PRIVIND INVENȚIILE ȘI DESCHIDERILE
19/00. Publicați. 1973.
Brevetul URSS N 334720, cl. C 12 N 9/52. Publicați. 1970. (54) METODĂ DE OBȚINERE A UNUI COMPLEX PROTEOLITAT, DESTINATĂ APLICĂRII ÎN ZOOTECHNIC
Invenția se referă la biotehnologie și este destinată utilizării în zootehnie. Scopul invenției este de a crește activitatea proteolitică globală prin predominarea proteazelor de tip I din complex și de a asigura accelerarea creșterii animalelor în timpul hrănirii sau în timpul sarcinii.
Metoda este după cum urmează.
Fermentarea. Se folosește o tulpină
Streptomyces fred (ac, tip strain
Waksman 3535 stocate în American ATCC colecția de cultură de tip sub numărul 10745, această tulpină poate fi regenerat periodic clasic N și> 1701 13 ianuarie 3AZ (I) 5 C 12 N 9/52 // A 23 K 1/165 (C 12 și (57) Invenția se referă la biotehnologie și este destinată utilizării în zootehnie. Scopul invenției â € „îmbunătățirea activității generale prateoliticheskoy datorită predominanței complexului de tip protează ll u asigură o creștere mai rapidă a animalelor în timpul hrănirii sau in timpul sarcinii. Metoda de preparare a unui complex proteolitic constă în cultivarea unei tulpini de Streptomyces
Pre-cultura acestei tulpini este preparată mai întâi în baloane cu agitare, apoi într-un fermentator intermediar, apoi inoculat într-un fermentator de producție industrială. Un mediu producătoare poate avea următoarea compoziție, g / l; făină de soia 15, glucoză 30. fosfat dipotasic
1; carbonat de calciu 10. După sterilizare, pH-ul său este aproape de 7,0, temperatura de fermentație este menținută la 28 ° C și aerarea -
55 la 0,3 volum de aer steril per 1 volum de mediu pe 1 min.
PH-ul mediului, inițial apropiat de 7,0, începe să scadă și după aproximativ 10 ore de timp de fermentație ajunge
6,5, apoi crește rapid și după aproximativ 20 de ore de fermentare ajunge la 7,5, apoi continuă să crească mai lent până la atingerea valorii finale de 8,2.
Este important să se mențină un pH egal cu 75 "
7.0 prin adăugarea automată a soluției de acid (3 Acid n.solyanoy), evitându-se astfel fragmentarea miceliului și izolarea unui mediu a unor metaboliți secundari de tip proteaze, l, 1b și peptidaze (acești metaboliți secundari, și, de asemenea, aceste enzime rămân intracelulare) creșterea producția de proteaze de tip 11, bolnav, și, în principal, Katori sunt enzime extracelulare, crește în mod semnificativ producția de tip protează 11
Timpul de fermentație poate varia de la 72 la 96 de ore și titrul mediu final poate fi de aproximativ 15.000
0.A. / ml, care depășește cu mult cunoscut titrului (3000 U.À. / ml) Unitatea Apzop1sokraschenno U.À,) este definit ca fiind cantitatea de enzimă care a fost incubat timp de 10 min la 25 ° C și la pH 7, 5 în prezența hb denaturate, se separă de acest substrat echivalentul a 1 ug tiroeina, pe yaemy subțiată absorbție spectrofotometrică la 280 nm în filtrat nu este precipitat extracția acidului tricloracetic, miceliu a fost separat de mediul de producție prin clarificarea filtrare, complex loc extras clasic Meth Izolarea enzimei (precipitare secvențială, trecere pe coloană), extrasă prin ultrafiltrare.
Membranele de ultrafiltrare care au un prag de separare corespunzător unei mase moleculare de 30.000 sunt inadecvate deoarece pot trece mai mult de 50% din complex, Membranele care au un prag de separare corespunzător greutății moleculare
Concentratul obținut prin ultrafiltrare este apoi pulverizat.
Se obține un complex de enzime proteolitice sub forma unei pulberi bej lumină având un titru de cel puțin
Randamentul total al activității proteolitice care este de aproximativ 70% mai mare decât cea care ar fi produs în industrie prin depunerea succesivă sau prin trecerea prin coloană, caracteristici ale noului complex: prezență (fermentoelektroforezom definit) proteaze de tip II, de tip bolnav, IV NPU excludere proteae 4 Ib și peptidază; â € „tip predominanță proteaza 11, ceea ce înseamnă că cel puțin 40% din activitatea proteolitică totală, proteaza bolnav sau de tip IV reprezintă fiecare cel mult 30% din totalul activității.
Caracteristicile principalelor proteaze ale complexului, proteaza de tip 11. Greutatea moleculară este aproape de 18.000; punctul izoelectric este aproape de 9,0; prin electroforeză la pH
8.0 se deplasează la catod cu o viteză relativ scăzută.
Proteaza de tip Ill. Greutatea moleculară este aproape de 14000; punctul izoelectric este aproape de 9; prin electroforeză la pH 8 °, deplasându-se la catod la o rată medie.
Proteaza de tip 1 /, Greutatea moleculară este aproape de 16500; punctul izoelectric este aproape de 9,0; prin electroforeză la pH
8,0 deplasare la catod cu o viteză relativ mare de viteză. Cultivați tulpina S.
fradiae ATCC 10745, efectuând prima inoculare în fermentator cu un volum total
2 m, volumul util al cărui volum este de 1 m3. Inoculul crosetat este utilizat pentru cultivarea într-un fermentator industrial cu o capacitate de 30 m și o capacitate utilă de 20 m,
Mediul de fermentație are următoarea compoziție pentru un container de 20 m, kg:
Făină de soia 300
Carbonat de calciu 200
Înainte de fermentare mediul este sterilizat și pH-ul său a fost ajustat la 7,0, temperatura de fermentare este setat 28 1 C. Mediul este aerat în timpul fermentației prin circularea aerului steril 0,3 volum până la 1 volum de mediu în 1 min. Fermentația a fost efectuată timp de aproximativ 72 de ore menținând pH 7,0-7,5 prin adăugare sistematică de acid clorhidric 3N.
După 72 ore, concentrația complexului proteolitic în mediu este de 15.000
Extracția. Mediul de cultură este filtrat printr-o clargelă pe o presă clasică de filtrare cu o suprafață de filtru de 10 m.
Pulberea bejă obținută este combinată cu amidon de uz industrial.
Dispozitivul de ultrafiltrare utilizat este cel mai mare dispozitiv comercial al mărcii UFP 10, fabricat de Ron-Poulenc.
Alimentarea dispozitivului de ultrafiltrare se realizează cu ajutorul unei pompe de descărcare și este controlată prin deschiderea supapei de evacuare. care menține presiunea presetată, alimentarea optimă fiind de 1000 l / m h.
Aplicarea în zootehnician a complexului propus conduce la obținerea celor mai bune rezultate atunci când sunt efectuate în conformitate cu următoarele condiții.
40 sunt mai bine clasificate deoarece sunt mai musculare și mai puțin grase, dar aceste îmbunătățiri au fost neregulate.
Utilizarea furajelor destinate mamiferelor în timpul sarcinii, hrănire și înțărcare Complexul propus stimulează activitatea exocrină a pancreasului.
Această stimulare este confirmată, în special, prin experimente la șobolan și se exprimă printr-o creștere semnificativă a concentrației intra-pancreatice a tuturor enzimelor care sunt secretate de canalul pancreatic. Această creștere poate atinge 50% pentru amilază, 70% pentru blana triplă și chymotrypslenogen, 80% pentru lipază.
Efectul stimulării exocrine a activității pancreatice
3 "crede cu bucurie că complexul va fi deosebit de eficient în cazul femeilor (la femei la sfârșitul sarcinii) atunci când este necesar să se identifice intensiv activitățile în
Reproducere (la femele care alăptează un număr mare de Otomosti) sau în cazul acetaptării (la mamiferele tinere în perioada
") Am sânii lor QT). Urmărește! Despre "d!
IWA = 17 p. Dsbaalanya f
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: