Reguli de bază ale comportamentului în laboratorul bacteriologic
1. Sala de laborator nu poate fi introdusă fără îmbrăcăminte specială: un halat de baie, papuci, pantofi de schimbare.
2. Nu ar trebui să aduceți lucruri ciudate în laborator, nu ar trebui să fumați și să aduceți mâncare.
3. Atunci când se despachetează materialul infecțios, trebuie avut grijă: tuburile de testare din exterior sunt șterse cu o soluție dezinfectantă; transfuzia de lichide care conțin microbi patogeni se efectuează pe un vas care conține o soluție de dezinfectant.
4. Dacă vasele conținând materialul infecțios (tubul de testare, vasul Petri) sunt rupte, se efectuează imediat dezinfectarea obiectelor, îmbrăcămintei, a mesei și a camerei.
5. După terminarea muncii dezinfectați mâinile și o suprafață a unui birou.
6. Culturile de microbi ale muzeelor sunt depozitate în frigider, închise și sigilate.
7. Lucrătorii din laboratoare sunt supuși vaccinării obligatorii împotriva acestor boli infecțioase, cu agenții cauzali ai cărora lucrează. Departamentul de Microbiologie utilizează materiale care conțin agenți patogeni # 921; # 921; - # 921; V, după aprobarea președintelui comisiei de regim a SES republican.
Reguli pentru eșantionarea materialului pentru cercetarea microbiologică
La scoaterea și lucrul cu materiale clinice, personalul ar trebui să folosească mănuși și haine. Timpii de livrare a materialului clinic la laborator ar trebui reduse la minimum.
Sângele pentru însămânțare trebuie luat înainte de începerea tratamentului cu antibiotice; la înălțimea creșterii temperaturii; la patul pacientului cu respectarea regulilor de asepsie. Semănarea se efectuează într-un mediu dublu și tioglicolic într-un raport de 1:10.
Urina pentru însămânțare este administrată înainte de începerea tratamentului cu antibiotice. Urina unei persoane sănătoase este sterilă. De la începutul luării unei mostre de urină înainte de începerea studiului în laborator nu ar trebui să dureze mai mult de 1-2 ore.
Pus se obține cu o seringă sterilă sau cu un tampon steril de bumbac.
Scaunele pentru enterobacterii patogeni sunt luate cu bucle rectale umectate cu un conservant și plasate într-un tub de testare cu un mediu de conservare.
Mucusul din nazofaringe (pe difteric) este administrat cu un tampon steril pe stomacul gol. Tamponul este plasat într-un tub steril și livrat la laborator în cel mult 2-3 ore de la luarea materialului.
Lichidul spinal-cerebral este obținut ca urmare a puncției lombare. 3-5 ml de CSF sunt plasate într-un tub de testare (în timpul transportului, protejați de răcire).
Sputa este colectată pe stomacul gol după clătirea gurii în feluri de mâncare sterilă.
Reguli privind colectarea, stocarea și transportul materialelor la OII.
Infecțiile deosebit de periculoase sunt în primul rând ciuma. La stabilirea unui diagnostic preliminar de "ciumă" în laborator, se organizează evenimente urgente:
1. Imediat notificat unei autorități sanitare de nivel superior.
2. Carantina este plasată în laborator, adică nici un lucrător de laborator care nu intră în contact cu materialul contagios ar trebui să părăsească sediul laboratorului până la sosirea epidemiologului.
3. Toate materialele: de la pacienți, culturi pure și animale moarte trebuie trimise la laboratoare specializate pentru diagnosticul final.
Siguranța în timpul transportului
Materialul este plasat în cutii cu dop închis etanș, legat cu pergament (material impermeabil), apoi învelit cu țesut umezit cu o soluție de 5% de lizol sau fenol. În această formă, borcane de material sunt plasate în biciclete metalice. Pe borcanele cu etichetele de pastă materiale. Toate etichetele de pe etichetă sunt făcute cu un simplu creion de grafit. Cernelurile sunt spălate cu dezinfecție.
4. După trimiterea materialului se efectuează dezinfectarea finală.
Cultura este autoclavată la o temperatură de 120 ° C timp de 1 oră. Sticlele de laborator din sticlă sunt dezinfectate în soluție de acid cloramină 3% sau acid carbolic timp de o zi și apoi sunt fierte în soluție 1% de bicarbonat de sodiu.
Carcasele sunt autoclavate, turnate cu soluție de lizol 10% timp de 24 de ore și îngropate într-o gaură special săpată.
Pielea părților deschise ale corpului este tratată cu o soluție de alcool 70%.
Pentru a face o direcție privind cercetarea microbiologică
Referirea este un document de însoțire atașat la un material infecțios pentru teste de laborator.
Se face conform următorului formular:
1. numele materialului
2. instituția care conduce materialul
3. Prenume, nume, patronimic al pacientului
6. Data bolii
7. data preluării materialului
8. Diagnostic clinic propus
9. semnătura medicului care dirijează materialul
Intrat în laboratorul de material infecțios este înregistrat într-un jurnal special.
Dezinfectarea în laboratorul microbiologic
Dezinfectarea este dezinfectarea obiectelor de mediu cu ajutorul substanțelor chimice cu acțiune antimicrobiană.
Scopul dezinfecției este de a preveni transmiterea agenților patogeni de la organismul infectat la virusul neinfectat.
În cadrul laboratorului microbiologic:
1. înălbitor (0,1-10% soluție);
2. Cloramină (soluție 0,5-5%), pentru dezinfectarea mâinilor soluția de 0,25-0,5%, pentru dezinfectarea îngrijirii pacienților cu infecții intestinale și în aer, soluție 1-3%, cu tuberculoză-5% soluție;
3. fenol (acid carbolic) sub formă de soluție 3-5% pentru dezinfectarea spațiilor;
4. Lizol (soluție 3-5%);
5. Bigluconate clorhexidina (gibitan), pentru dezinfectarea mâinilor 0,5% soluție, pentru dezinfectarea încăperilor 0,1% soluție;
6. diclorura de mercur (sulum) - uneori utilizată pentru dezinfectarea articolelor de îngrijire. Medicamentul este foarte toxic, absorbit prin piele.
Prepararea vesela pentru sterilizare
În laboratoarele bacteriologice și virologice se folosesc ustensile uzuale de laborator: butelii, flacoane, sticle pentru dizolvarea și depozitarea reactivilor, tuburi chimice de testare. În plus, feluri de mâncare speciale:
- biologic - cu un fund mare, o margine nedezvoltată;
- centrifugă - îngustată în jos, formă conică;
- Precipitarea - foarte îngustă cu un diametru interior de 2-3 mm
Feluri de sticlă Petri pentru cultivarea microorganismelor pe suporturi nutritive dense. Ele sunt realizate din sticlă transparentă, fără pietre, bule. Înălțimea paharului este de 20-30 mm, cu diametrul de 60-200 mm.
- gradate trebuie să respecte parametrii GOST
- Pastera de sticlă cu un diametru de 5-7 mm, în care un capăt este tras peste flacăra arzătorului sub forma unui capilar.
Sticlărie de laborator specială trebuie să fie curată și sterilă. Spălarea se face cu manere cu săpun și sifon. Vasele noi trebuie fierbe înainte de spălarea într-o soluție de acid clorhidric 1-2%. Uscați vasele din cuptor.
Mâncărurile uscate sunt închise și așezate în cutii de creion. În tuburile de testare se introduc dopuri de vată și se înfășoară în cutii de 5-10 bucăți. Plăcile Petri sunt preluate și ambalate în una sau mai multe bucăți.
Pipetele sunt închise cu vată de bumbac de la capătul pe care îl iau în mâini. Pipetele finite sunt înfășurate în hârtie și stivuite în cutii de creion.
Sterilizarea se efectuează în maternitate la o temperatură de 180 ° C timp de 1 oră.
Etapele pregătirii frotiurilor.
Pentru a pregăti un frotiu, este necesar să aveți:
· Curățați glisiera degresată.
· O cultură cultivată pe un mediu nutritiv dens dens, agar sau lichid-bulion.
1. În flacara arzătorului ardeți diafragma degresată și bucla bacteriologică. Tubul de testare cu cultura studiată este ținută între degetul arătător și degetul mare al mâinii stângi. Sosul este luat cu mâna dreaptă, degetul mic al mâinii drepte este apăsat de dopul tubului de test pe palma mâinii tale.
Dacă se prepară un frotiu dintr-un mediu nutritiv lichid, o picătură de cultură se înclină pe o glisantă.
Dacă se face o frotiu din cultură din agar, se introduce o bucle de cultură pe culisa și se adaugă o picătură de soluție fiziologică în care materialul introdus este emulsionat.
Furtuna este arsă în flacăra arzătorului. Frotiul trebuie să fie subțire, uniform, în formă rotundă, măsurând 1,5-2 cm2.
2. Frotiul este uscat la temperatura camerei.
3. Fixarea frotiului este efectuată pentru:
Omoară celulele microbiene.
· Asigurați o mai bună aderență a microbilor la diapozitiv.
· Asigurați o colorare suplimentară.
Fixarea frotiului din flacăra arzătorului este de 3 ori, acțiunea flacarii trebuie să dureze 2 secunde.
Pentru o fixare mai blândă a frotiurilor de sânge, a spirochetelor și a protozoarelor, se folosesc fixative chimice:
· Alcool metilic timp de 5 minute.
· Alcool etilic (96 ° C) timp de 10 minute.
· Amestec de Nikiforov - în 10-15 minute.
· Acetonă - timp de 5 minute.
· Vapori de formalină - în câteva secunde.
4. Colorarea preparatelor se efectuează:
· Metode simple (apa fuchsinom Pfeffera, albastru de metilen Leffler), atunci când întreaga celulă este colorată și este utilizată doar o singură colorant;
· Metode complexe, atunci când structurile celulare sunt definite.
După expunere, frotiul este spălat cu apă, uscat cu hârtie de filtru și microscopat sub imersie.
Metoda de "picătură zdrobită".
Cultura în soluție izotonică de clorură de sodiu, se aplică pe o lamelă de sticlă și o lamelă de acoperire aplicat pe partea de sus. Picătura de material trebuie să fie atât de mare încât să umple întregul spațiu între acoperiș și diapozitiv și să nu iasă dincolo de copertă. Medicamentul este tratat cu un sistem de imersie și un condensator puțin coborât.
Este necesar să aveți un diapozitiv cu un nebun. O picătură de cultură este aplicată pe geamul de acoperire, o placă de sticlă este așezată în partea superioară cu o lunetă în mijloc, ale cărei muchii sunt în prealabil acoperite cu jeleu de petrol. Apoi, diapozitivul este ușor apăsat pe capacul de acoperire, iar preparatul este întors cu capul în jos cu o alunecare a capacului. Se pare o cameră închisă ermetic, în care picătura nu se usucă mult timp.
Prepararea bulionului de peptonă din carne (MPB)
Prima etapă este producția de apă din carne. Carnea, fără grăsime și din tendoane, este trecută printr-o mașină de măcinat cu carne, turnată cu o cantitate dublă de apă rece de la robinet și insistată timp de 24 ore într-un loc răcoros. Apoi, infuzia de carne cu carnea se fierbe timp de o oră, după care se răcește, se filtrează, se umple cu apă de la robinet până la volumul original, se îmbutelieză și se sterilizează la o presiune de 1 atm. 30 de minute.
Apa din carne conține minerale, carbohidrați, vitamine.
A doua etapă, 1% peptonă uscată și 0,5% clorură de sodiu sunt adăugate în apa din carne, fierte și pH-ul este ajustat la 20% cu soluție de hidroxid de sodiu.
Prepararea agarului de peptonă din carne (MPA)
La bulionul de pește-carne se adaugă 2% agar-agar de alge, care se topește la 100 ° C și se solidifică la temperatura camerei. După sterilizare într-o autoclavă, agar de peptonă din carne, turnat în eprubete, este lăsat să stea într-o coloană sau într-un agar înclinat, așezând tuburile într-o poziție înclinată la un unghi de 20 °.
Colorarea frotiului pe Gram.
Metoda lui Gram a fost introdusă în 1884 de microbiologul danez Hans Christian Gram și este o caracteristică taxonomică importantă.
Gram-pozitive bacterii sunt cele în care complexul format de gentianviolet și iod este reținut prin tratament cu alcool.
Gram negative sunt acele bacterii care nu au proprietatea de reținere a complexului și decolorare atunci când sunt tratate cu alcool.
Capacitatea sau incapacitatea celulelor de a retine complexul gentian-veneric cu iod este asociata cu compozitia si structura diferita a peretelui celular bacterian.
1. Pe un frotiu fix, aplicați o hârtie de filtru impregnată cu gentianviolet și aplicați o picătură de apă timp de 2 minute.
Gentianviolet vopseaua principală.
2. Hârtia este aruncată și, fără spălare cu apă, se toarnă soluția de Lugol timp de 1 minut.
Soluția de mordant a lui Lugol: întărește acțiunea vopselei de bază în bacteriile Gram-pozitive.
3. Preparatul este decolorat cu 3-5 picături de alcool timp de 30 de secunde până la dispariția fluxurilor de vopsea de vopsea.
Alcoolul este un factor de albire.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: