A61K39 / 012 - Antigene Coccidia
Proprietarii brevetului RU 2312890:
Academia Rusă de Științe Agricole Instituția științifică de stat Institutul Veterinar de Păsări (GNU VNIIVIP Rosselkhozakademii) (RU)
Invenția se referă la parazitologie veterinară și biotehnologie. Tulpina L-1-23 Eimeria tenella a fost depusă în colecția Institutului veterinar de cercetare științifică al industriei păsărilor de curte din Rosselkhozakademia sub numărul KE Nr. 1. Tulpina este izolată de un pui bolnav, un pui infectat cu o ouăstură din tulpina L-1 Eimeria tenella. Tulpina este specifică doar pentru pui, parazitul poate suferi un ciclu complet de dezvoltare, de asemenea, la embrioni de pui. Tulpina are astfel de proprietăți imunobiologice care îi permit să fie utilizată pentru studii experimentale, precum și pentru producerea de materiale antigenice și imunogene utilizate pentru diagnosticarea și prevenirea specifică a bolii. 2 tab.
Invenția se referă la biotehnologie și Parazitologie veterinară, și în special la producerea de diagnosticare și vaccinuri împotriva coccidiozei puilor cauzate de Eimeria tenella (E. tenella), și pot fi folosite și în scopuri de cercetare.
Coccidioza de pui, cauzată de E. tenella, este răspândită în toate țările și provoacă daune economice semnificative păsărilor industriale.
Multe centre de cercetare sunt implicate în studierea atât a parazitului în sine, cât și a bolii cauzate de el în cazul păsărilor. Scopul principal al cercetării științifice este crearea de mijloace și metode de diagnosticare, prevenire chimică și specifică a bolii.
O metodă importantă de combatere a coccidiozei de pui este imunoprofilaxia specifică. Vaccine Producerea și utilizarea Tehnologia este astfel ca cea utilizată pentru tulpinile lor de producție ar trebui să aibă activitate imunogenă ridicată, de reproducere, să fie rezistente la diferite medicamente anticoccidice (chimioterapie si antibiotice ionofori).
Un număr de tulpini de E. tenella utilizate pentru producerea de vaccinuri sunt cunoscute [1, 2, 3, 4]. Aceste tulpini sunt izolate în alte țări și sunt utilizate în cercetarea și producția de vaccinuri. În ciuda faptului că diferențele antigenice în diferitele tulpini nu au fost stabilite până în prezent, nu se poate exclude existența acestora. De aceea, a devenit necesar să se izoleze o tulpină de E. tenella, care ar putea fi utilizată în aceste scopuri.
Ca tulpina prototip utilizat E. tenella A-1 izolat de la pacienți cu excrementele de pui cu coccidioză de ferme de păsări audio regiunea Leningrad [5]. Tulpina L-1 la o doză de 5000 și peste oocysts asupra capului provoacă infectate puii susceptibili perebolevanie acute cu clinice caracteristice (de tip deprimat, pene incretite, scoici palid și mucoaselor, sete, pierderea poftei de mâncare, excremente sângeroase) și caracteristici-pato anatomice (de la păsări moarte observate puternice umflarea si hemoragica leziuni ale membranei mucoase a proceselor oarbe ale intestinului). La pacienții cu puii de găină se formează imunitatea la re-infectare.
Tabelul 1
Caracteristicile tulpinii L-1 E. tenella
Sensibilitatea la coccidiostatice
Sensibil la amprolium, nikarbazinu, farmkoktsidu, himkoktsidu, klinakoksu, toate antibioticele ionofor
păsări Totuși, L-1 tulpină de E. tenella a ridicat de virulență au fost vaccinați împotriva coccidiozei se bazează pe administrarea de cantități strict dozate ouăcistelor de parazit, deci și posibilele nereguli în vaccinarea poate provoca focare de coccidiozei la găini imunizate.
Obiectul invenției este de a furniza o tulpină de vaccin de E. tenella, un grad redus de virulență, are proprietăți imunogene mari în combinație cu capacitatea de un nivel ridicat de reproducere în corpul puilor.
Sarcina se realizează prin tulpina E-1-23 Eimeria tenella pentru producerea de vaccinuri, diagnostic și cercetare științifică. Tulpina L-1-23 din Eimeria tenella este izolată prin infectarea unui pui susceptibil cu o ovază din tulpina L-1 Eimeria tenella.
Tulpina L-1-23 din Eimeria tenella a fost depusă în colecția Institutului Veterinar de Cercetare Științifico-Rusă al Rosselkhozakademia sub nr. 1.
Caracteristicile tulpinii L-1-23 Eimeria tenella
Poziția sistematică. Tulpina L-1-23 E. tenella aparține genului Eimeria, familia Eimeriidae, ordinul Coccidiida.
Caracteristici morfologice. Are o ovazuri ovale largi de lungime 19,0-26,0 μm, lățime 16,0-22,0 μm (medie 22,6-18,8 μm).
Proprietăți biologice. Perioada de dezvoltare a paraziților este de 130 de ore. Dezvoltarea endogenă a parazitului în intestinele puii invadați este un proces orb.
Proprietăți virulente. După infectarea puilor oochisti 15 zile a, nu este depozitată mai mult de 2 luni, la o doză de 800.000 oochisti per cap este de 50% letalitate (LD50).
Proprietăți imunogene. Infecția puiilor cu oochisturi determină formarea unei imunități specifice (umorale și celulare).
Proprietăți culturale și biochimice. Strainul L-1-23 E. tenella nu este cultivat pe suporturi nutritive. Acesta este menținut prin pasarea pe pui, provocând leziuni caracteristice în intestin după 72-96 de ore cu eliberarea oochisturilor, începând cu cea de-a 130-a oră după infecție.
Tulpina este sensibilă la anticoccidice - amproliu, nikarbazinu, farmkoktsidu, himkoktsidu, klinakoksu, toate antibioticele ionofor.
Specificitatea. Strainul L-1-23 E. tenella este specific doar pentru puii de găină. Parazitul poate trece un ciclu complet de dezvoltare, de asemenea, la embrioni de pui.
Exemplul 1. Utilizarea tulpinii L-1-23 de E. coli pentru producerea unei culturi de coccidii pentru profilaxia imunochemică a coccidiozei de pui.
Pentru imunizarea păsărilor, în doze care nu cauzează boală clinică cu coccidioză, se utilizează tulpini coccidiale selectate special cu virulență slabă și imunogenitate ridicată. Astfel de proprietăți sunt posedate de tulpina L-1-23 a E. tenella. Materialul imunogenic este preparat după cum urmează. Puii de 14 zile, lipsiți de coccidia, sunt infectați oral cu oochisturi din tulpina L-1-23 E. tenella din puiet de matrice într-o doză de 2-3 mii pe cap. În ziua 6-10 după infectare, ovocitele sunt izolate din puiul colectat de la găini prin flotare într-o soluție saturată de sare comuna. Sporalizarea oochistului se efectuează într-o soluție 2% de bicromat de potasiu la o temperatură de 26 ° C, 1000 ° C timp de 3-5 zile. Sporurile oochistelor din tulpina L-1-23 din E. tenella sunt utilizate la fabricarea unei culturi de coccidie pentru vaccinarea puilor.
coccidii Cultura este un amestec omogen de culoare portocalie steril de culoare gri, fără impurități, mucegai, nămol non-separare inofensiv pentru pui. coccidii cultura orala cauzele puilor perebolevanie subclinice urmată de izolarea ouăcistelor în mediu, ceea ce creează posibilitatea gazdei reinvazirovaniya naturale și care formează aceasta imunitate, a cărei intensitate poate fi determinată prin testul ELISA sistem bazat pe A-1-23 tulpina E. tenella.
Exemplul 2. Studiul activității anticoccidiale a preparatelor în condiții experimentale.
În prezent, principala metodă de prevenire a puilor coccidioză este de a utiliza agenți anticoccidiali. Primul pas în studierea eficacitatea (activitatea anticoccidial) medicamente nou sintetizate este de a efectua experimente folosind puii intacte infectate cu tulpini de laborator coccidii cunoscute virulență. La aceste tulpini este tulpina L-1-23 a E. tenella.
Puii intacți sunt infectați oral cu ovocite de tulpina L-1-23 din E. tenella într-o doză de LD50 și imediat încep să fie administrate cu alimente medicamentele studiate. Observările de pasăre sunt efectuate timp de 10 zile. Pentru a evalua activitatea anticoccidiană a consumului de droguri, ratele de mortalitate / supraviețuire și creșterea în greutate, care servesc la determinarea indicelui de anticoccidioză (PKI).
Tabelul 2
Evaluarea comparativă a eficacității diferitelor coccidiostatice atunci când puii sunt infectați cu coccidia de tulpina L-1-23 E. tenella
In acest experiment a stabilit că nikarbazin himkoktsid și posedă activitate anticoccidial exprimată după infectarea puilor coccidii A-1-23 tulpina de E. tenella.
Astfel, tulpina A-1-23 E. tenella imunobiologice are astfel de proprietăți care permit utilizarea acestuia pentru cercetarea experimentală, cât și în scopul de a obține un material imunogenic și antigenic utilizat pentru diagnosticarea și prevenirea bolii specifice.
1. P. L. Long. Studii suplimentare privind patogenitatea și imunogenitatea tulpinii embrionare adaptate la Eimeria tenella. Avian Patology, vol. 3, nr. 4, 1975.
2. T.K. Jeffers. Atenuarea Eimeria tenella prin selecție pentru precocuită. J. Parasitol. vol.61, №6, 1975.
3. J. Johnson, W. M. Reid, T. K. Jeffers. Imunizină practică a găinilor împotriva coccidiozei folosind o tulpină atenuată de Eimeria tenella. Poultry Sciense, vol. 58, No. 1, 1979.
4. T. C. Ivore, P. L. Long, M. Kogut și Joyce Johnson. Atenuarea Eimeria necatrix și E. tenella din S.U.A. origine prin trecerea de embrioni în serie. Avian Boli, vol. 27, nr. 3, 1983.
5. TU 10-07-445-87 „Cultură pentru immunohimioprofilaktiki pui coccidiilor coccidioza“, aprobat de șeful Comitetului veterinar al URSS Stat Agro-Industrial 20.07.1987.
Tulpina L-1-23 Eimeria tenella (o colecție a Institutului Veterinar de Cercetare All-Rusă a Păsărilor de curte, nr. 1) pentru producerea de diagnosticuri și vaccinuri și pentru cercetarea științifică.
Trimiteți-le prietenilor: