SUBIECT: DIAGNOSTICILE MICROBIOLOGICE ALE UNUI TIP DE PARAGAȚIE ȘI PARATIFI.
Scop: studierea metodei bacteriologice de a studia tifoidul și paratifoidul în prima săptămână a bolii.
febră tifoidă, paratifoidă A și B - boli infecțioase acute, similare în manifestările clinice, patogeneza, proprietățile lor biologice, caracterizate prin leziuni ale sistemului limfatic al intestinului subțire, bacteriemie apar cu intoxicație severă, ficat mărit, splina, adesea cu erupții cutanate roseolous. Prin urmare, ele sunt considerate împreună. Dar acestea sunt boli independente. Agentul cauzal al typhi tifoidă Salmonella (Ebert-Gaffki coli), paratifoidă A - S.paratyphi A (vibrarea-Brion Kaiser); excitatoare paratyphi B - S. raratyphi B (stick-Shotmyullera) aparțin genului familiei Salmonella Enterobactericeae. Numele genului este dat în onoarea savantului american D. Salmon.
Acestea sunt bastoane mici cu capete rotunjite, peritrichs, spori și capsule nu se formează, gram-negative.
Salmonella febrei tifoide și paratifoide - anaerobe facultative. Temperatura optimă de creștere pentru ele este de 37 ° C. Pe MPA formează colonii în formă rotundă, gălbui, umede, netede, în formă de S. S.paratyphi B (bastonul Schottmuller) poate să crească sub formă de colonii mari cu un rolă mucoidală de-a lungul periferiei. In mass-media-diagnostic diferențial Endo și Levine Salmonella colonii sunt incolore, cu o tentă albăstruie, la mediu Wilson Blair (bismut sulfit agar) prin reducere cu sulfit de sodiu la sulfură de sodiu - negru sau maro-verde; cauza turbidității uniforme a BCH. În număr scurt Hiss Salmonella typhi descompuse de glucoză, maltoză, acid manitol până când nu gaz, dar tije parathyphoid - în acizi și gaz.
Salmonella de tifoid și paratifoid A sunt acidulate, iar paratipa B este acidificată cu lapte de litmus. Gelatina nu este lichefiată, indolul nu se formează, produce H2S
Salmonella conține antigenul O termostabil somatos, flagelul, antigenul H termolabil. Generalitatea structurii antigenice conduce la faptul că salmonella de tifoid și paratifoid sunt aglutinate nu numai în antiseruri omologe, ci și în antiseruri. Pentru a exclude aglutinarea în grupuri transversale, se prepară seruri monoreceptoare care conțin anticorpi împotriva fracțiunilor specifice de Salmonella. Agenții cauzali ai tifoidului și ai parafitelor A și B se găsesc conform proprietăților antigenice conform schemei Kaufman-White.
Sursa bolii este bolnavii și transportatorii.
Mecanismul de transmitere a infecției: fecal-oral. Calea navigabilă predomină, iar mâncarea este mai puțin frecventă și o modalitate de contact în gospodărie.
Tabelul 3
Schema de patogeneză a febrei tifoide
Recuperare completă;
Complicațiile asociate cu dezvoltarea ulcerelor - perforații, sângerări intestinale.
Tranziția la bacteriocarrier.
Perioada de incubație pentru febra tifoidă este în medie de 14 zile. Debutul bolii se caracterizează printr-o creștere progresivă a temperaturii în timpul fenomenelor de creștere a endotoxinei otrăvire afectează în slăbiciune generală, dureri de cap, confuzie, insomnie, delir. La sfârșitul primei săptămâni de boală, temperatura corpului ajunge la 40-41 ° C. În a doua săptămână de boală pe pielea abdomenului există o erupție cutanată-olită, se exprimă simptomele enterocolitei. Excretor faze alergice foliculi de țesut limfoid și placa suferă necroză, ceea ce poate duce la perforare suplimentară intestinală, peritonită și moarte (3-4 saptamani ale bolii). Posibile complicații: pneumonie, miocardită, șoc infecțio-toxic.
Materialul de testare, în funcție de stadiul patogenezei (indicat în tabelul 3).
Medii nutritive: bulion biliar, mediu Rapoport (bulion de pui, glucoză sau manitol, indicator Andrede). Bilele sunt un mediu favorabil pentru Salmonella. Medii diferențiate de diagnosticare Ploskireva, Endo, Levina.
În funcție de faza bolii, metodele de diagnosticare sunt diferite. În prima săptămână a bolii, sângele este luat pentru investigație și se eliberează cultura sângelui. În a doua săptămână de boală, când anticorpii apar în sânge, reacția lui Vidal este pusă - o reacție detaliată de aglutinare pentru a determina anticorpi în serul de sânge al pacientului. În a treia săptămână de boală - pentru a confirma diagnosticul pentru studiu, efectuați o mișcare intestinală sau urină și alocați coproduct sau urinocultură.Activitatea independentă a studenților
Pentru a studia schema de examinare bacteriologică a sângelui pacientului cu febră tifoidă (Schema nr. 2).
Pentru a semăna sângele unui pacient cu febră tifoidă pe bulionul biliar sau pe mediul Rapoport.
Treceți cultura de la Rapoport miercuri la Endo.
Din coloniile incolore pe mediul Endomo, pregătiți un frotiu, pată Gram, microscopie, schiță. Pentru a traversa colonii incolore pe mediul Russell sau IPA oblic.
Pentru a studia puritatea culturii pe mediul Russell sau pe IPA oblică. Faceți culturi pe MPA pentru a determina sensibilitatea culturii la antibiotice prin metoda discurilor de hârtie, pe mediile Giss sau MTS-12E, la MPB pentru determinarea proprietăților biochimice și proteolitice.
Realizați reacția de aglutinare pe un pahar de cultură pură cu seruri polivalente și monoreceptoare.
Pentru înregistrarea seriei "motley" sau MTS-5 - 12E (pe materialul demonstrativ). Contabilizarea antibioticogramelor.
Pentru a elabora un protocol pentru examinarea bacteriologică a sângelui pacientului cu suspiciune de febră tifoidă și a da un aviz.
Elaborarea unei scheme de examinare bacteriologică a fecalelor pacientului cu suspiciune de febră tifoidă.
Direcții de lucru independente
Studiile bacteriologice ale febrei tifoide în prima săptămână a bolii au loc în mai multe etape.
Prima zi - 5-10 ml de sânge luat steril din vena pacientului la scroafă în 50-100 ml de bulion biliar sau în mediu Rapoport. Așezați culturile într-un termostat timp de o zi la o temperatură de 37 ° C.
Mediul Rapoport constă din bulion de peptonă din carne, 10% bile, 2% glucoză sau 1% manitol și 1% indicator Andrede. Odată cu creșterea S. typhi în mediul Rapoport, se observă turbiditate, roșeață și nici un gaz. Cu creștere. S.paratyphi A și B, mediul devine roșu, ca rezultat al formării flotorului de gaze plutește în sus.
A doua zi. Miercuri, Rapoport este transferat la mediul Endo și plasat într-un termostat pentru o zi la o temperatură de 37 °.
A treia zi. În mediul endo, coloniile incolore cresc (deoarece nu descompun lactoza), care sunt transferate în mediul lui Russell pentru a izola cultura pură.
A 4-a zi. Ei fac o înregistrare a culturilor pe mediul lui Russell, determină puritatea culturii. Pe mediul lui Russell, lactoza nu se descompune (mediul este roșu), glucoza se descompune (albastru mediu). Cultura este curată. Pregătiți frotiuri, pictați pe Gram, microscopie, determinați mobilitatea. În frotiuri, tije gram-negative cu dimensiuni medii, cu capete rotunjite, mobile, peritrichs.
Cu cultură pură se obține reacția de aglutinare indicativ cu aglutinant diagnostic seruri tifoidă, paratifoidă A și B. Cu seruri, care a dat o reacție de aglutinare pozitiv, da dislocat. placate cu cultură pură pe mediu Hiss sau MTS-5U pentru a determina proprietățile biochimice de pe bulion de carne-peptonă - proprietati proteolitice asupra MPA - pentru susceptibilitatea la antibiotice și identificarea relațiilor la bacteriofag tifoide.
Pe medii de Hiss, glucoza, maltoza și manitolul se descompun într-un acid fără gaz. Lactoza și sucroza nu se descompun. Pe BCH, hidrogen sulfurat este eliberat. Cultura este sensibilă la anumite antibiotice și este lizată de bacteriofagul tifoid. Reacția de aglutinare desfășurată este pozitivă la serul de febră tifoidă.
Preparate pentru terapia specifică și prevenirea tifoidului și paratifoidului A și B
Indicații pentru utilizare
Bacteriofage - filtrat de fagolizați ai salmonelui de tifoid
Pentru tratamentul și prevenirea situațiilor de urgență
Imunitatea nu creează, mecanismul de acțiune este o liză bacteriană specifică a virușilor
Denumiți agenții cauzali ai febrei tifoide și a paratifoidului.
Care este diferența dintre salmonella de tifoid și salmonella din paratifoidul A și B în termeni de proprietăți biochimice?
Care este structura antigenică a agentului cauzal al febrei tifoide?
Caracteristicile patogenezei febrei tifoide (stadiul bolii).
Ce material este luat de la pacient pentru diagnosticarea precoce a tifoidului și cum este examinat acest material?
Care este componenta mediului Rapoport?
Ce material este luat pentru examinarea bacteriologică la un pacient cu suspiciune de febră tifoidă timp de 3-4 săptămâni de boală?
Lecția 3
SUBIECT: DIAGNOSTICILE MICROBIOLOGICE ALE TIPULUI SANATULUI (CONTINUARE). DIAGNOSTICA SINTOLOGICĂ A TIPULUI SANATULUI. Pentru studiul serologic al convalescenților și pentru detectarea purtătoarelor bacteriene, se utilizează un test pasiv de hemaglutinare pentru a determina anticorpii Vi în ser. Valoarea diagnosticului este titrul pasiv de hemaglutinare de 1:40 și mai mare.
Activitatea independentă a studenților
Să elaboreze o schemă pentru reacția lui Vidal.
Pentru a pune în reacție aglutinarea Vidal pentru diagnosticul de febră tifoidă și paratifoidă.
Înregistrați răspunsul lui Vidal la materialul demonstrativ și dați-i un aviz.
Pentru a pune RPGA (RNGA) - reacția hemaglutinării pasive (indirecte) cu diagnosticul de eritrocite.
Faceți un cont al RPGA, dați o concluzie.
Direcții de lucru independente
Pentru a arma reacția Widal lua sânge de la un deget sau un singur ac din vena ulnar într-o cantitate de cel puțin 1-1,5 ml la începutul celei de a doua săptămână a bolii. Sângele este colectat într-un tub steril, care este plasat într-un termostat timp de 30-60 de minute. Cheagul este separat de pereții tubului printr-o pipetă Pasteur, iar tubul este plasat în frigider. După uscare, zerul este aspirat și utilizat pentru a stabili reacția.
Serul de testat este diluat cu o soluție salină sterilă de la 1:50 la 1: 800. În reacție se utilizează 2 controale: în primul control, controlul antigen (CA) conține salină fiziologică (1 ml) și diagnostic (2 picături); al doilea control - controlul seric (CS) conține 1 ml din serul de testat într-o diluție de 1:50. Controlul ar trebui să fie absolut transparent.
Tabelul 5
Schema de reacție a lui Vidal
După adăugarea diagnosticului, tuburile sunt agitate și plasate într-un termostat timp de o zi la 37 ° C.
Reacția este estimată cu ajutorul lui +. ++++ - puternic pozitiv, +++ - pozitiv, ++ - îndoielnic, - negativ.
Înălțimea titrului de aglutinină nu poate fi o dovadă a prezenței bolii. Rezultatele fiabile ale reacției de aglutinare sunt obținute prin teste repetate ale serului de sânge la intervale de 5-7 zile. O creștere distinctă a titrului de aglutinine indică prezența infecției.
Pentru detectarea purtătorilor bacterieni ai pacienților convalescenți se utilizează un test pasiv de hemaglutinare, prin care se determină anticorpii Vi din ser. Ca antigen, se utilizează diagnosticul de eritrocite Vi, care este o suspensie de grup de eritrocite umane I (0) tratată cu formalină și sensibilizată cu antigenul Vi al bacteriilor tifoide.
Din deget ia 1 ml de sânge. Înainte de reacție, serul de testat este încălzit la 56 ° C timp de 30 minute pentru a descompune aglutininele de grup.
Schema de reacție hemaglutinantă pasivă
Într-un termostat la 37 ° C timp de 2 ore.
Notă. titru de hemaglutinine în ser 1:80.
Reacția este plasată în tuburi de aglutinare sau în plăci de polistiren cu godeuri. Serul este crescut de la 1:10 la 1: 160 - 1: 320. Diagnosticul de eritrocite trebuie agitat bine și se adaugă în fiecare godeu 0,5 ml. Tuburile și lunele sunt plasate într-un termostat timp de o oră și jumătate până la două ore la o temperatură de 37 °. Reacția este luată în considerare nu mai devreme de timpul de precipitare a eritrocitelor în tuburile de control (după 2 ore) și din nou după 24 de ore la temperatura camerei.
Reacția cu serul Vi mono-receptor adsorbit. Reacția trebuie să fie pozitivă până la titrul maxim de ser indicat pe eticheta flaconului.
Reacția cu serul O și cu soluție salină. Rezultatele trebuie să fie negative.
O reacție pozitivă de hemaglutinare este caracterizată prin precipitarea eritrocitelor la fundul unei coloane lunare sau într-un tub de testare sub formă de umbrelă cu capete zimțate. Cu o reacție negativă, ca și în cazul controalelor, eritrocitele se depun compact și sedimentul are forma unui disc cu marginile netede și o suprafață netedă ("butoane") (tabelul 6). Valoarea diagnosticului este titrul pasiv de hemaglutinare de la 1:40 și mai mult.
Întrebări pentru autocontrol
În ce săptămână de boală este febra tifoasă pusă pe reacția lui Vidal?
De ce este diagnosticul serologic de febră tifoidă folosind antigene O și H?
Ce este Vidal, anamnestic, infecțios, vaccinat?
Specificați metode de diagnosticare a bacteriocarrierului tifoid.
Denumiți medicamentele utilizate pentru prevenirea febrei tifoide.
Programul de pregătire pentru examinări în domeniul microbiologiei și virologiei medicale.
L. Pasteur a fost fondatorul microbiologiei ca știință. Influența lucrărilor lui Pasteur asupra dezvoltării microbiologiei medicale
Instrucțiuni metodice la studiile de laborator privind microbiologia generală.
Clasele de laborator privind microbiologia, virologia și imunologia încep cu familiarizarea studenților cu organizarea microbiologică.
Toxoplasmoza congenitală și prevenirea acesteia (pentru a ajuta lectorul)
Profesor asociat al Departamentului de Microbiologie, Imunologie și Virologie, Dgma Saidov MS, Profesor asociat, Departamentul de Omsk și Obdgpub Rabadanova, Asistentul PM.
Federația Rusă
Șevcenko doctor al științelor veterinare AA, profesor, șef al departamentului de microbiologie, epizootologie și virologie a statului Kuban.
Caracteristicile cursului și terapia eczemelor microbiene la locuitorii regiunii Arkhangelsk
Lucrarea a fost efectuată la departamentele de boli ale pielii și venerice și în microbiologia virologiei și imunologiei
Trimiteți-le prietenilor: