Deshidratarea materialului histologic

MATERIAL DESIGN

După fixare pentru care a fost folosit formalină, bucățile sunt spălate timp de 6,12 sau 24 de ore în apă curentă: pe tubul de apă este introdus un tub de cauciuc, capătul căruia este coborât într-o cutie cu gât cu gât larg. Pentru spălare este convenabil să se utilizeze desicatoare de diferite mărimi echipate cu macaraua: un furtun este introdus în deschiderea capacului exsicatorului, prin care este alimentată apa și este drenat printr-un robinet de exsicator.







În cazul zăvorului inclus acid picric, materialul trebuie să fie clătit în mai multe schimbări de alcool de 70%, după fixarea folosind -sa mercuric iodată 70% alcool. Materialul fixat pentru unele reacții histochimice, studii microscopice și imunocitochimice, este spălat din agenți de fixare în diferite amestecuri tampon.

Dacă este necesar, bucățile de țesut înainte de deshidratare pot fi reduse, tăiate. Dacă materialul după fixare nu este imediat supus postării, acesta poate fi lăsat în 70-80% alcool.

MODURI DE DRAINING TISSUE

Înainte de turnarea materialului în parafină sau celloidină, acesta trebuie deshidratat. Există mai multe metode tradiționale de deshidratare. Cea mai obișnuită este deshidratarea în alcooli de concentrație ascendentă, pornind de la 70%. De obicei se folosește o baterie de alcooli, care constă din două porții de 96% și doi - 100% alcool. Durata procesului de deshidratare în alcool a fost în medie de 48 de ore, în funcție de calitatea materialului (conținutul de grăsime din țesut) și de dimensiunea pieselor și de cantitatea lor. Când utilizați aparatul pentru o cantitate de alcool de umplere este crescut, iar atunci când se realizează bucăți de bateria manual de alcool lor cu atenție și șters cu o cârpă de hârtie de filtru sau un tifon, care permite să se schimbe alcoolii în bateria mai puțin frecvent.

Procesul deshidratării poate fi accelerată prin scuturarea ocazional bucăți în bănci cu alcooli sau prin plasarea lor într-un incubator la 37 ° C Alcoolul din baterie trebuie înlocuit în timp util. Controlul adecvării alcoolului permite o probă cu apă. Într-o cantitate mică de alcool, turnat dintr-un borcan, adăugați o picătură de apă. Turbiditatea soluției indică necesitatea înlocuirii alcoolului din baterie.







Alcoolul absolut poate fi preparat de la 96%. Pentru aceasta, se utilizează sulfat de cupru,

Thorium este plasat într-un mortar și calcinat pe o lampă de duș sau într-un termostat, frecându-se și amestecând periodic la o consistență de praf și o culoare albastru palid. Apoi, sulfatul de cupru (1 parte) se umple într-un borcan cu alcool 96% (4 sau 6 părți), închis etanș cu un capac, agitat și lăsat timp de câteva zile, agitat ocazional. Sulfatul de cupru adsorbține apă din alcool și din nou devine albastru. Înainte de utilizarea alcoolului absolut, se monitorizează printr-un alcoolmetru sau se adaugă o picătură de alcool preparat în tub cu o cantitate mică de xilen (4-5 ml) (soluția devine tulbure dacă alcoolul nu este suficient deshidratat). O bună apă adsorbantă din alcool este, de asemenea, silicagel după o uscare preliminară într-un termostat.

În absența alcoolului 100% în baterie, este inclusă o altă porție de alcool 96%. Cu toate acestea, în acest caz există întotdeauna pericolul de deshidratare insuficientă și apariția unor dificultăți în obținerea de felii.

Pentru a accelera deshidratarea, utilizați acetonă fără impurități (CHDA), adăugând în prealabil gel de silice pentru a îndepărta resturile de apă sau acetonă distilată. Deshidratarea se efectuează în 2-3 treceri de acetonă de la câteva ore la 1 zi, în funcție de dimensiunea obiectelor. Deshidratarea țesuturilor este posibilă utilizând 99% alcool izopropilic, care este amestecat direct cu para-Finom fără solvenți intermediari (xilen, cloroform, etc.). Aceeași proprietate este posedată de dioxan, dar datorită toxicității sale înalte, nu a găsit o aplicare largă în tehnica pathohistologică

Pentru deshidratare cu glicerină [Becker GM. 1958; Wolf J. 1939 și colab.]. Bucățile de țesut sunt plasate succesiv în glicerină 60%, 80% și 100% timp de 3-4 ore și apoi într-un amestec format din părți egale de 100% glicerină și xilen.

Efectul pronunțat asupra vitezei de deshidratare este exercitat de radiațiile cu microunde. Obiectele din alcool 70% sunt plasate timp de 20 de secunde într-un cuptor cu microunde (2,5 Hz / 500 V) și apoi se dozează în alcool absolut timp de 30-60 de minute.

Materialul secționat și biopsia este adesea deshidratat în dispozitivele AT-5 etc., urmată de impregnarea cu toluen, cloroform sau amestecul lor cu parafină. În același timp, se adaugă două porții de alcool 96%, iar două sunt 100%. Durata totală a deshidratării este de 48 de ore. Avantajul utilizării aparatului este acela că în el materialul este amestecat constant și este în stare suspendată. Cu toate acestea, dispozitivul nu pornește automat după o scădere bruscă a tensiunii în rețeaua electrică, ceea ce poate duce la uscarea excesivă a unei cantități mari de material.







Articole similare

Trimiteți-le prietenilor: