Determinarea colitei și indicele coli al apei prin metoda filtrelor cu membrană


Bacilul intestinal este un locuitor permanent al părții groase a intestinului uman și a tuturor animalelor cu sânge termic. indicator al poluării fecale a mediului extern și un indicator indirect al prezenței în apă a agenților patogeni






Indicele coli (indicele E. coli) este numărul de tije intestinale găsite în 1 litru de apă aflată în studiu.
Titrul de coli se determină prin metodele de testare a fermentației. pe baza capacității Escherichia coli de a se dezvolta la temperaturi ridicate și zaharuri fermentate (manitol, gluco-zu etc.) cu eliberarea gazului.
1. Ele dau mai întâi eșantionul de fermentație: diluții diferite de lichid de testare folosind sterile pipete-TION este introdus în balon și tuburile cu medii lichide speciale de colț de levodnymi (Eijkman)
Raportul dintre mediu și apa care trebuie umplut trebuie să fie 1: 2. Culturile sunt cultivate într-un termostat la 43-44 ° C timp de 24 de ore. La această temperatură, dezvoltarea microorganismelor care nu au o valoare indicatoare sanitară pentru apă este suprimată. Apoi examinați culturile (prezența bulelor de gaz în flotoare, decolorare, turbiditate).
2. utilizarea unui bacteriene materie dizolvată buclă de însămânțare într-un vas Petri cu Endo Agar și cultivate cul-rotund, la 37 ° C 24 h. Forma tipica de colonii rosu inchis, rosu aprins sau roz, cu centrul mai inchisa, avand un luciu metalic sau fără negoPri Lipsa creșterii caracteristice a eșantionului oferă un răspuns negativ.
În prezența unor colonii tipice dintre ele, se fac frotiuri, se colorează Gram și microscopia. Dacă tijele gram-negative mici, care nu formează spori, se găsesc în frotiuri, trec la 3 etaje.

3. Se resetează într-un mediu de carbohidrat lichid diluat (Eikman et al.). Culturile sunt cultivate la 43-44 ° C timp de 24 de ore, după care sunt luate în considerare în cele din urmă. În prezența turbidității în culturi, formarea gazului și modificările de culoare dau un răspuns pozitiv, ale cărui rezultate sunt exprimate sub forma unei colite.
Indicele coli este determinat prin metoda filtrelor membranare - peliculelor poroase dintr-o micro-chat. sunt supuse sterilizării prin fierbere dublă în apă distilată timp de 15-20 minute. Apoi, cu o pensetă sterilă, filtrele sunt plasate pe un dispozitiv Seitz. o filtrare sub vid într-o anumită cantitate de apă supusă anchetei (printr-un filtru cu membrană - nu mai mult de 100 ml de apă).
filtrul este plasat sedimentat pe suprafața mediului Endo, umplut într-un vas Petri, presat puternic împotriva mediului. Într-o ceașcă, puteți pune 4-5 filtre. După cultivarea într-un termostat la 37 ° C timp de 18-24 ore, se numără coloniile crescute pe filtru, caracteristice grupului Escherichia coli. ia materialul pentru frotiuri, le pata pe Gram și microscopie.
În cazul în care sunt prezente în frotiurile mici nesporogeni colonii gram coli din restul însămânțări în flacoane cu un volum mic de mediu lichid apos cărbune-latre de. Culturile sunt crescute la 43-44 ° C timp de 24 de ore. Prezența gazului + p-th

Determinarea sensibilității microorganismului la antibiotice utilizând metoda Standard Disc.

Cultura este însămânțată cu un gazon pe agar nutritiv sau mediu AGV într-un vas Petri.

Mediu AGV: bulion de pește nutritiv uscat, agar-agar, fosfat de sodiu disubstituit.

Pe suprafața semănată, pensetele sunt plasate la aceeași distanță de celelalte discuri de hârtie care conțin anumite doze de antibiotice diferite. Culturile sunt incubate la 37 ° C până în ziua următoare. În funcție de diametrul zonelor de întârziere a creșterii culturii bacteriilor studiate, se consideră că este sensibil la antibiotice.







Determinarea sensibilității unui microorganism la antibiotice prin metoda diluțiilor în serie

Osn rr AB este preparat cu un bufet r-ra sau r-la special. S-au preparat diluții seriale ale preparatului în eprubete de testare care conțin 1 ml de bulion de pește de pește. În 1 eșantion, se adaugă 1 ml din r-la inițial, după care se prepară o serie de diluții ale preparatului. În fiecare adăugați 0,1 ml de vârf bact. Pregătiți controalele (mpb + susp, mpb_AB). Se incubeaza. Absența turbidității - întârzierea creșterii în prezența acestei concentrații conc

Reacția de hemoliză: tehnica de stabilire, mecanismul de reacție, înregistrarea rezultatelor.

Este un fel de reacție de liză. Ca AH în această reacție, se utilizează celule roșii, care sunt lizate de hemolizine în prezența complementului. Pentru a stabili reacția de hemoliză, aveți nevoie de: 1) eritrocite ale unui berbec; 2) ser hemolitic care conține hemolizine la eritrocite de miel și 3) complement.

Acesta curge în două faze. În prima fază, există o interacțiune între eritrocite și ser hemolitic, în a doua fază eritrocitele sensibilizate fixează complementul și apare liza.

Pentru a seta reacția de hemoliză în 1 tub, se adaugă 0,5 ml de ser hemolitic, un complement diluat 1:10. 3% din suspensia de eritrocite de miel pentru sedimente. 2 tuburi servește drept control complementar, 3 tub hemolitic ser, 4 tuburi de testare-eritrocite. Contabilitate după incubarea amestecului în decurs de 1 oră.

25. Metode biologice Studii având drept scop determinarea prezenței agentului patogen în materialul de toxine și detectarea agentului patogen (in special cu un conținut inițial mic în probă). Metodele includ infectarea animalelor de laborator cu material de testat, urmată de izolarea unei culturi pure a unui agent patogen sau constatarea prezenței toxinei microbiene și natura sa. infecții experimentale de simulare la animalele sensibile - un important instrument pentru studierea patogeneza bolii și natura interacțiunilor în cadrul sistemului de microorganisme macro-organism. Pentru a efectua eșantioane biologice, se utilizează numai animale sănătoase cu o anumită greutate corporală și vârstă. Material de infectare este introdus în interiorul căilor respiratorii, intraperitoneal, intravenos, intramuscular, intradermic și subcutanat în camera anterioară a ochiului, o gaură bavuri prin craniu, suboccipital (într-un mare creier rezervor). Animalele iau sange in vivo, exudatele din peritoneu, după moarte - sânge, bucăți de diferite organe, LCR, exudat din diferite cavități.

26. O reacție aproximativă a aglutinării (tehnica de formulare, înregistrarea rezultatelor).

OPA se efectuează înainte de desfășurarea unei reacții detaliate pentru a obține o înțelegere preliminară a speciilor izolate sau a serorilor de bacterii

Se pune la temperatura camerei pe diapozitive. În acest scop, o picătură de ser se aplică ochelarilor separat unul de celălalt la diluții mici (1: 10-1: 20) și două picături de soluție de clorură de sodiu 0,5% (Control) în acest scop utilizând o pipetă Pasteur. În fiecare picătură (cu excepția controlului), coloniile suspecte sunt luate de pe suprafața unui mediu nutritiv dens. Se amestecă până la umflare. Rezultatele reacției sunt luate în considerare după 5-10 minute. Cu o reacție pozitivă în picături cu ser, apar fulgi mari sau mici, în timp ce în cazul unei reacții negative, lichidul rămâne uniform turbid.

27. Reacția desfășurată a aglutinării (tehnica de stabilire, înregistrarea rezultatelor).

Pentru a determina AT în serul de sânge al pacientului, se desfășoară o reacție de aglutinare (PA). Pentru aceasta, se adaugă o serie de diluții serice de diagnostic - o suspensie de microorganisme sau particule ucise cu Ar sorbate. Diluția maximă care dă aglutinare Ag se numește titrul sângelui seric.

Aglutinarea este adeziunea bacteriilor atunci când AT-urile acționează asupra lor în prezența unui electrolit. Se utilizează: 1) pentru a determina speciile și serovarul de bacterii izolate; 2) pentru a detecta AT în serul pacientului (serodiagnostic).

Trei componente sunt necesare pentru producerea de RA: AG (aglutinogen), AT (glutenină) și electroliți (soluție izotonică de clorură de sodiu). Ca AH în RA, 18-24 ore de vii sau ucis cu formalină, se utilizează un alcool de bacterii. Cele mai stabile AH sunt suspensiile de microorganisme uciși.

Pe un slide de sticlă:

1-a picătură: - ser aglutinant la agenți cauzatori ai dizenteriei;

2-a picătură: - ser aglutinant la agenți patogeni ai febrei tifoide;

Picătură: - soluție salină (control).

Se adaugă la fiecare picătură cultura bacteriană de test pură. Mixt.







Articole similare

Pagina anterioară

Pagina următoare

Trimiteți-le prietenilor: