Amidonul cu soluția de Lugol dă o colorare albastră (reacție cu iod). Când fierberea amidonului în prezența acidului clorhidric este hidroliza acestuia secvențială, după cum sa menționat prin reacția cu iod.
Pregătiți un trepied cu un număr de tuburi (5-8 bucăți). tub Vpervuju introduce soluție de amidon 2-3 ml, se adaugă 1 picătură de soluție Lugol, o culoare albastră.
În vas, se toarnă 20 ml de soluție de amidon, se adaugă 16-18 picături de HCI concentrat și se pune o sobă electrică (lampă de alcool) pentru încălzire. După începerea fierbei, cu ușurință, fără a se opri fierberea amestecului, se ia 1 ml de soluție din balon în fiecare minut din balon și se aduce constant în eprubete cu apă, adăugând o picătură de soluție Lugol. Observați schimbarea culorii soluțiilor în tuburile de testare. Culorile violete indică prezența amilodextrinelor, roșu-maro-eritrodextrine, galben-achrodextrine și maltoză. Când apare galben în eprubeta, opriți fierberea. Cu o soluție în ultimul tub de testare, efectuați o reacție Trommer. Pe baza rezultatelor obținute se face o concluzie.
Hidroliza acidă a celulozei.
Fibra este o polizaharidă, dar spre deosebire de amidonul cu nuanță de albastru de iod, nu se datorează structurii sale.
În organele digestive din animalele rumegătoare și monogastrice, fibra este împărțită în acizi grași volatili de către microorganismele rumenului și înfundarea proceselor intestinale.
Într-un tub de testare, se adaugă o bucată de vată de bumbac și o soluție de acid sulfuric într-un raport de 3: 1. După dizolvarea completă a vatei de bumbac (după 15-20 minute), amestecul este transferat într-un balon și lăsat să fiarbă. Periodic (la intervale de 5 minute) pentru a dobândi o probă în 1-2 ml tub, se neutralizează cu soluție NaOH 40% la reacție alcalină exprimată (control prin hârtie de turnesol) și adăugarea de 1-2 picături de CUSO4 (soluție 1%) încălzit. Apariția de colorare galben-roșu sau roșu-portocalie indică încetarea hidrolizei. Pe baza rezultatelor obținute se face o concluzie.
- Caracteristicile reacțiilor enzimatice.
- Mecanism de acțiune al enzimelor.
- Aplicarea în practică a preparatelor enzimatice.
Lucrare de laborator nr. 2.
"Reacții calitative la dehidrogenaze"
1.1 Obiectiv: studierea efectului laptelui și a dehidrogenazelor musculare.
1.2 Reactivi: lapte sau kefir, măduvă musculară (0,5 g muschi frecați într-un mortar cu 3 până la 4 ml soluție salină); 0,4% soluție de formaldehidă, albastru de metilen, acid succinic (3% neutralizat prin sodă caustică până la o reacție ușor alcalină la litmus).
2.3 echipamente - stativ cu eprubete, baie de apă, termometru, lampă electrică sau alcool.
Experimentul 1 - acțiunea aldehidei oxidase (xantin oxidaza) a laptelui.
Laptele conține o enzimă care accelerează dehidrogenarea diferitelor aldehide (formaldehidă, acetaldehidă etc.). Dacă reacția de dehidrogenare are loc în prezența oxigenului gazos, atunci hidrogenul este transferat în oxigen pentru a forma peroxid de hidrogen. În prezența albastrului de metilen, servește ca acceptor, pe care aldehidă oxidază transferă hidrogen din substratul oxidat.
Se toarnă în două tuburi de 4-5 ml lapte sau chefir, conținutul unui tub se fierbe și se răcește. Se adaugă 8-10 picături de soluție de formaldehidă în fiecare eprubetă și 1 până la 2 picături de albastru de metilen, se amestecă și se pune într-o baie de apă la 37 - 40 ° C. După un timp, există o decolorare a albastrului de metilen într-un tub de testare și nu are loc decolorare în celălalt (fiert).
Înregistrați rezultatele experimentului și concluziile din Tabelul 2.
Experiența 2 - observarea acțiunii mușchiului de succinat dehidrogenază.
Succinat dehidrogenaza oxidează acidul succinic (succinat) în acid fumaric (fumarat). În prezența albastrului de metilen, acesta din urmă este redus la un compus leuco incolor.
În două eprubete, se adaugă 3 până la 4 ml. mușchiul mușchi, iar în unul dintre ele se adaugă 6-8 picături de soluție de acid succinic neutralizat. Apoi adăugați 2 picături de soluție de albastru de metilen la ambele tuburi de test, agitați-le și puneți-le într-o baie cu o temperatură de 37-40 ° C. După o perioadă de timp există o decolorare a albastrului de metilen într-o eprubetă cu acid succinic. În cel de-al doilea tub de testare, culoarea rămâne. Scrieți o schemă de experiență, explicați rezultatele și trageți concluzii. Datele trebuie introduse în tabelul 2.
Tabelul 2. Rezultatele acțiunii dehidrogenazelor.
Trimiteți-le prietenilor: