Metode generale de formulare a medicamentelor
Secțiuni de parafină, vopsite cu coloranți solubili în grăsimi. Pentru identificarea unor lipide care nu sunt spălate din țesături în timpul deshidratării, defrișarea, turnare, deparafinare și transferul la apă, secțiunile trebuie să fie închise într-un mediu în care grăsimile și coloranții nu se dizolvă. Pentru a face acest lucru, este suficient să se elimine excesul de iod și să se închidă secțiunile în sirop de guma, glico-gel, glicerină-gelatină și așa mai departe.
Concluzie în rășină.
După iluminare în xilen, felii colorate cu metodele obișnuite sunt de obicei închise în rășini. Anterior, ca media folosită pentru soluții de semnare Canada balsamului sau damar rășină, ulei de cedru condensat, euparalya și colab., Xilen și cloroform. În balsamul canadian, secțiunile sunt închise după colorare cu hematoxilină sau eozină.
Pentru a încheia secțiuni colorate cu albastru de anilină și fuchsină acidă, Curtis a sugerat acidularea acidului salicilic. O parte din soluția de balsam din xilen este diluată până la consistența siropului lichid, saturată cu cristale de acid salicilic, filtrată prin hârtie de filtru și amestecată cu un volum egal de soluție stoc. Dacă soluția este suprasaturată, în preparate apar adesea cristale de acid salicilic.
Toate rășinile de mai sus nu sunt potrivite pentru încheierea secțiunilor colorate în conformitate cu metoda Romanovskii, deoarece componenta albastră a colorantului se estompează treptat în acest mediu.
Concluzia în rășini și siropuri se realizează după cum urmează. Selectați capace de dimensiuni potrivite pentru a acoperi secțiunile, în Rusia dimensiunile sunt 18X18, 20X20, 24X24, 24X36, 24X76 mm, etc.
In sticla de acoperire se aplică, picătură deținător sau dacă geamul lung, două picături de rășină lichidă, în soluție de xilen. Suprafața este așezată în picătură în sus pe hârtia de filtru. În cazul în care secțiuni să încheie într-o soluție de rășină în xilen, în timp ce este posibil pentru a prepara un pahar de acoperire 6, dar intră în secțiuni înghețate pentru a pregăti mai bine un pahar de sirop. Culisa sticla este scos din secțiunile patati din xilen sau apa (în funcție de firele), uscate și țineți-l în jos pe geamul de acoperire secționat oblic, astfel încât unul dintre capătul lung preocupat de hârtie de filtru aproape de alunecare de acoperire. Apoi, diapozitivul este coborât ușor până când forfecarea atinge o picătură de soluție de rășină sau sirop de pe alunecarea capacului. Căderea se extinde până la marginile acoperișului. Dacă un capac de sticlă cad bule de aer, acestea pot fi îndepărtate prin apăsarea ușoară a capacului geamul cu vârful unui ac de disecție sau ușor ridicând o margine a acestuia; uneori este ușor să adăugați gudron sau sirop. Apoi rășina exces drenată, ținând apăsat diapozitiv de sticlă tăiate la un unghi de aproximativ 30 °, și presate la acesta lamelei, obsushivayut marginile hârtiei de filtru. După aceea, medicamentele sunt plasate pe o placă și plasate într-un loc cald pentru uscare.
Marginile geamului de acoperire nu trebuie șterse cu vată de bumbac sau tifon înmuiată în xilen, deoarece o parte a rășinii se poate întinde pe suprafața curată a geamului de acoperire. Uscarea, formează neregularități care interferează cu observarea sub microscop și de la care este foarte dificil să scăpați.
Dacă secțiunile cuprind tricaprate celuloză, apoi se usucă în exces în jurul marginilor sticlei de acoperire sub formă de granule solide, mici, care pot fi ușor tăiat cu un cuțit mic sau elimina unghia.
La încheierea secțiunilor mari pentru studii topografice, de exemplu, glanda mamară, emisferele cerebrale ale creierului, oasele umane etc. între tăietura și geamul acoperit, aerul se acumulează adesea după încheiere. Pentru a evita acest lucru, se recomandă utilizarea unor soluții de rășină mai concentrate, care sunt încălzite pentru a reduce vâscozitatea. Polistirenurile nu sunt adecvate pentru acest scop, deoarece soluțiile lor au o viscozitate ridicată la concentrații relativ scăzute.
Mai convenabil sunt balsamul canadian, rășinile neutre ale esterului și unele rășini ciclo-parafină și terpenică; secțiunile pot fi închise în soluții ușor de încălzit de 60-80% din aceste substanțe în xilen.
Ca rezultat al deshidratării incomplete în preparatele de deținut colorat, se formează adesea zone opace sau tulbure. Sub microscop într-o astfel de secțiune a tăieturii și deasupra acesteia se găsesc numeroase picături de apă, culoarea se estompează puternic. Pentru a elimina acest lucru, eliminați lamelei, se spală cu rășină sintetică xilen sau balsam, se taie deshidratat în 100% alcool, acetonă sau alcool izopropilic, xilen iluminează în amestec cu un agent de deshidratare și 2-3 schimbări de xilen proaspăt și din nou să încheie.
Dacă culoarea a devenit decolorată, secțiunile pot fi colorate din nou. Pentru aceasta, preparatul este păstrat în xilen (până la câteva ore, până când sticla de acoperire se separă) și apoi trece prin alcool 100% și soluțiile adecvate, ca de obicei.
De asemenea, dacă investigatorul are doar o felie pictată disponibilă, ar fi de dorit să se vopsească prin altă metodă. Dacă este necesar, colorarea primară poate fi decolorată cu alcool acidifiat; Secțiunile sunt apoi spălate bine cu apă și colorate folosind o nouă metodă. De obicei, secțiunile colorate cu hematoxilină de fier la început sunt deja inadecvate pentru reacția cu fericianura de potasiu pe fier, deoarece lacul de fier va reacționa de asemenea.
Dacă sunt așezate două felii dintr-un bloc pe diapozitiv, uneori pictez o singură felie din nou, lăsând cealaltă sub alunecare.
Secțiunile de țesuturi încorporate în nitroceluloză pot fi lipite în pahare de sticlă înainte sau după vopsire. Felii sunt luate de pe vas pe un tobogan curat și îndreptate; prin urmare, sticla este ținută înclinată pe jumătate înclinată în apă, apoi tăierea este bine șters cu hârtie de filtru.
Dacă tăierea nu este încă colorată, poate fi procesată cu perechi de eteri; în timp ce nitroceluloza se înmoaie și se lipsește strâns în diapozitiv. Este de asemenea posibil să se omită sticla pentru câteva secunde într-o soluție 0,5% de nitroceluloză în eter, cu un tampon cu alcool uscat o suprafață inferioară a lamelei și se scufundă pentru etanșarea filmului în cloroform timp de 5-10 minute. Secțiunile au fost apoi efectuate secvențial prin 95 și 80% alcool etilic în apă (secțiuni de țesut fixat în lichide cu clorură mercurică, înainte de transferul în apă a fost tratată cu soluție de iod 0,5% în alcool 70% timp de 10-15 minute și apoi Soluție 5% de tiosulfat de sodiu 5-10 min). Felii pot fi transferate direct în soluția de colorant dacă sunt preparate pe alcool apos. După colorare, excesul de colorant se spală, așa cum se obișnuiește pentru această metodă.
Celloidina este unul dintre tipurile de nitroceluloză, ester celulozic de acid azotic. Lilly numește celloidina un produs cu o greutate moleculară relativ scăzută, iar nitroceluloza este un produs mai vâscos cu o greutate moleculară mare. În practica laboratoarelor de uz casnic este obișnuit să se utilizeze un termen - celloidin.
Secțiuni "gratuite" de nitroceluloză.
Unii cercetători preferă să pată secțiunile de celloidină și nitroceluloză înainte de a le monta pe diapozitive. Acest lucru este util în special în studiile de laborator, când este necesar să se pregătească un număr mare de secțiuni dintr-un bloc.
În acest caz, din alcoolul 80% în care sunt stocate secțiunile, ele sunt transferate în soluții alcoolice ale coloranților fie imediat, fie realizate preliminar prin 70 și 50% alcooli și apă. Dacă se îndepărtează un depozit de mercur, secțiunile sunt conduse printr-o soluție de iod 0,5% în alcool 70%, o soluție de tiosulfat de sodiu și apă. Transferați secțiunile cu o spatulă ușor curbată, ținând, dacă este necesar, cu un ac disecant.
Deshidratarea și strălucirea secțiunilor de nitroceluloză.
După colorare, secțiunile libere sunt deshidratate, limpezite, care trec secvențial prin aceleași soluții care sunt utilizate pentru secțiunile de nitroceluloză lipite pe diapozitive. Acestea din urmă sunt tratate în același mod ca secțiunile de parafină și secțiunile de parafină celonată.
Secțiunile au fost colorate cu coloranți cele mai rezistente, deshidratate în alcool 95%, pentru a ilumina carbol-xilen Weigert [8], care este un amestec constând dintr-o parte fenol cristalin topit și trei părți de xilen, clătite cu 2-4 modificări xilen și depex, Permalta, balsam canadian sau altă rășină adecvată, precum și secțiuni de parafină.
Decolorarea nitrocelulozei în secțiuni.
Dacă este necesar, o culoare de bază de anilină coloranți pot decolora nitroceluloză cu o soluție etanolică de 2% din colofoniu, apoi deshidratate și se taie ilumineze așa cum este descris mai sus sau una dintre metodele descrise mai jos.
Iluminarea secțiunilor colorate cu coloranți ușor extrași.
Secțiunile pictate cu coloranți de bază anilină, care sunt extrași cu carbol-xilen, Weigert [8] recomandă iluminarea în câteva schimburi de xilen; Înainte de a transfera secțiunile în următoarea modificare a solventului, acestea sunt uscate cu hârtie de filtru.
Secțiunile înghețate, pictate pentru a identifica grăsimile, sunt prinse pe diapozitive curate. O margine a tăieturii este apoi ținută pe o sticlă parțial îmbrăcată, care este apoi îndepărtată cu grijă, astfel încât tăierea să fie distanțată pe suprafața sticlei. Plitele de pe tăiere sunt îndreptate, iar din nou se scot în apă. Uneori, feliile sunt răspândite cu ajutorul acelor de disecție, mai ales dacă sunt rupte sau neregulate. Frunza expandată este uscată, blând-o ușor cu hârtie de filtru netedă. Tăierea este apoi învelită într-un mediu adecvat, fecalele descrise mai sus. Pentru a încheia preparate temporare, puteți folosi glicerina. Formulările pot fi preparate pentru depozitare pe termen lung, podsushivaya cu atenție diapozitivele de joncțiune și ochelari de acoperire și soluția lor okantovyvaya Canada balsamul în xilen sau toluen și adeziv nitroceluloză. Concluzii secțiune a unei picături mici de glicerină, care nu ajung la adăpostul sticlei de acoperire, la marginea okantovyvaya de polistiren poate fi obținut pentru o lungă perioadă de timp de droguri stocate.
Prelucrări cu polistiren.
Formulările închise într-un glicerol-gelatină sau arleks -zhelatin, okantovyvayut 20% soluție de polistiren în xilen, care se aplică cu o baghetă de sticlă la marginile lamelei. După o oră, drogul se usucă și se oprește și se poate pune în dimineața următoare împreună cu alte preparate, fără teama că se vor lipi împreună. De asemenea, puteți utiliza în acest scop un amestec de xilen și caprat de celuloză.
Rășina de lanolină este recomandată de Romeys ca mijloc cel mai potrivit pentru tăierea felilor închise în medii solubile în apă. Pentru prepararea sa, se usucă 20 g de lanolină anhidră, se încălzește cu agitare într-o ceașcă de porțelan timp de 15 sau 20 de minute. Apoi, fără a se opri amestecarea, se adaugă treptat 80 g de colofoniu până când se formează forme limpezi limpezi, limpezi. Este mai bine să-l încălziți pe o țiglă electrică cu o spirală închisă pentru a evita aprinderea. Amestecul rezultat se toarnă în cani mici și se lasă să se solidifice. O tijă de sticlă sau o spatulă metalică este încălzită puternic, o mică bucată de lanolină este separată cu ajutorul lor și fixată de aceasta prin colțurile geamului de acoperire. Apoi marginile sticlei sunt marcate cu o cantitate mare de rășină topită la cald.
Pentru a obține medicamente permanente, de obicei se utilizează medii care conțin gumă arabică sau gelatină. Gumul arabic după un timp se usucă până la o stare solidă și gelatina se topește înainte de utilizare. Compoziția mai multor materiale utilizate cu succes este prezentată în Tabelul.
Trimiteți-le prietenilor: