Metodele moderne de măcinare a țesuturilor sunt de obicei combinate cu extracția simultană a proteinelor din omogenatele de țesut. Cele mai multe dintre proteinele tisulare sunt foarte solubile în soluțiile de sare de 8-10%. În extracția proteinelor larg aplica diverse tamponarea amestecului cu anumite valori ale pH-ului, solvenți organici și detergenți neionici - substanțe care distrug interacțiunea dintre proteinele hidrofobe și lipidelor și între moleculele proteice.
Dintre compușii organici, în plus față de soluțiile apoase utilizate îndelungat de glicerină, soluțiile slabe de zaharoză sunt utilizate pe scară largă (în special pentru solubilizare). Solubilitatea în extracția proteinelor este mult influențată de pH, astfel încât în chimia proteinelor sunt utilizate fosfat, citrat, amestec tampon borat la un pH de acid la slab alcalin, care promovează dizolvarea ambelor și proteine de stabilizare. Sisteme deosebit de răspândite tampon Tris, care sunt un amestec de 0,2M soluție de tris (hidroximetil) aminometan (HOCH2) 3 CNH2 (prescurtat „Tris“), cu o soluție 0,1 M de acid clorhidric în diferite rapoarte. Pentru izolarea proteinelor serice prin metode de precipitare cu etanol (a se vedea. Metoda Cohn), acetonă, butanol, și combinații ale acestora. Aproape toți solvenții organici descompun legăturile protein-lipide, promovând cea mai bună extracție a proteinelor.
Pentru proteinele din materialul biologic într-un curat, omogen, capabil de a utiliza diferiți detergenți Assisted complecși proteină-lipidă Scindare si obligatiuni proteine-proteine de rupere. În special, pentru eliberarea proteinelor (enzime), ferm asociată cu biomembranele mitocondrie sau alte structuri subcelulare sunt utilizate Triton X-100, dodecil sulfat de sodiu și deoxicolat de sodiu.
Fig. 1.1. Echipamente de laborator.
a - omogenizator de mână cu piston: 1 - pistil, 2 - corp, 3 - motor, 4 - trepied; omogenizatorul mecanic (b) și moara cu bile (c): 1 - carcasă cu motor electric și dispozitiv de pornire, 2 - cameră pentru măcinarea materialului.
Trebuie totuși să se țină seama de faptul că detergenții, care cauzează ruperea legăturilor proteine-proteice, distrug structura oligomerică (cuaternară) a proteinelor.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: