Principala metodă este bacteriologică, cu identificarea culturii izolate prin metoda serologică și, dacă este necesar, prin metoda moleculară genetică.
Materialul de investigare în escherichioză, în funcție de forma sa, este fecale, vărsături, urină, puroi, sânge, material secționat.
La diagnostic coli enterita însămânțare se realizează în diferențialul diagnostic mass-media Endo, McConkey si Levin, identifica violet colonii lactoză pozitive roșii sau închise. Apoi plasate pe aglutinării de sticlă cu polivalenta seruri OK care conțin anticorpi la cele mai comune serovarului cauzând kolienterity. De obicei, verificați cel puțin 10 colonii din diferite cești.
Dacă rezultatul este pozitiv, se acumulează o cultură pură pe agar înclinat sau în mediul lui Kligler și Russell. Cu o cultură pură se pune reacția de aglutinare pe sticlă cu seruri monovalente care conțin anticorpi la un anumit serovar. Apoi, o reacție detaliată de aglutinare este stabilită în tuburi de testare cu o cultură fiartă pentru a determina antigenul O și cu o cultură vii pentru a determina antigenul K. După aceea, faceți o concluzie despre serovarul izolat.
În același timp, ei studiază proprietățile biochimice.
Pentru a izola bastoanele intestinal enterohemoragice, se utilizează agar cu sorbitol. deoarece EGCP, spre deosebire de alte Escherichia, nu fermentează sorbitolul. În plus, ele nu posedă enzima glucuronidază, care este, de asemenea, utilizată în diagnosticare.
EIA poate fi utilizată pentru a detecta enterotoxinele.
Cel mai specific pentru diagnosticarea bolilor cauzate de diareea E. coli. este o metodă moleculară genetică - diferite variante de PCR, hibridizare moleculară. Aceste reacții fac posibilă detectarea genelor de patogenitate ale E. coli. responsabile de sinteza citotoxinelor și adezinelor lor.
Shigellosis (dizenterie bacteriană) este o boală infecțioasă cauzată de bacterii din genul Shigella. care curge cu o leziune predominantă a intestinului gros.
În diferite țări, dizenteria bacteriană reprezintă 20-60% din infecțiile intestinale.
Genul este împărțit în 4 tipuri:
S. dysenteriae - serogrupul A, 15 serovari;
S. flexneri - serogroup B, 8 serovari;
S. boydii - serogroupul C, 19 serovari;
S. sonnei - serogroup D, 1 serovar.
În termeni genetici, toate speciile shigella au mai mult de 90% din omologia ADN atât între ele cât și cu Escherichia. Prin urmare, acestea pot fi atribuite unui singur genotip. Cu toate acestea, diferențele în fenotip, datorate în mare parte elementelor mobile ale genomului, duc la diferențe semnificative la specii datorită patogenității lor.
Cea mai frecventă cauză a shigellosis este bacteria serogrupurilor B și D.
Bastoane fixe mici, Gram-negative, au ferăstraie care asigură aderența; ei nu au o dispută, pot avea o microcapsule.
Anaerobe opționale, chemoorganotrofe. Ele cresc pe suporturi nutritive simple, sub forma unor colonii mici, translucide, incolore. Sunt predispuse la disociere în formele S și R. Mediile de diagnosticare diferențială sunt, de asemenea, date colonii incolore, deoarece nu rupeți lactoza. În medii lichide, formele S dau o turbiditate uniformă, R - formează un sediment de fund.
Toate shigella sunt mai puțin active decât alte bacterii intestinale.
Carbohidrații sunt fermentați în acizi fără gaz. Biovarele individuale, de exemplu - S. flexneri biovar newcastle. poate forma o cantitate mică de gaz.
Cea mai scăzută activitate enzimatică este posedată de S. dysenteriae. fermentând numai glucoza fara gaze.
caracteristică biochimic diferențial este fermentație manitol: S. dysenteriae nu degradează manitol, reprezentanți ai grupurilor B, C, D mannitpolozhitelny.
Spre deosebire de alte specii, S. sonnei poate descompune încet lactoza și sucroza timp de mai multe zile.
Nu formați H2 S. S. flexneri produce indol.
Complexul shigella antigenic include O-AG - lipopolizaharidă de perete celular, conform căreia bacteriile sunt împărțite în serogrupuri și serovare. K-AG este similară la toate speciile și poate masca O-AG. Aceasta inhibă aglutinarea prin antiserul O, care este îndepărtat prin fierbere timp de o oră. Determinarea structurii antigenice se efectuează pentru identificarea finală a bacteriilor.
Shigella sunt agenți patogeni care paraziți intracelular. Genele care codifică un complex de proprietăți virulente sunt localizate în cromozom și plasmide.
Toate tulpinile patogene conțin plasmide mari (120-140 kDa), care determină "fenotipul invaziv" al lui Shigella. Proteinele de invazie sunt codificate în principal de locusul ipa / spa (ipa - plasmida invazivă AH).
Acest locus este responsabil pentru formarea structurilor de secreție de tip III (proteine injectabile și invazive). În Shigella, acest sistem se numește secretton III. Cu ajutorul unui injectusome, bacteria injectează proteinele de virulență Ipa. Vir și alții în interiorul celulelor. Ei reconstruiesc actina intracelulară și se asigură că șigella intră în epiteliu.
Factorul principal al virulenței este exotoxina (citotoxina Shig). Acesta este codificat de o gena cromozomală stx. Cauzează moartea celulelor, inflamația și fluxul fluidului în leziune.
Shiga toxina este produsă în principal de Shigella din grupa A-S dysenteriae.
Toxina constă din două subunități: A și B. Componenta B furnizează legarea toxinei la receptorul glicolipid Gb3 pe membrane. Componenta A (enzima cu activitate de glicozidază) distruge p28N 28S într-o subunitate mare de ribozomi celulari. Acest lucru cauzează o încălcare ireversibilă a sintezei proteinelor și a deceselor celulare. Încălcarea absorbției Na și a apei, care duce la acumularea de lichid în submucoasă. Toxina Shiga are activitate hemolitică in vitro.
Toți agenții patogeni produc endotoxină - LPS a peretelui celular, care are un efect pro-inflamator.
Shigella are o rezistență scăzută la factorii externi. Cele mai rezistente sunt S. sonnei. care în apă de la robinet sunt menținute până la 2,5 luni, în apa rezervoarelor deschise - până la 1,5 luni. Produsele, în special produsele lactate, nu numai că pot fi conservate, ci și că se pot multiplica.
Factori patogeni ai shigella
Shigellosis este omniprezent, în special în țările în curs de dezvoltare. Anual, în lume, există până la 150 de milioane de cazuri de boală, cu mai mult de 1 milion terminând fatal. Aproximativ 70% dintre pacienți sunt copii cu vârsta de 1-5 ani
Shigellosis este o infecție antroponă.
Sursele de infecție sunt bolnavii și purtătorii de bacterii. Mecanismul principal al transmiterii este fecal-oral. Modalitățile de transmitere sunt diferite: în cazul dizenteriei, traiectoria alimentară predomină în Sonne, în timp ce în dizenteria lui Flexner apa este predominantă. Posibilă transmisie de contact la domiciliu. Un anumit rol îl au insectele - purtătorii pasivi - muștele, gândacii etc. care transferă agenții cauzali în produsele alimentare.
Doza infectantă este foarte mică - 10-100 celule, în special pentru Shigella din grupa A - S. dysenteriae. Perioada de incubație durează între 1 și 7 zile (de obicei 1-2 zile).
După infecție, shigella ajunge în tractul gastro-intestinal și ajunge la colon.
Pătrunderea bacteriilor în epiteliu este asigurată de proteine de tip III. După contactul cu celulele inzhektisomy M plasturi Peyer IPA proteine (IPAV si IPAS) formeaza un por in membrana acestor celule. In interiorul celulelor M-30 au fost injectate proteine virulente (proteine efectori), ceea ce conduce la polimerizarea intracelular rearanjare citoscheletului Actin. În această formulare M-celulă în sine pseudopodia și captează microorganismele aderente.
Răspândirea în continuare a shigella la celulele epiteliale sănătoase vecine are loc printr-un mecanism suplimentar de invazivitate numit "formarea cometă a actinei". În acest caz, proteina virulentă vir G activează polimerizarea actinei intracelulare. Din aceasta se formează o structură asemănătoare cu flagel, care este atașată la polul celulei bacteriene.
Astfel, inițial, agentul patogen imobiliar dobândește capacitatea de mișcare intra- și intercelulară. Aceasta asigură invazia laterală (laterală) a shigella în celulele vecine.
În mod similar, macrofage infectate. Proteinele invazivitatea (IPAV et al.) Stimulează producerea de citokine proinflamatorii IL-1, IL 18, IL chemo___________ neutrofile 8. În plus, acestea provoacă distrugeri prin fagocite apoptoza prin activarea caspazei-1. Consolidarea producției de citokine, de asemenea, are loc sub influența endotoxină Shigella.
Eliberarea activă a citokinelor duce la deteriorarea peretelui intestinal. Ele activează inflamația imună în intestine cu implicarea neutrofilelor. În cursul necomplicat al infecției, neutrofilele asigură o îndepărtare treptată a agentului patogen.
Distrugerea masivă a epiteliului intestinal și a endoteliului vaselor intestinului are loc sub acțiunea toxinei Shiga. Intrând în sânge, toxina Shiga poate afecta rinichii cu dezvoltarea sindromului hemolitic-uremic și a insuficienței renale.
Deteriorarea peretelui intestinal duce la pătrunderea bacteriilor în țesuturile subiacente, cu apariția hemoragiilor și a răspunsului inflamator al submucozei. În acest caz, absorbția apei și a electroliților este afectată, ceea ce duce la apariția diareei.
Endotoxina, atunci când este ingerată, provoacă febră și intoxicație generală.
Boala se caracterizează printr-o creștere a temperaturii corpului la 38-39 ° C, durere abdominală, diaree. Exerciții lichide, cu un amestec de mucus și sânge (hemocolitică). Tenesmus caracteristic dureros - încercare nereușită de a defeca. Cea mai gravă formă de dizenterie este cauzată de S. dysenteriae (grupa A). Pot exista complicații - sângerare intestinală, colaps, perforare intestinală, paraproctită. Există forme de dizenterie mai ușoare, neclară și atipice, dificil de diagnosticat. Uneori boala trece într-o formă cronică sau se formează purtătorul.
După boală, imunitatea este fragilă și scurtă. Cel mai adesea este specific speciilor.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: