Metode pentru crearea condițiilor anaerobe pentru microorganisme

Anaerobii sunt microorganisme, a căror viață nu necesită aer O2.

Metode de inoculare, cultivare și izolare a culturilor pure anaerobe:

  1. Materialul de însămânțare în lungimea mediilor de densitate-energie. Semănarea se realizează prin înțeparea rezervorului cu un ac sau o buclă (umectată cu materialul de testare) într-un tub cu o coloană de mediu dens (cu o coloană înaltă de zaharoză agar). Fie seamănă într-un mediu nutritiv topit, dens sau semi-lichid, urmat de amestecare. În acest caz, creșterea ar trebui să aibă loc în straturile inferioare ale agarului (există mai puțin O2).
  2. METODA DE KOKHA (METODA DE SEMINȚE DE SEPERE). Suprafața inoculului într-un vas Petri este umplută cu un amestec steril de parafină și vaselină (1: 1). Închideți dopul de cauciuc. Pentru a extrage coloniile crescute (anaerobe), eprubetele sunt ușor încălzite. Agarul, adiacent pereților, se topește, iar coloana intră ușor într-un vas Petri pregătit. În continuare, coloana cu agar este tăiată cu un scalpel steril, coloniile sunt îndepărtate cu o buclă sterilă și transferate într-un mediu lichid.
  3. UTILIZAREA SUBSTANȚELOR DE REDUCERE, OXIDIZARE ȘI ULEI. Aceste substanțe se adaugă la mediul nutritiv. Substanțele de reducere (obligatorii) sunt: ​​bucăți de țesuturi de origine animală (ficat, piele, inimă, măduvă osoasă), bucăți de țesuturi vegetale, bucăți de vată de bumbac, tioglicolat de sodiu, acid clorhidric cisteină. Substanțele oxidante (antioxidanții) sunt glucoză. Exemple de medii: Kitta-Tarotzi (acolo MPPB - broască de ficat cu carne și peptonă + bucăți de ficat fiert + un strat de ulei cu vaselină sau parafină, totul este steril).
  4. METODA VINALULUI. Această metodă utilizează tuburi de sticlă speciale (pipeta Pasteur). În tubule, agarul topit (amestecat cu materialul) este aspirat. Tubul este etanșat cu 2 capete. Cultured. În condiții sterile, tubul este deschis și colonia este îndepărtată printr-o buclă.
  5. METODA CU UTILIZAREA DISPOZITIVELOR SPECIALE SI A DISPOZITIVELOR (ANAEROSTATICE SI EXCATOR).
  6. METODE DE CULTIVAREA ANAEROBELOR ÎN ATMOSFERA GAZULUI INERT, DIOXIDULUI DE CARBON, AROGENULUI.






II. METODE CHIMICE. Aceste metode se bazează pe utilizarea diferitelor substanțe chimice, ca rezultat al interacțiunii substanțelor, apare o reacție chimică cu absorbția activă a aerului de O2.







  1. Folosind un EXC chimic simplu. În desicator se pune o bucată de vată de bumbac, înmuiată cu alcool 96%. Vata de vată este aprinsă. Desicatorul este închis. În procesul de ardere a alcoolului, O2 va arde.
  2. METODA DE ARISTOVSKY. În 2 capace din vasul Petri se toarnă o pudră de sifon carbonic pe care se toarnă hidrosulfura de Na. Se adaugă puțină apă acestor substanțe. Un capac este așezat pe fundul anaerostatului, desicator, apoi sunt plasate culturile, deasupra cărora este plasat al doilea capac cu substanța chimică.
  1. METODA DE FORTRAN. Odată cu cultivarea în comun a anaerobelor și aerobilor într-un vas Petri, se creează condiții anaerobe datorită faptului că aerobii cresc mai întâi și absorg O2 prezent în ceașcă. Paharul trebuie să fie umplut cu parafină.
  1. REDUCEREA PE OCHI. Luați 3 feluri de mâncare Petri cu agar de glucoză-sânge, puneți o picătură de material în ceașca de 1 a, apoi spargeți materialul cu o spatulă (buclă de rezervor) deasupra suprafeței. Apoi, fără a procesa bucla cu restul materialului, sămânța pe cea de-a doua ceașcă. Cultură este plasat într-un desicator și cultivat.






Articole similare

Pagina anterioară

Pagina următoare

Trimiteți-le prietenilor: