Colorarea bacteriilor - site-ul rezumatelor

Metoda lui Peshkov

• Pentru a fixa cursele cu căldură, turnați soluția de albastru de metilen și încălziți preparatul peste flacăra lămpii cu alcool, aducând vopseaua la fierbere. Se fierbe 15-20 s, deoarece evaporarea adaugă noi porțiuni de vopsea;
• Preparatul este clătit bine cu apă, în timp ce citoplasma este decolorată și vopseaua reține sporul;
• citoplasma poate fi vopsită în contrast cu 30 cu o soluție 0,5% de roșu neutru;
• se spală formulare cu apă, se usucă cu hârtie de filtru și lentile mikroskopirovat 90 H. Câmpul de celule vedere vizibile roz vegetative cu endospori, vopsite în albastru închis (tinerii sporii) sau albastru (sporii formate) de culoare.

Metoda Peshkov-Trujillo

• se frământă cu căldură, se toarnă o soluție apoasă saturată de verde malachit și se încălzește preparatul peste flacăra lămpii cu alcool, fără al aduce la fierbere timp de 3 minute;
• Produsul este spălat cu apă, în timp ce endospora păstrează vopseaua. Citoplasma poate fi vopsită în contrast cu soluție apoasă de fucsină 0,25% timp de 1 min;
• se spală formulare cu apă, se usucă cu hârtie de filtru și mikroskopirovat lentilă 90 H. Câmpul vizual roz vizibil (matur) sau roșu celule vegetative (tinere) care conțin albastru-violet (tineri) sau verzi spori (mature).

Metoda lui Omelyansky

• Aplicați o picătură de fuzină Tsil pe jumătate diluată Tsil în diapozitiv;
• într-o picătură de vopsea, picură o picătură de suspensie bacteriană;
• după 2-3 minute se adaugă o picătură de carcasă neagră lichidă sau soluție apoasă de nigrozină 10%;
• picături amestecat rapid și, folosind un al doilea diapozitiv de sticlă, pentru a prepara frotiuri de tip frotiu de sânge - microscop sum (coverslip) în picături de sticlă la suspensie la 45 0 și muta înainte la sfârșitul slide;
• medicamentul este uscat în aer și microscopat cu o lentilă de 90 X. În câmpul vizual, pe fundalul întunecat al carcasei, celulele bacteriene roșii strălucitoare sunt văzute înconjurate de capsule incolore.

Metoda Hins

• Aplicați o picătură de carcasă neagră la capătul diapozitivului și introduceți materialul de testare în el. Amestecați lichidul cu o nervură a celui de-al doilea diapozitiv sau a geamului de acoperire pentru a face o frotiu pe întreaga suprafață a preparatului;
• frotiu uscat în aer, se fixează cu un amestec de Nikiforov timp de 5-10 minute;
• colorant frotiin filsin Zilya, diluat cu apă în raport de 1,3, timp de 2-3 minute;
• Clătiți produsul cu apă, uscați la aer și microscopați cu imersie. Pe un fundal gri închis, celulele de trandafir-magenta de bacterii sunt contraste, înconjurate de capsule incolore.

Metoda lui Antony

• frotiul uscat în aer al culturii este fixat în perechi de formalină 40% timp de 3-4 minute, pentru care medicamentul este plasat într-o placă Petri pe tunderea geamului cu un pată în picătură în picătură de formalină;
• un frotiu fix este colorat cu o soluție 1% de violet cristalin timp de 2-3 minute, după care se spală cu o soluție 2% de sulfat de cupru;
• Medicamentul este uscat la aer și microscopat cu un sistem de imersiune. Pe fondul unui liliac slab, în ​​special la marginea frotiului, celulele purpurii bacteriene sunt văzute înconjurate de capsule incolore.

CULORAREA BACTERIALĂ A GRAMELOR

Pentru microscopie și pentru a schița peretele celular în Saccharomyces cerevisiae și Azotobacter chroococcum, colorate folosind metoda Gutstein:

• Frotiurile sunt fixate timp de 15 minute într-un lichid Carnoy (10 ml acid acetic glacial, 60 ml 96 ° alcool etilic, 30 ml cloroform);
• preparatele sunt imersate într-o soluție apoasă de tanin 10% pentru a reduce afinitatea citoplasmei la coloranții de bază;
• 20-30 slide-uri au fost spălate cu apă, se colorează cu o soluție apoasă 0,02% cristal violet și diluat 1:40 cu apă Ziehl fucsin (modificarea Peshkov) timp de 30 de secunde (drojdie) și 60 (bacterii);
• preparatul este spălat, uscat și microscopat cu o lentilă de 90 X. În câmpul vizual, un perete celular roșu strălucitor este vizibil în jurul citoplasmei ușor roz sau incolor.

• un frotiu fix este pătat timp de 1-2 minute cu violet de gențian carbolic;
• colorantul este drenat și, fără spălarea preparatului cu apă, tratați frotiul cu 1-2 minute cu soluția Lugol până când se înnegrește;
• soluție Lugol a fost decantată, medicamentul a fost spălat cu apă și decolorate preparare 0,5-1,0 min 0 96 th alcool etilic, alcoolul este turnat pe tampon, o ușoară agitare sticlă, și schimbați-l de mai multe ori. Pentru a exclude decolorarea nedorită a celulelor la alcool a fost adăugat iod (2 ml de 10% iod în 100 ml de soluție de etanol). Alcoolul poate fi înlocuit cu acetonă, care acționează aproape instantaneu;
• preparatul este spălat cu apă și în plus colorat timp de 2-3 minute cu fuchsină apoasă;
• colorantul este drenat, preparatul este spălat cu apă, uscat și microscopat cu un sistem de imersie.

• în frotiurile fixe căldură pus benzi de hârtie de filtru impregnată cu violet de gențiană (cristal violet, metil violet), colorant 1-2 min. O mai bună utilizare modificare Învinețirea: soluție alcoolică de violet de gențiană (1 g de cristale Gențiană violet, 100 ml 96 0 alcool etilic, 5 ml de glicerol) sau soluție carbolice hârtie violet gentiana preparată prin albăstrime - benzi de hârtie de filtru a fost imersat într-o soluție de colorant alcoolică, uscată în aer sau într-un termostat la 37 ° C (pete de hârtie bune uniform). Colorată fâșie de hârtie plasată pe frotiu, turnat ei 2-3 picături de apă și strâns lipită de hârtie pentru a murdări. Dye 1-2 minute;
• scoateți hârtia, scurgeți vopseaua și, fără a clăti preparatul cu apă, se toarnă o soluție Lugol pe frotiu timp de 1-2 minute înainte de înnegrirea frotiului;
• amestecați soluția de Lugol și se toarnă 1-2 picături de alcool 96-etilic pe preparat timp de 30-60 de secunde, agitând ușor medicamentul;
• se clătește preparatul cu apă și se pătrunde suplimentar cu o soluție apoasă de fuchsină timp de 1-2 minute;
• clătiți produsul cu apă, uscați cu hârtie de filtru și microscopie cu un obiectiv de 90 X.
• un frotiu fix este colorat timp de 1 minut cu violet de cristal;
• timp de 3-4 s spălați colorantul cu apă, excesul de care este îndepărtat;
• medicamentul este colorat timp de 1 minut cu soluție Lugol;
• Lugol este drenat, preparatul este spălat cu apă și decolorat cu alcool etilic 96 ° timp de 30 de secunde, în picături, până când se oprește colorarea;
• alcoolul este clătit cu apă și medicamentul este tratat cu o soluție de safranină 30 s;
• colorantul este spălat, preparatul este spălat cu apă, uscat și microscopat.

Modificarea găinilor

• un frotiu fix este colorat timp de 1 minut cu violet de cristal;
• timp de 3-4 s spălați colorantul cu apă, excesul de care este îndepărtat;
• medicamentul este colorat timp de 1 minut cu soluție Lugol;
• Lugol este drenat, preparatul este spălat cu apă și decolorat cu alcool etilic 96 ° timp de 30 de secunde, în picături, până când se oprește colorarea;
• alcoolul este clătit cu apă și medicamentul este tratat cu o soluție de safranină 30 s;
• colorantul este spălat, preparatul este spălat cu apă, uscat și microscopat.

Modificarea GP Kalina

• Aplicați o picătură de suspensie bacteriană și o picătură de reactiv I pe o lamelă curată și degresată. Se amestecă uniform amestecul pe o suprafață de 1 cm2;
• frotiu uscat la temperatura camerei, fixat cu căldură;
• aplicați soluția II timp de 1-2 minute;
• se spală formulare cu apă, se usucă cu hârtie de filtru și mikroskopirovat lentilă 90 H. Câmpul de vedere al negru-violet (verde) de lumină și bacterii gram negative roșii.

(diamant verde) - 0,5 g;

Alcool etilic, 96 - 100 ml.

Soluție 0,5% alcool de iodură de potasiu - 96 ml;

Soluție 0,5% alcool de fucsină de bază - 2 ml;

5% soluție de alcool de iod - 2 ml.

Metoda lui Omelyansky

• cu privire la loviturile de căldură, se toarnă fuchsinul Tsilya și pătrunde celulele timp de 30-60 de secunde;
• se clătește preparatul cu apă și se scufundă într-un pahar cu 1% H2SO4 timp de 20-30 secunde, în timp ce celulele devin decolorate, iar volumul își păstrează culoarea;
• clătiți produsul cu apă și, în plus, contrastați cu colorant albastru de metilen (1,40) timp de 15-30 secunde;
• vopsea se spală cu apă, se usucă cu hârtie de filtru și preparare mikroskopirovat lentilă 90 H. Câmpul vizual în celulele roșii vizibile și granule albastre volutin citoplasmei.

Metoda Neisser

• Aplicați amestecul de soluții 1 și 2 timp de 1-5 minute la tampoane fixate termic;

Soluția 1 Soluția 2

Albastru de metilen - 0,1 g; Crystal. violet - 1g;

Alcool etilic, 96 - 2 ml; Alcool etilic, 96 - 10 ml;

Ice Acetic Distiller. apă - 300 ml.

Distilează. apă 100 ml.

• Scurgeți vopseaua și aplicați soluția de Lugol timp de 1 minut;
• se clătește preparatul cu apă și colorant cu o soluție de chrysoidină (1 g de crizidină, 300 ml apă distilată) timp de 2 minute;
• clătiți produsul cu apă, uscat și cu microscopie cu lentilă de 90 X. În câmpul vizual, sunt vizibile boabe volute albastru-albastru în celule bacteriene galbene.

Articole similare

• Colorarea bacteriilor pe gram

Trimiteți-le prietenilor: