Biotehnologie, hibridizare somatică, metode de creare a himei

Hibridizarea celulelor animale

Metode pentru crearea de himere

1. Agregațional - a fost propus aproape simultan și independent unul de altul de către Tarkovski la Varșovia și monetăriile din Philadelphia (1961-1962 gg.).







Din uterul medicilor de sex feminin însărcinate, embrionii care au ajuns în stadiul de 8 blastomeri sunt îndepărtați. Blastomeres sunt obținute de la două animale cu genotipuri diferite (de exemplu, șoareci, alb strat de culoare neagră) sunt plasate într-un mediu propice pentru agregarea lor și formarea de embrioni de 16 de celule. Astfel de embrioni compozit se dezvolta in vitro la stadiul de blastocist, înainte de a fi introdus în uterul unei mame adoptivă, care cauzează false pre-sarcinii prin administrarea hormonilor respectivi. Ca rezultat, se obțin șoareci alofani. Atunci când mouse-ul apare păr, culoarea nu este alb sau negru, la fel ca la părinți, dar amestecat, cu pete sau dungi alternante pe alb și negru. Acest lucru demonstrează că țesuturile animalelor himere sunt mozaice, adică constau din celule "albe" și "negre".

Țesuturile interne ale acestor animale, desigur, sunt, de asemenea, mozaic, deși acest lucru nu este la fel de evident ca în cazul vopsirii lânii. Diferențele pot implica proteine ​​care își realizează funcția enzimatică: ele pot cataliza aceeași reacție la șoarecii părinții au nevoie de aceleași cofactori, dar să nu fie identice, deși similare. Astfel de proteine ​​se numesc izoenzime și pot fi separate prin electroforeză. Agregatele chimice pot fi obținute nu numai între două embrioni, ci și între numere diferite de blastomere izolate sau părți individuale ale embrionilor. Masa embrionilor himerici nu este mai mult decât de obicei și este supusă efectelor mecanismelor de reglare embrionară. Avantajul metodei este că nu necesită intervenția tehnicilor microchirurgicale, prin urmare este utilizat pe scară largă în embriogenetică.







2. Injecție - a fost elaborat de R. Gardner în 1968.

Embrionii sunt utilizați în stadiul de blastocist. Blastocist și fixe, folosind micromanipulators, se administrează prin injecție masei celulare intracelulara a embrionului donor blastocist în blastocoel - al destinatarului. Această metodă poate injecta nu numai masa intracelulară a embrionilor timpurii, ci și celulele mai diferențiate.

Metoda de injectare a fost utilizată la producerea de himere interspecifice. Primele himere interspecifice au fost obținute între cele două specii cele mai apropiate de șoareci care nu traversează în mod normal: M. muskulus și M. caroli. Mai mult, sa observat că embrionii himeric obținuți prin injectare, in mod normal dezvoltat numai când le transplanteze în uterul tip a cărui blastocite au fost utilizate ca primitorului. De exemplu, blastocistul M. muskulus a fost injectat cu masa intracelulară a embrionului M. caroli. Hemiamele rezultate au fost implantate în uterul lui M. muskulus și s-au dezvoltat cu succes acolo și în corpul M. caroli a murit după două săptămâni.

Embrionii himerici interșpecifici între șoareci și șobolani prin agregare au fost obținuți abia în anii '70. Primele animale himerice au fost obținute abia în 1973 de către R. Gardner și M. Johnson. Succesul acestor experimente ne-a permis să începem să creăm animale de fermă himerice în anii 1980. Sa dovedit că metoda de agregare este inacceptabilă pentru obținerea de chimeri ai bovinelor. Chicker vițeii Bos indicus + Bos taurus pot fi obținute numai prin metoda de injectare.

În 1984, acesta a fost obținut himere interspecifice între o oaie și o capră - ovtsekozy, și aproape simultan în Anglia și Germania. Ambele metode au fost utilizate. Sexual ovine și caprine nu traversează, deoarece acestea au un set diferit de cromozomi: 2n = 60 capră, oaie 2n = 54. În Germania în 1985 an au fost preparați un vițeii himeric după agregarea înjumătățește embrioni de 32 de celule de la vaci shvitckoj (brun) și Holstein Stânci friziane. În fenotipul de chimeras, ambele costume au fost combinate - maro și negru.

Animalele chimice nu transmit mozaicul genetic descendenților lor. Ei au o scindare, la fel ca la heterozygote, atât de valoroase combinații genetice sunt încălcate. Dar pentru o generație de semne economice valoroase sunt menținute, astfel încât să puteți, de exemplu, combina atât producția de lapte, cât și cea de carne.

Chimery este destul de comună în plante. De regulă, există într-o formă latentă, fără a se manifesta fenotipic. Cu toate acestea, mutațiile plastidiene permit o vizualizare directă a plantei. Cel mai adesea, se observă chimeri spontani în plante heterozygioase. Diferitele tipuri de celule sunt clar separate în spațiu, formând straturi separate atunci când se împart meristemurile apicale. Un exemplu de mutație vizibilă a cloroplastelor și formarea unei plante himerice este varietatea sau apariția sectoarelor de țesut de altă culoare.

Alte capitole ale secțiunii:







Articole similare

Trimiteți-le prietenilor: