După diluarea a câteva picături de probă, sperma este examinată sub microscop și sperma diluată este turnată în tuburi de centrifugă din plastic, care sunt plasate într-un vas cu apă încălzită la 35 ° C. Vasul este apoi transferat la frigider și lăsat timp de 2 ore la 4 ° C. În acest timp, materialul seminal este răcit la 4-5 ° C, iar glicerina, care acționează ca un factor de protecție, pătrunde în membrana spermatozoizilor.
Sperma se scoate din frigider, se scutură cu grijă și se pune imediat în paiete de plastic (paillette) cu o capacitate de 0,5 ml. Pentru a efectua procedura, utilizați o aspirație specială sau aspirați gura prin tubul de latex. La distribuirea spermei, asigurați-vă că pulberea dintre capetele filtrelor de paie este înmuiată cu lichid și întărită. În primul rând, paiele sunt umplute la jumătate, după care, lăsând un bule de aer, adăugați, fără a aduce 1 cm în partea de sus. Pungile de aer-râuri împiedică transfuzia de spermatozoizi (datorită schimbărilor de presiune în timpul dezghețării). După aceea paiele sunt sigilate.
Există două metode alternative de înghețare - manuală și automată. Procentul de glicerol din diluant depinde de metoda utilizată. Pentru înghețarea manuală, utilizați un recipient (30 x 40 x 30 cm) din polistiren cu un raft metalic demontabil, amplasat la 10 cm sub margine. Containerul este umplut cu azot lichid la un nivel de 4 cm sub raft.
Paiele pliate (8-10 max) sunt prinse cu pensete, plasate orizontal pe un raft și lăsate în azot evaporat timp de 8 minute. Apoi, penseta se răcește în azot lichid, se ridică și se rotește cu paietele de ajutor, unul după altul, pentru a se asigura de cristalizarea completă a conținutului lor. După aceea, pajeturile sunt scufundate în azot lichid. O astfel de procedură se numește statică datorită prezenței unui flux necontrolat constant de azot evaporat în timpul perioadei de răcire și de congelare.
Prin înghețarea automată se înțelege utilizarea mașinii. Această metodă se numește dinamic, deoarece evaporarea azotului intră în congelator la viteze diferite, în funcție de programul care vă permite să reglați viteza de congelare. Păzile sunt înghețate în poziție orizontală pe un raft cu un capac detașabil, iar mai multe astfel de rafturi pot fi plasate în congelator. Programul de înghețare include următoarele moduri:
• -2 0 C / min, pornind de la +4 0 C până la -7 0 С
• -50 ° C / min, de la -7 ° C la -100 ° C
• -25 ° C / min, de la -100 ° C la-180 ° C.
După terminarea procedurii, raftul este plasat direct în azot lichid.
Payette dezghețată într-o baie de apă (în ter-Mose) la 70 „C timp de 8 secunde. După decongelare le-a pus pe verticală în jos se filtrează, imprimarea capacul vstryahi-vayut la bule de aer ar putea ridica. Straws autopsiate și câteva picături mici de probă plasate încălzit pe o lamelă de sticlă pentru evaluarea parametrilor de material seminal după decongelare-TION. Înainte de a restabili mobilitatea spermato-Zoid nevoie de ceva timp, de obicei 2 năut E suficient. datorită faptului că laboratoare diferite folosesc o varietate de tehnici pentru th orazhivaniya când decongelare furat, am primit de la un anumit à la laboratoarele din toate sunt obținute sunt recomandări, deoarece procesele de congelare și decongelare a TEN-dar legate între ele trebuie să fie respectate cu strictețe.
Inseminarea artificială cu spermă proaspătă. Se practică în cazul în care bastonul natural este imposibil din mai multe motive: bărbatul și femela trăiesc destul de departe; Amelioratorul intenționează să insemineze mai multe cățete sau să se teamă de contactul direct al femeii cu producătorul, din cauza prevalenței bolilor infecțioase.
Inseminarea artificială a semințelor congelate
In prezenta procedură de spermă proaspătă Osem-neniya petrec ziua ovulatiei, și apoi se repetă zi cherez2. La utilizarea materialului seminal Zamora-zhennoy, care se caracterizează viabilitatea SNI-zhennoy ca congelare protses-sy și decongelare, exercitând un impact negativ asupra membranei de spermă acrosomalproteinaza și, - inseminare viespe-fected cu 1 și 2 zile după ovulație, și procedura Auto-Rui petreceți 24 de ore după prima. Probele de progesteron din ser servesc ca un bun indicator al ovulației. Con centrarea de progesteron, determinat prin imun radio, trebuie să fie menținut la un nivel de 30 nmol / l (10 ng / ml) în prima zi, și între 55 și 75 nmol / L (18-25 ng / ml), în a doua zi de inseminare. O imunotestare rapidă a enzimelor este, de asemenea, adecvată pentru evaluarea calității și cantității de progesteron.
Sperma proaspătă este introdusă în vagin cu ajutorul unui cateter rigid din plastic, folosit pentru inseminarea de vaci, dar scurtat la dimensiunea dorită. Cateterul este echipat cu o seringă de 2-5 ml cu un piston de cauciuc. (Figura 6). Este necesar să ne amintim. că nu orice seringă poate fi utilizată, deoarece unele tipuri de cauciuc au un efect toxic asupra spermatozoizilor.
Fig. 6 Trei tipuri diferite de catetere cu tub de rulare de nailon utilizate pentru inseminarea artificială intrauterină transcervicală a câinilor. Mai jos - un cateter normal de plastic pentru vaci. scurtată până la lungimea necesară pentru inseminarea intravaginală la câini.
Volumul de injecție nu trebuie să depășească 3 ml pentru rasele mari și 2 ml de mici, altfel sperma poate scăpa din tractul genital feminin. Vulva este ridicată de un cateter indicativ. După introducerea caudal ascensorului final kaetera și plumb de-a lungul peretelui dorsal al vaginului la bolta vaginala, pentru a evita contactul cateterului în vezică, uretră orificiu ca localizat pe peretele ventral al vaginului. Operatorul Second Hand palpeaza colului uterin prin peretele abdominal, corectarea avansarea cateterului. Sperma este injectată încet, după care femelele sunt ținute timp de 10 minute cu gălbenuș în poziție cu crăpătură înaltă. Zona Poglazhivanie a vulvei provoacă contracții ale uterului, promovând avansarea spermei.
Pentru inseminare de material seminal congelat proaspăt și-ottayanoy dezvoltat in interiorul cateter mama speciale (Fig.6) compus din nylon de ghidare și metalic UI cateterul cu turla atașată. Tehnica implică introducerea unui tub de ghidare în vagin, cu un cateter metal înăuntru; după ce tubul atinge Xia bolta vaginale, canule de metal vyd Vigano-înainte și introduse în colul uterin, Pryderi-live degetul mare și arătătorul prin peretele abdominal (Fig.7).
Figura 7. Inseminarea artificială a câinelui cu cateter intrauterin. Pentru a preveni contaminarea cu microflora vaginală sau cu vaginul sensibil la traumă la cateterul metalic, este amplasat un tub catarg superior.
Canalul gâtului este drept, cu pliuri ușoare și este complet deschis la stadiul de estrus, prin urmare, introducerea unui cateter nu produce, de obicei, dificultăți. Pentru a efectua procedura, animalul este ridicat la masă, de obicei sedarea nu este necesară (Figura 8).
Executarea manipulării presupune prezența anumitor abilități, ocupă un operator experimentat timp de cel mult 1-2 minute și nu cauzează disconfortul animalului. După efectuarea inseminării intrauterine, nu este necesară ridicarea regiunii pelvine a cățea.
În ciuda posibilității de inseminare intravaginală cu utilizarea spermei congelate-decongelate, cele mai bune rezultate sunt furnizate în interiorul inseminării uterine, care reduce și doza de spermă.
Dacă cateterismul nu este posibil sau operatorul nu este familiarizat cu tehnica de efectuare a acestuia, inseminarea artificială este recomandată în timpul laparoscopiei sau cu utilizarea unui endoscop. În SUA și Canada, metodele chirurgicale de inseminare artificială sunt cele mai frecvente. Cu toate acestea, în majoritatea țărilor europene, osmele intravaginale, precum și tehnicile care utilizează cateter și endoscop, sunt considerate mai etice.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: