Citokinele sunt mici molecule de informații peptidice. Ele reglează celulă-celulă și inter-sistem de interacțiuni, determină supraviețuirea celulară, stimularea sau inhibarea creșterii, diferențierii și activitatea funcțională a apoptozei, și oferă, de asemenea, o acțiune coerența sistemelor imunitar, nervos și endocrin în condiții normale și ca răspuns la efectele patologice.
Citokina este eliberată la suprafața celulei A și interacționează cu receptorul celulei adiacente B. Astfel, de la celula A la celula B, se transmite un semnal care declanșează reacții suplimentare în celula B. Citokinele sunt active în concentrații foarte scăzute. Efectul lor biologic asupra celulelor se realizează prin interacțiunea cu un receptor specific situat pe membrana celulară citoplasmatică. Formarea și secreția citokinelor au loc pe scurt și sunt strict reglementate. Toate citokinele, și acum mai mult de 30 dintre acestea sunt cunoscute, sunt împărțite în mai multe grupuri independente, în funcție de trăsăturile lor structurale și de acțiunea biologică. Gruparea citokinelor prin mecanismul de acțiune ne permite să divizăm citokinele în următoarele grupuri:
proinflamator, asigurând mobilizarea unui răspuns inflamator (interleukine 1,2,6,8, TNF # 945; interferon # 947;);
antiinflamator, limitând dezvoltarea inflamației (interleukine 4,10, TGF # 946;);
regulatori ai imunității celulare și umorale - (naturale sau specifice), care posedă propriile funcții efectoare (antivirale, citotoxice).
Spectrul activităților biologice ale citokinelor se suprapune până la un nivel semnificativ: același proces poate fi stimulat în celulă prin mai multe citokine. În multe cazuri se observă sinergismul în acțiunile citokinelor. Citokinele sunt factori specifici antigenului. Prin urmare, diagnosticarea specifică a bolilor infecțioase, autoimune și alergice prin determinarea nivelului citokinelor este imposibilă. Dar determinarea concentrației lor în sânge oferă informații despre activitatea funcțională a diferitelor tipuri de celule imunocompetente; despre severitatea procesului inflamator, trecerea acestuia la nivelul sistemic și prognosticul bolii.
Citokinele reglementează activitatea hormonală a axului hipotalamo-hipofizo-suprarenalian: [1] de exemplu, interleukina-1 acționând asupra hipotalamusului, CRH îmbunătățește sinteza, care, la rândul său, crește producția de ACTH.
Metode de diagnostic imunologic al bolilor infecțioase (de fapt imune, serologice, alergice), scopul acestora, interpretarea rezultatelor.
Metoda serologică. Studiile serologice se bazează pe fenomenul fiziologichekom - formarea în organism, anticorpi serici ca răspuns la intrarea în corpul unei proteine străine (antigen) - bacterii, virusuri, țesuturi ale corpului modificate. Studiile serologice sunt utilizate în practică în diagnosticul bolilor bacteriene, infecțiilor virale, bolilor cauzate de tulburări ale sistemului imunitar al organismului, inclusiv infecțiile cu transmitere sexuală.
De fapt, metoda imună.
1. Determinarea nivelului de proteină C-reactivă. Proteina C reactivă este o proteină inflamatorie acută legată de beta-globuline. Proteina C-reactivă, ca și alte proteine din faza acută a inflamației, apare în ser la scurt timp după deteriorarea țesutului și debutul inflamației. Enhancement proteinei C reactive observate în infecțiile acute bacteriene și virale, infarct miocardic, tumori maligne și boli autoimune (vezi. Ch. 15, p. II.b).
2. Determinarea titrului de aglutinine reci. Aglutininele reci sunt IgM, care determină aglutinarea maximă a eritrocitelor la 4 ° C. aglutininelor la rece apar în unele boli, cum ar fi pneumonia cu mycoplasma, uneori cu gripă, infecția cu adenovirus și alte boli respiratorii acute, precum și boala somnului. Diagnostic semnificativ este detectarea aglutininelor reci cu un titru de 1:32 sau o creștere de 4 ori a titrului lor în decurs de 7-14 zile.
3. Determinarea titrului de anticorpi aglutinanți. Anticorpii aglutinare la agentul patogen apar în ser în multe boli infecțioase: salmonella, paratifoidă, bruceloza, tularemie, tifos, și altele. Titrul acestor anticorpi poate fi determinat în reacția de aglutinare a bacteriilor inactive atunci când se adaugă diluții serice diferite. Serul de cercetare este de obicei colectat de două ori: în timpul vârfului și în timpul recuperării (după 10-21 zile). O creștere de patru ori a titrului de anticorpi este considerată a fi diagnosticantă.
4. Reacția lui Neufeld este umflarea peretelui celular bacterian sub acțiunea anticorpilor la polizaharide capsulare specifice tipului vizibile sub microscopie luminoasă. Această reacție poate fi observată prin adăugarea de anticorpi direcționați împotriva polizaharidelor peretelui celular de Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae și Neisseria meningitidis (serotipurile A și C), aceste bacterii. Reacția lui Neufeld este utilizată pentru a studia serul și CSF.
5. Reacția cu lizat Amebocite de crab potcoavă (Limulus polyphemus) este utilizat pentru diagnosticul infecțiilor, în special sepsis si meningita cauzate de bacterii Gram-negative. Metoda se bazează pe faptul că atunci când se adaugă endotoxine bacteriene, lizatul lichid al amoebocitelor sabiei se va transforma în gel.
23. Reacții imunologice în diagnosticul bolilor infecțioase. Reacția de aglutinare, variantele sale, mecanismul. Reacții de încărcare imună (RNGA). Aglutinarea serurilor, diagnosticul, principiul activ al acestora, mecanismul de acțiune, domeniul de aplicare.
Metodele bazate pe reacția de aglutinare sunt destul de sensibile și sunt utilizate pentru a identifica antigene pe suprafața celulelor sau a particulelor și determinarea semicantitativă a anticorpilor față de acești antigeni. Esența metodelor este după cum urmează: atunci când se leagă celule sau particule acoperite cu antigen, se formează agregate mari cu anticorpi. Pentru a determina titrul anticorpilor la antigene de suprafață celulară sau antigeni adsorbiți pe suprafața particulelor, preamesfecafe cantități cunoscute de celule sau particule acoperite cu un antigen cu diferite diluții ale probei de testare, cum ar fi ser.
1. Reacția de aglutinare directă este utilizată pentru a detecta antigenii de suprafață ai microbilor sau celulelor sanguine și anticorpii acestor antigeni. Metoda este următoarea: diluții seriale ale probei de testat (de exemplu, ser) au fost amestecate cu celule pentru titrul de anticorpi luând reciproca celei mai mari diluții de ser care provoaca aglutinare. Această metodă este mai sensibilă decât metodele bazate pe precipitare, deoarece, cu o concentrație egală a antigenului, volumul de aglutinat este mai mare decât volumul precipitatului. Reacția de aglutinare este independentă de temperatură, cu excepția cazului în care se datorează aglutininelor la rece care sunt mai eficiente la temperaturi sub 37 ° C.
2. Reacția de aglutinare indirectă se bazează pe aglutinarea eritrocitelor, a altor celule sau particule (de exemplu, latex sau bentonită) acoperite cu antigen. Pentru a determina titrul de anticorpi, diluțiile seriale ale serului în ser fiziologic sunt amestecate cu o cantitate cunoscută de celule sau particule acoperite cu antigen. Reacția indirectă de aglutinare este o metodă sensibilă care permite determinarea antigenelor solubile la concentrații scăzute.
Seruri aglutinante, seruri de animale diferite, capabile să provoace reacții de aglutinare.
24. Reacția precipitațiilor, variantele, mecanismul, domeniul de aplicare. Seruri precipitate, prepararea și titrarea lor.
Reacția de precipitare este precipitarea unui antigen solubil fin dispersat prin acțiunea anticorpilor în prezența unui electrolit. Reacția este foarte mare
sensibil la antigen, permite detectarea și identificarea literalmente a urgențelor antigenului. Variante de formulare: reacția de precipitare în inel, reacția de precipitare în gel (agar). Modificări ale RP: imunoelectroforeza, imunodifuzia radială în conformitate cu Mancini, imunoblotting. Reacția de precipitare este utilizată pentru a indica și identifica antigenul în materialul de testare. RP a devenit larg răspândită în examinarea medico-legală, este utilizat pentru a determina apartenența petelor fluide biologice la speciile aparținând proteinei. RP în agar este utilizat pentru a determina toxigenitatea culturilor de microorganisme (în diagnosticul toxicoterapiei difterice, stafilococice). Metoda de imunodifuzie radială în Mancini este utilizată pentru a determina diferite clase de imunoglobuline în serul de sânge. Imunoelectroforeza este utilizată pentru determinarea fracțiilor de proteine din serul de sânge. Serurile precipitate se obțin prin imunizarea iepurilor cu antigeni bacterieni, extractele și toxinele acestora. Titrul serului de precipitare este diluția maximă a antigenului la care are loc reacția de precipitare. Serurile precipitate sunt produse cu un titru ridicat - nu mai puțin de 1: 100.000. Aceasta se datorează faptului că antigenul determinat în reacția de precipitare are o structură fin dispersată și poate conține mai mult în unitatea din volumul său decât în același volum de anticorpi serici.
Serurile specifice de precipitare sunt utilizate în diagnosticul bolilor infecțioase (antrax, ciumă, tularemie, difterie și
etc), în examinarea medico-legală pentru a determina identitatea speciilor de proteine, în practica sanitară pentru a detecta conformitatea substanțelor proteice în produse (dacă sunt suspectate de falsificare).
25. Reacția lizării imune (bacterioliza, hemoliza). Componente ale reacției \ d, aplicație practică.
AT specifice, care cauzează liza (dizolvarea) celulelor, se numesc lizine. Acești anticorpi sunt aplicați la bacteriile numite bacteriolizine, la eritrocite - hemolizine.
Lizinele își pot arăta efectul de liză asupra hipertensiunii numai în prezența complementului, care face parte integrantă din orice zer proaspăt.
Astfel, reacția de lizare se bazează pe interacțiunea a trei componente:
1) hipertensiune corporală (celule bacteriene, eritrocite și alte celule);
2) ser imunitar specific AT (bacteriolizine, hemolizine etc.);
3) complement (ser de cobai).
La început, reacția se desfășoară în funcție de tipul de aglutinare, apoi se adaugă complementul la complexul AG-AT. Se apropie activarea componentelor complementului, care duce la liza celulelor (AH).
În diagnosticul microbiologic, reacția de bacterioliză este utilizată pentru:
1) determinarea tipului de microb necunoscut cu ajutorul unui ser specific;
2) determinarea prezenței bacteriolizinelor în serul de test pentru un microb cunoscut.
Serul de test, pentru distrugerea complementului prezent în acesta, este inactivat la 56 ° C timp de 30 de minute.
Sub influența bacteriolizinelor în prezența microbilor complementului, se pierde mobilitatea, se schimbă forma (se umflă), se dezintegrează și, în final, se dizolvă complet.
reacția bactericidin utilizată pentru identificarea și determinarea vibrios holera vibriolizinov seric (p imobilizare Vibrio holera seruri.); (Treponemes p imobilizare.) Sifilis cu leptospiroza (p-aglutinare liză.); cu tifoid recurent în scopul serodiagnosticului (liza).
Reacția de hemoliză. Sub influența reacției cu AT-mi în prezența complementului, suspensia turbidă a eritrocitelor se transformă într-un lichid transparent transparent - "sânge de lac" datorită eliberării de hemoglobină. Reacția de hemoliză este utilizată ca indicator pentru diagnosticul fixării complementului (RCC), pentru titrarea complementului și a serului hemolitic.
Trimiteți-le prietenilor: