Următoarele metode sunt utilizate pentru conservarea virușilor:
1) atunci când este depozitat materialul strâns viral (fragmente de organe sau țesuturi) folosesc adesea glicerol (50% soluție în soluție salină), care are un efect bacteriostatic și în același timp, protejează virusurile. În acest caz, virusul poate fi păstrat la 4 ° C timp de câteva luni;
2) cele mai multe ori virușii sunt depozitați în frigidere, furnizând o temperatură minus 20, minus 30, minus 70 ° C. La această temperatură, unii viruși își pierd relativitatea infecțioasă relativ rapid fără adăugarea de substanțe protectoare. Se știe că mai puțină proteină dintr-o suspensie care conține virus, cu cât este mai puțin stabilă virușii, astfel încât virusii purificați își pierd rapid activitatea biologică. efect protector bun în timpul congelare și depozitare a virusurilor aditive are una dintre următoarele componente: ser inactivat, lapte degresat (10 până la 30%), gelatină (0,5-1,5%), DMSO (10%), etc.. înghețarea rapidă a virusului la minus 196 ° C (azot lichid), urmată de păstrarea la această temperatură, titrul virusului nu scade timp de mai multe luni. Virușii sensibili la pH scăzut, să fie înghețate în fluidele care nu conțin fosfat diacid (NaH2 PO4 și KH2 PO4), care sunt acide si au un punct de congelare mai mic decât fosfați desubstituiti (Na9 HPO4 sau K2 HPO4) cu reacție alcalină.
Rata de decongelare a virusului nu afectează în mod semnificativ activitatea sa. Vioanele de dezghețare pot fi atât la temperatura camerei, cât și într-o baie de apă la o temperatură de 37 ° C. Pentru a evita înghețarea frecventă și decongelare a materialului care conține virusul este necesar pentru a stoca în porțiuni mici, o suficientă unică sau titrare folosind, de exemplu, pentru reacția de neutralizare;
3) liofilizarea, adică uscarea într-o stare înghețată în condiții de vid, este o modalitate foarte bună de conservare a virușilor. Pentru liofilizare este necesar un echipament adecvat, un material de umplutură, în funcție de tipul de virus și o execuție atentă a procedurii de uscare. Pe liofilizate influențează rezistența virusului nu numai selecția unui material de umplutură corespunzător, dar compoziția gazului în flacon (oxigen 0,5% provoca deja distrugerea rapidă a virusului, în timp ce umiditatea în limitele de 2-3% nu a afectat semnificativ) și Liofilizat Temperatura de depozitare - nr mai mare de 4 ° C. Este mai bine să efectuați liofilizarea în instituții bine familiarizate cu această tehnică. În formă liofilizată, virușii pot fi depozitați de mai mulți ani.
Laboratorul de Virologie trebuie să aibă următoarea documentație:
- Jurnalul de cercetare virologică (examen, agricultură, formular nr. 13-veter);
- registrul animalelor infectate;
- Jurnalul de contabilitate pentru virusurile izolate și distrugerea lor;
- Jurnalul de înregistrare a mișcărilor de producție sau tulpini muzeale și alte cărți de contabilitate în conformitate cu instrucțiunile aprobate.
1. Să se familiarizeze cu laboratorul de virologie și echipamentul său de bază.
2. Studiați regulile de lucru cu materiale care conțin virusuri.
Activitatea independentă a studenților:
a) pregatirea unei cutii pentru munca;
b) formarea competențelor de pipetare și instrumente sterile;
c) studierea documentației de laborator.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: