunt creierul și țesuturi din cordonul ombilical si parenchimul-toznye organe ale coloanei vertebrale (plămâni, ficat). Moartea iepuri după administrarea materialului patologie agenții de porc s ?? sau animalele cu blană fără semne de mancarime si zgarierea pot indica recuperate ?? tulpini de vaccin wergild boala sa enii Aujeszky.

Se arată că culturile celulare sunt la fel de sensibile la virusul Aueș-ki ca la iepuri; acestea sunt, de asemenea, utilizate pentru diagnosticul de laborator al bolii atipice, în care experimentele pentru detectarea virusului în creier de către porcine prin infectarea iepurilor dau rezultate negative sau atipice.

Infecția culturii celulare. Pentru Eniya virus recuperat ?? de la porcii morți, bolnavi și iepuri s ?? frecvent utilizate culturi primare tripsinizate rinichi și tiroidă ezy des ?? s ?? celule de porc, viței-ing sămânță, fibroblaste embrionare de pui, linia transplantable PK-15, BHK-21. Pentru virus, subculturile primului pasaj al celulei renale a porcului și a bovinelor sunt subculturi foarte sensibile.

Când prima dată izolat ?? virus din material patologic enii este mai bine de a plasa tuburile într-un tambur rotativ, ceea ce contribuie la reducerea-Niju calendarul apariției acțiunii citopatogen. Pentru a identifica ultima eprubetă timp de 5 zile pe zi, văzută sub micro-scară. În absența modificărilor citopatice în a 5-a zi, culturile sunt supuse unei singure înghețări și dezghețări și se face un pasaj repetat. Fiecare material trece de 3-5 ori.

La alocarea primară a virusului, semnele de acțiune citopatogenă apar în ziua a 4-5a după inocularea culturii. În pasajele ulterioare, calendarul apariției CPD este redus la 15-20 de ore și devine mai pronunțat. Natura schimbărilor citopatice în diferite culturi ar trebui să fie diferită, care se datorează diferitelor efecte ale virusului asupra celulelor epiteliale și fibroblastice. În cultura celulelor renale, un porc, un embrion de porc sau un iepure, efectele citopatogene ale virusului sunt exprimate în formarea de sincițiu. La început, apar focare de celule rotunjite, limitele între care dispar; iar nucleele se mută în centru și formează conglomerate înconjurate de o cochilie comună. După câteva ore, grupurile acestor celule au o formă sferică, în citoplasmă ele par granulare. Apoi, există o exfoliere profundă a celulelor de pe suprafața sticlei.

În cultura de fibroblaste de embrion de pui efect citopatogen virusului apare rotunjirii celulelor și apariția granulozitate vacuolar-TION citoplasmei, urmată de desprinderea celulelor de pe suprafața sticlei. Titrurile virusului în perioada de dezvoltare maximă a CPD ajung, de obicei, la 10 6,5 - 10 7,5 TCD 50 / ml.

Diagnosticul bolii Aujeszky se face dacă specia aparținând virusului izolat în cultura celulară este confirmată în PH. Tulpinile virale ale virusului formează simplasturi tipice. Tulpinile, de multe ori pasivate în cultura fibroblastelor de pui, determină o mai mică exprimare a formării simplasturilor și a proliferării celulelor. Tulpinile, trecute în cultura fibroblastelor embrionilor pui, reduc virulența lor de 10-50 ori.







Articole similare

Trimiteți-le prietenilor: