Metode de însămânțare a materialului pe suporturi nutritive

Metoda bacteriologică de investigare este izolarea culturilor pure de microorganisme și studiul proprietăților lor, adică identificarea lor.

Materialul pentru însămânțare poate fi culturile bacteriene care sunt traversate cu medii nutritive lichide și dense, diferite excreții ale corpului animal și uman, țesuturilor, cadavrelor, apei, solului și alimentelor. Livrat la un material de laborator microbiologic, supus examenului bacteriologic în aceeași zi.







Materialul lichid pentru inoculare este luat cu buclă sau pipetă. Pipetele se utilizează atunci când materialul este semănat într-un volum mare sau precis măsurat. Modul de a lua un material dens este determinat de coerența sa. Cel mai adesea folosiți o bucla bacteriană. Uneori, materialul poate fi plasat neuniform în lichid, formând o peliculă sau un sediment. În acest caz, trebuie să luați o particulă de film sau granule de precipitat. Dacă este necesar, materialul obținut din cultura bulionului este emulsionat. În funcție de natura inoculului, scopul studiului, mediul folosit, există diferite metode de însămânțare.

Principala cerință este protejarea culturii de microorganisme străine.

Se însămânțează dintr-un tub de testare într-un tub de testare cu un mediu lichid:

Aplicarea în practica microbiologică:

1. Determinarea tipului de respirație a microorganismelor.

2. Acumularea masei microbiene

Tuburile cu materialul de semințe și mediul deținute oblic în mâna stângă între degetul mare și arătător, astfel încât marginile tuburilor sunt la nivelul normal, în timp ce bazele lor sunt pe partea de sus a periei. Tubul de testare cu materialul de semințe este păstrat mai aproape de el însuși, în mâna dreaptă, ca un stilou, țineți o buclă bacteriană și sterilizați-o. Degetul mic și marginea palmei mâinii drepte îndepărtează simultan ambele prize cu mișcări cu șuruburi. Marginile tuburilor arde în flacăra arzătorului. Buclele de incandescență sunt răcite și, după colectarea unui mic material, sunt transferate ușor într-un tub de testare cu mediu. Bucla este imersată într-un lichid, materialul este triturat de-a lungul peretelui tubului și spălat cu mediu. După însămânțare, bucla este îndepărtată din tubul de testare, marginile tuburilor sunt arse și, după trecerea conectorilor prin flacăra arzătorului, se închid tuburile de testare, după care bucla

Semănarea dintr-un tub de testare într-o eprubetă cu agar tăiat:

Aplicarea în practica microbiologică: acumularea de masă microbiană.

Tuburile cu materialul de semințe și mediul deținute oblic în mâna stângă între degetul mare și arătător, astfel încât marginile tuburilor sunt la nivelul normal, în timp ce bazele lor sunt pe partea de sus a periei. Tubul de testare cu materialul de semințe este păstrat mai aproape de el însuși, în mâna dreaptă, ca un stilou, țineți o buclă bacteriană și sterilizați-o. Degetul mic și marginea palmei mâinii drepte îndepărtează simultan ambele prize cu mișcări cu șuruburi. Marginile tuburilor arde în flacăra arzătorului. Buclele de incandescență sunt răcite și, după colectarea unui mic material, sunt transferate ușor într-un tub de testare cu mediu. Materialul este măcinat pe suprafața mediului în mișcări zig-zag de jos în sus, pornind de la limita condensului. După inoculare bucla este îndepărtat din tub, marginile tuburilor arse și, după tubul prin flacăra arzătorului sigilat tub, după care bucla calcinată.

Semănarea conform lui Shukevich:

Aplicarea în practica microbiologică: izolarea culturii pure și determinarea mobilității în proteaze.

Tuburile de test cu inocul și mediul sunt inclinate în mâna stângă între degetul mare și arătător, astfel încât marginile tuburilor sunt la nivelul obișnuit, iar bazele lor sunt deasupra periei. Tubul de testare cu materialul de semințe este păstrat mai aproape de el însuși, în mâna dreaptă, ca un stilou, țineți o buclă bacteriană și sterilizați-o. Degetul mic și marginea palmei mâinii drepte îndepărtează simultan ambele prize cu mișcări cu șuruburi. Marginile tuburilor arde în flacăra arzătorului. Buclele de incandescență sunt răcite și, după colectarea unui mic material, sunt transferate ușor într-un tub de testare cu mediu. Materialul este plasat într-un condens, care se formează între oglinda mediului și peretele tubului. După inoculare bucla este îndepărtat din tub, marginile tuburilor arse și, după tubul prin flacăra arzătorului sigilat tub, după care bucla calcinată.

Se însămânțează dintr-un tub de testare într-o eprubetă cu "coloană":







Aplicarea în practica microbiologică:

  1. Determinarea mobilității microorganismelor.
  2. Determinarea activității proteolitice pe mediul gelatinos.
  3. Determinarea activității saccharolitic pe mediul semisolid al lui.

Tuburile cu materialul de semințe și mediul deținute oblic în mâna stângă între degetul mare și arătător, astfel încât marginile tuburilor sunt la nivelul normal, în timp ce bazele lor sunt pe partea de sus a periei. Tubul de testare cu materialul de semințe este păstrat mai aproape de el însuși, în mâna dreaptă, ca un stilou, țineți o buclă bacteriană și sterilizați-o. Degetul mic și marginea palmei mâinii drepte îndepărtează simultan ambele prize cu mișcări cu șuruburi. Marginile tuburilor arde în flacăra arzătorului. Buclele de incandescență sunt răcite și, după colectarea unui mic material, sunt transferate ușor într-un tub de testare cu mediu. Buclă cu material de semințe străpunge coloana spre partea de jos, producând așa-numitul "prick" de însămânțare. După inoculare, bucla este îndepărtată din eprubeta sub controlul ochiului. Marginile tuburilor sunt trase și, după trecerea conectorilor prin flacăra arzătorului, se închid tuburile de testare, după care bucla este calcinată.

Semănarea dintr-un tub de testare într-o eprubetă cu un mediu de combinare:

Aplicarea în practica microbiologică:

  1. Determinarea activității saccharolitic.
  2. Determinarea activității proteolitice.
  3. Acumularea de masă microbiană.

Tuburile de test cu inocul și mediul sunt inclinate în mâna stângă între degetul mare și arătător, astfel încât marginile tuburilor sunt la nivelul obișnuit, iar bazele lor sunt deasupra periei. Tubul de testare cu materialul de semințe este păstrat mai aproape de el însuși, în mâna dreaptă, ca un stilou, țineți o buclă bacteriană și sterilizați-o. Degetul mic și marginea palmei mâinii drepte îndepărtează simultan ambele prize cu mișcări cu șuruburi. Marginile tuburilor arde în flacăra arzătorului. Buclele de incandescență sunt răcite și, după colectarea unui mic material, sunt transferate ușor într-un tub de testare cu mediu. Materialul este măcinat pe suprafața mediului în mișcări zig-zag de jos în sus, pornind de la limita condensului. Apoi, o buclă cu material de semințe străpunge coloana spre partea de jos, producând așa-numita însămânțare, un "prick". După inoculare, bucla este îndepărtată din eprubeta sub controlul ochiului. Marginile tuburilor sunt trase și, după trecerea conectorilor prin flacăra arzătorului, se închid tuburile de testare, după care bucla este calcinată.

Semănarea în flacoane cu pipetă:

Aplicarea în practica microbiologică: studiul sanitar-bacteriologic al apei.

În timpul însămânțării, precum și în eprubete, numai materialul se toarnă mai întâi în pipetă, iar recipientul se deschide cu mediul și se adaugă materialul.

Semănarea pe mediu în tuburi de testare (mediu lichid, mediu semi-lichid, agar înclinat, mediu de combinare) dintr-un vas Petri:

Aplicarea în practica microbiologică:

  1. Acumularea de masă microbiană pe agar înclinat.
  2. Determinarea activității saccharolitic
  3. Determinarea activității proteolitice pe un mediu gelatinos semi-lichid.
  4. Determinarea tipului de respirație a microorganismelor pe un mediu lichid.
  5. Determinarea mobilității.

Coloniile cultivate pe antena Petri sunt studiate, alegând cele care trebuie investigate mai departe și care se încrețund în jurul paharului din fund. Apoi, o pahar de material este plasat în fața unui capac în sus. Deschideți capacul și introduceți o buclă arsă sub el. După răcirea buclei, se colectează semințele. Scoateți bucla, închideți cupa și luați un tub de testare cu mediul din mâna stângă. Semănarea se efectuează de asemenea dintr-un tub de testare într-un tub de testare. După inoculare, paharul este întors cu capul în jos.

Semănarea pe un vas Petri cu o spatulă:

Aplicarea în practica microbiologică: izolarea culturii pure.

Cu mâna stângă, deschideți ușor capacul, ținându-l cu degetul mare și degetul arătător. O buclă sau o pipetă se aplică pe suprafața mediului cu un material și apoi se freacă atent cu mișcări circulare ale spatulei până când spatulul nu mai slăbește liber pe suprafața mediului. Cu mâna stângă, țineți capacul și rotiți simultan paharul.

Atenție vă rog! Spatulul de lucru este steril și se rotește imediat înainte de însămânțare.

După însămânțare, scoateți-l din cupă și închideți capacul. Spatulul de sticlă este așezat într-un decantor, iar metalul este calcinat peste flacăra lămpii cu alcool.

Semănând pe un vas Petri cu o buclă:

Aplicarea în practica microbiologică: izolarea culturii pure.

O cantitate mică de semințe este frecată în suprafața mediului la marginea canei, de câteva ori în bucla de la o parte la alta (descărcare). În locul în care se termină atingerea de finisare, agarul este străpuns cu o buclă, înlăturând excesul materialului de semințe (deversarea materialului). Inoculul rămas este în mișcări zig-zag distribuite pe întreaga suprafață a mediului, în mișcări întrerupte de la perete la perete. După însămânțare, închideți cupa și ardeți bucla.

Semănând un vas Petri cu o buclă pe sectoare:

Aplicarea în practica microbiologică: izolarea culturii pure.

O ceașcă din partea inferioară este trasă în sectoare, o cantitate mică de semințe este frecată în suprafața mediului la marginea canei, de câteva ori în bucla de la o parte la alta. După locul în care se termină atingerea de finisare, agarul este străpuns cu o bucla, eliminând excesul de material de semințe (deversarea materialului). Semințele rămase pe buclă sunt zig-zagate de la marginea paharului la centru, astfel încât cursele să nu intre în sectorul adiacent. La sfârșitul însămânțării, închideți cupa și ardeți bucla.

Aplicarea în practica microbiologică:

  1. Formularea unei antibioticograme.
  2. Făcând o tastare cu fagi.

1 ml de lichid de cultură (dacă există un mediu de cultură cu o densă, ea a fost emulsionată în soluție izotonică sterilă de clorură de sodiu sau bulion), se aplică pe suprafața agarului și suprafața complet lichidă a mediului este distribuit, ușor rotirea paharului. Apoi, paharul este ușor înclinat, iar cultura în exces este aspirată cu o pipetă, turnându-o în soluția de dezinfectare. O pipetă este așezată acolo, după deconectarea părului de pe ea.

Navele cu o cultură semănat sunt înscrise și plasate într-un termostat.







Articole similare

Trimiteți-le prietenilor: