Pentru a obține secțiuni histologice, se folosesc instrumente speciale, numite microtomuri. Blocul de parafină obținut mai devreme este lipit pe un bloc special din lemn, parafina excesivă fiind tăiată și instalată într-un microtom. Microtomurile permit obținerea de secțiuni cu grosimi diferite; O grosime bună pentru o tăietură microscopică ușoară are o grosime de 3-4 μm.
Secțiunile rezultate sunt atașate la ochelarii cu un amestec de proteine și glicerină. Toate lucrările ulterioare sunt legate de pregătirea secțiunilor pentru colorare. Scopul colorării este identificarea mai precisă a componentelor celulelor și țesuturilor.
Obiectivele de ochelari trebuie să aibă o grosime de 1,0 - 1,2 mm. Grosimea sticlei de ordinul 1 mm aproximativ corespunde cu lungimea undei luminoase, ceea ce asigură interferența scăzută și difracția undelor, o abatere slabă a fasciculului de lumină. Acest lucru facilitează producerea preparatelor de înaltă calitate optică pe astfel de sticle. În plus, grosimea constantă a sticlei de-a lungul întregii lungimi a preparatului reduce la minimum necesitatea ajustării lungimii focale a microscopului, ceea ce este deosebit de important pentru microscopie pe un obiectiv de imersie. În plus, diapozitivele nu trebuie vopsite. Sticla colorată denaturează nuanțele colorării celulelor și a elementelor celulare din preparat, ceea ce nu este de dorit în special atunci când nuanțele subtile de culoare sunt cel mai important factor de identificare și diagnosticare.
Ochelarii de ochelari diferă de starea de nervură laterală sau de marginea solului. Ochelarii cu o muchie lustruită sunt utilizați pentru microscopia obiectelor, în care o strălucire pe o muchie laterală tăiată poate interfera cu identificarea obiectului. De asemenea, ochelarii se disting prin prezența sau absența unei ferestre maturate pe suprafața sticlei folosite pentru marcarea preparatului. Dimensiunea ferestrei este de 26 x 20 mm.
Secțiunile de parafină înainte de colorare sunt eliberate din parafină cu ajutorul oricărui solvent, de regulă este toluen. Deparafinare se efectuează după cum urmează: toluen (1 shift), toluen (două schimburi), 100 ° alcool (1 schimb), 100 ° alcool (a 2-shift), alcool 96 ° și 70 ° alcool, apă distilată.
Secțiunile deparafinate sunt pregătite pentru colorare. Când sunt colorate cu coloranți apoși, secțiunile sunt transferate în colorant din mediul apos și, atunci când sunt colorate cu alcool, din soluția de alcool corespunzătoare. Pentru mai multe detalii despre coloranți, vedeți mai jos.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: