Umplerea țesăturilor pentru cercetare. Blocuri de droguri
Pentru a facilita tăierea, țesăturile sunt de obicei turnate într-un mediu solid. Pentru a obține secțiuni subțiri cu ajutorul unui microtom, țesuturile după fixare trebuie impregnate cu agenți de turnare, ceea ce le conferă o consistență fermă. Rășinile parafină și plastic sunt utilizate ca materiale de turnare. Parafina este folosită în mod obișnuit pentru microscopie ușoară, rășină - atât pentru microscopie cât și pentru lumină.
Procesul de turnare în parafină. sau impregnarea țesuturilor, două etape principale precedă de obicei: deshidratarea (deshidratare) și albirea. Înainte de turnarea bucăților, apa este îndepărtată, mai întâi prin plasarea lor secvențială într-o serie de etape de amestec de alcool etilic (etanol) și apă (de obicei de la 70% la 100% alcool etilic).
Etanolul este apoi înlocuit cu un solvent. care este capabilă să se amestece cu mediul de turnare. Când se toarnă în parafină, xilenul este de obicei folosit ca solvent. Deoarece țesuturile sunt impregnate cu un solvent, ele devin de obicei transparente (iluminare). După impregnarea unei bucăți de țesut cu un solvent, acesta este plasat într-un termostat în parafina topită, de obicei la o temperatură de 58-60 ° C.
Sub influența căldurii, solventul se evaporă și spațiile din țesuturi sunt înlocuite cu parafină. După îndepărtarea de la termostat, țesătura, împreună cu parafina care o impregnează, se întărește. Țesăturile turnate în rășina plastică sunt, de asemenea, deshidratate în etanol și, în funcție de tipul de rășină, sunt în continuare impregnate cu solvenți din plastic. Etanolul sau solvenții sunt înlocuiți ulterior cu soluții din materiale plastice care se solidifică cu polimerizatori reticulați.
Turnarea într-o masă din plastic previne comprimarea, ceea ce determină temperaturi ridicate necesare pentru turnarea în parafină și oferă rezultate semnificativ mai bune.
Blocuri solide. care conțin țesuturi. sunt amestecate într-un microtom; Ca urmare a tăierii unei mașini de ras microtoom din oțel sau de sticlă, se obțin tăieturi de grosime de 1-10 microni. Trebuie reținut faptul că 1 micrometru (1 micron) = 0,001 mm = 10-6 m; 1 nanometru (1 nm) = 0,001 μm = 10-6 mm = 10-9 m. Secțiunile sunt apoi plasate în apă și transferate în diapozitive pentru colorare.
Este posibil să se utilizeze o metodă complet diferită de preparare a secțiunilor histologice prin înghețarea rapidă a țesuturilor. În acest caz, țesuturile sunt fixate prin înghețare (fizic, nu chimic) și, în același timp, devin greu și, prin urmare, pot fi tăiate. Microtome de congelare - criostat (greacă cryos - rece + statos - instalare) - conceput pentru tăierea țesăturilor congelate.
Deoarece această metodă permite pregătirea rapidă a secțiunilor colorate (în câteva minute), este de obicei folosită în spitale pentru a examina probele de țesut în timpul operațiilor chirurgicale. Țesuturile de înghețare dau, de asemenea, un efect bun atunci când efectuează studii histochimice ale enzimelor foarte sensibile sau ale moleculelor mici, deoarece înghețarea nu inactivează majoritatea enzimelor.
Datorită faptului că țesuturile de prelucrare cu solvenți cum ar fi xilenul dizolvă lipidele tisulare, se recomandă utilizarea de secțiuni înghețate atunci când este necesar să se studieze acești compuși.
Recomandată de vizitatorii noștri:
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: