Alocarea ADN-ului

Proteinele sunt extrase cu un amestec de fenol, cloroform, alcool izoamilic. Deoarece acestea densitate organică rastvoritley diferită de densitatea apei prin centrifugarea lizatului celular, la care se adaugă fenol și cloroform, formând două straturi distincte: inferior, ceea ce reprezintă o soluție bazată pe solvenți organici și superioară soluția apoasă ce conține. In acest caz, proteinele sunt denaturate și format precipitat, care este o bandă îngustă la granița dintre fazele apoase și organice. Dacă fenolul a fost echilibrat cu un tampon cu pH neutru, faza apoasă ar conține atât ADN, cât și ARN.

Dacă fenolul a fost echilibrată cu un tampon având un pH acid, ADN-ul va fi în stratul inferior, organic și ARN - în partea superioară, apos.

precipitare utilizată a ADN-ului cu etanol (izoprapanolom) în prezența sării (acetat de sodiu), cu separarea ulterioară a precipitat prin centrifugare și se dizolvă precipitatul de ADN sau adsorbție pe un suport solid (de exemplu, sticlă) cu eluare ulterioară.

Izolarea ADN-ului plasmidic

Metoda alcalină este utilizată pentru a izola ADN plasmidic din celule. În timpul experimentului, pH-ul soluției care conține ADN-ul genomic și plasmidic este modificat la alcalin. La acest pH, întregul ADN este denaturat. Cu toate acestea, ADN-ul plasmidic dublu catenar lanț, astfel, rămân asociate unele cu altele, deoarece plasmida are o formă inelară. In căli în continuare care este inițiată modificarea pH-ului la soluția inițială, ADN-ul genomic cu lanț lung, având dispersat în soluție sub formă de denaturante nestructurate un teanc dens și lanț ADN plasmidic restaura cu succes structura originală. Acum, ADN plasmidic este separat cu ușurință de ADN-ul genomic în timpul centrifugării.

Articole similare

• Regula de alocare a traducerilor de credite din rusă în engleză, traducere rusă în engleză

• Procedura de alocare a alocațiilor bugetare pentru prevenirea și eliminarea situațiilor de urgență -

• Cum se face retușarea fotografiilor digitale în gimp, Partea 1, documentație în limba rusă pentru ubuntu

Trimiteți-le prietenilor: