(pe un mediu nutritiv dens)
Agarul nutritiv este turnat în vase Petri și uscat într-un termostat. Se prepară un agar semi-lichid nutritiv de 3-4 ml într-un tub de testare și se topește într-o baie de apă.
Faceți diluții de zece ori ale bacteriofagului în soluția izotonică de clorură de sodiu. Apoi, se amestecă 0,5 ml din fiecare diluție a bacteriofagului cu același volum de cultură zilnică de bujori de bacterii sensibile la bacteriofage și se toarnă într-un tub cu agar semisolid la o temperatură de 45 ° C Amestecul obținut se toarnă rapid pe suprafața primului strat de agar-agar în capsula Petri, unde se solidifică ca un strat subțire. După ce se fixează al doilea strat de agar, plăcile sunt incubate la 37 ° C timp de 24 de ore. Amestecurile de bacteriofag, cultura și agar semi-lichid sunt realizate din diluțiile fagului 10 2 -10 10, în funcție de titrul așteptat al fagului.
Bacteriile care nu sunt infectate de bacteriofagi, se înmulțesc, formează un gazon de creștere continuă pe suprafața agarului nutritiv. Fiecare bacterie infectată cu bacteriofază liză și eliberează descendența unui bacteriofag care este implantat în celule bacteriene intacte și se repetă întregul ciclu. Ca urmare a lizării celulare pe peluza bacteriană continuă, apar pete "sterile" sau colonii bacteriofage negative. Numărul acestor pete corespunde numărului de particule de fag din amestecul însămânțat. Numărul de unități care formează spot în 1 ml din suspensia inițială a unui bacteriofag se numește titrul său.
Metoda de tipificare a fagilor are o importanță deosebită în studiile epidemiologice, deoarece permite identificarea sursei și modalităților de răspândire a agenților patogeni de boli. Determinarea fagului culturii pure izolate se realizează utilizând un set de bacteriofagi de diagnostic standard. Cultura culturii este determinată de tipul de fag care a provocat liza acesteia.
Pentru fagi dactilografierea culturi de bacterii studiate zilnic însămânțate „gazon“ pe suprafața de agar nutritiv în vase Petri, se usucă într-un cuptor, împărțit la fundul paharului în pătrate și pipetată cu o picătură corespunzând unui test bacteriofag-diluție este indicat pe fiolă. Într-un bacteriofag pătrat nu contribuie la controlul creșterii culturii. Vasul a fost incubat la 37 ° C, 18-20 ore și apoi evaluate rezultatul reacției. Rezultatul pozitiv al reacției de liză fagi - liza culturii la locul bacteriofagului (colonie „negativ“), în prezența creșterii în controalele indică conformitatea bacteriofag cultura și accesorii bazate pe fagolizabelnosti sale vizualizarea corespunzătoare.
Preparatele bacteriofage utilizate în practică sunt filtratul culturii de bulion al microbilor corespunzători lizați de fag, conținând particule de fag vii, precum și antigenii bacterieni eliberați din celulele bacteriene în timpul lizării lor. Preparatul rezultat - bacteriofagul lichid - ar trebui să pară un lichid complet transparent de culoare galbenă cu o intensitate mai mare sau mai mică. Medicamentul este testat pentru sterilitate (metoda de însămânțare), inofensivitate și activitate litice (titru).
Bacteriofagii de diagnosticare sunt disponibili atât în formă lichidă cât și în formă uscată, în fiole. Înainte de începerea lucrului, bacteriofagul uscat este diluat.
Pentru scopuri terapeutice și profilactice, bacteriofagii sunt disponibili sub formă de tablete cu un strat rezistent la acizi, sub formă lichidă sau în supozitoare. Bacteriofagul uscat tabletat este mai stabil când este depozitat și convenabil de utilizat. Un comprimat de bacteriofag uscat corespunde
20-25 ml preparat lichid. Perioada de valabilitate a preparatului uscat și lichid este de 1 an. Bacteriofagul lichid trebuie depozitat la o temperatură de
+2 - +10 0 C, uscat - nu mai mare de +1 0 C, dar poate fi păstrat în frigider și la o temperatură negativă.
Bacteriofagul interior este reținut în organism pentru
5-7 zile. De regulă, recepția unui bacteriofag nu este însoțită de reacții sau complicații. Nu există contraindicații admisibile.
Bacteriofagii pot fi de asemenea utilizați sub formă de irigații, clătiri, loțiuni, tampoane. Formele injectabile de bacteriofagi pot fi injectate în cavitățile sterile - abdominale, pleurale, articulare și în vezică. Există o formă de eliberare a bacteriofagilor în lumânări pentru administrarea rectală.
Dați definiția antibioticelor. Principalele grupe de antibiotice, în funcție de metoda de producție: naturală, semi-sintetică, sintetică. Denumiți numele omului de știință care a dezvoltat teoria chimioterapiei. Care sunt proprietățile care determină alegerea unui medicament chimioterapeutic? Ce este un indice de chimioterapie, scrieți formula lui, ce ar trebui să fie? Indicați primele preparate antispirochetice; Primul medicament antibacterian și numele omului de știință care la primit. Denumiți numele oamenilor de știință ruși care au descoperit pentru prima dată proprietățile antibacteriene ale mucegaiului verde. Denumiți numele unui om de știință care a studiat proprietățile antibacteriene ale fungicidului Penicillium și a încercat să izoleze penicilina. Oamenii de știință care au primit preparate penicilinice pentru prima dată. Producătorii de antibiotice - dați exemple. Clasificarea antibioticelor după origine, compoziția chimică, prin spectrul de acțiune. Mecanismul de acțiune al antibioticelor: ținte (punctele de aplicare a antibioticelor din diferite grupuri). Tipuri de acțiune - bactericidă și bacteriostatică; cum să le determinați într-un test in vitro? Antibiotice antivirale, mecanisme ale acțiunii lor. Controlul antibioticelor pentru sterilitate, inofensivitate, activitate. Metode de determinare a activității antibioticelor. În ce unități se măsoară activitatea antibioticelor? Condiții de depozitare a antibioticelor. Denumiți și descrieți posibile efecte secundare cu terapie cu antibiotice. Oferiți o definiție a conceptului de "rezistență la medicamente a microbilor". Tipuri de rezistență la medicament. Naturale și dobândite (primar și secundar). Mecanisme genetice ale rezistenței la medicament: cromozom și plasmidă. Mecanisme fenotipice ale rezistenței la medicamente - nume și caracterizare. Utilizarea rațională a antibioticelor - denumiri. Denumiți medicamentele - inhibitori ai enzimelor care distrug antibioticele. Descrieți metode pentru determinarea sensibilității microbilor la antibiotice.
Denumiți numele oamenilor de știință care au descoperit fenomenul de bacteriofag. Natura bacteriofagului - la care aparține împărăția ființelor vii? Structura - care se formează cel mai adesea - ce componente chimice conține; dimensiuni - în ce unități se măsoară amploarea bacteriofagilor? Descrieți fazele de interacțiune a unui bacteriofag virulent cu o celulă bacteriană sensibilă la acesta. Cum se detectează efectul unui bacteriofag asupra bacteriilor într-un mediu nutritiv dens și lichid? Cum va arata rezultatul pozitiv? Care este titrul bacteriofagului? Cum este definit și denotat? Ce este un mic bacteriofag. Descrieți interacțiunea unui mic bacteriofag cu o celulă bacteriană. Utilizarea bacteriofagilor în medicina practică, pe ce proprietate se bazează? Formele medicinale ale bacteriofagilor, ce cerințe ar trebui să le îndeplinească? Condiții de depozitare. Dați exemple de bacteriofagi utilizați pentru tratament, pentru diagnostic, pentru tastarea fagului.
Sarcina: la depozitul chimistului există preparate de bacteriofag tifoid: cu un titru de 10-7 și 10-9. Care dintre aceste medicamente va fi mai activă? De ce?
Trimiteți-le prietenilor: