Fixarea frotiurilor citologice

Frotiuri uscate • Pregătirea frotiului • Uscarea frotiului la temperatura camerei (1 oră) • Fixarea în acetonă (10 min.)

Straturi umede • Pregătirea frotiului • Fixarea în etanol (10-15 min.) Uscarea la aer







• Metoda de prelucrare a țesuturilor pentru fixarea structurii intravitale

• Realizat prin expunerea materialului la soluții speciale (fixative)

• Cantitatea de fixativ trebuie să fie de 20-30 de ori mai mare decât volumul unei bucăți de material care trebuie fixat

• Fixativ simplu: soluție de formalină 10-20%, alcool 96%, alcool 100 (absolut), soluție 1-2% de acid osmiic etc.

• zăvoare complexe: alcool - formol (alcool 70º - 100 ml de formol și 2-5 ml.) Fluid (sublimat coroziv Zenker - 5 g sulfat de sodiu - 1 g potasiu dvuhromovokioly - 2,5 g apă distilată - 100 ml.. acid acetic glacial 5 ml), etc.

• Durata fixării - de la mai multe ore până la o zi sau mai mult, în funcție de proprietățile fixatorului și de natura materialului examinat.

Reguli generale pentru fixarea materialului

• Materialul este fixat direct și imediat după luare.

• Pentru a fixa materialul, folosiți sticlă sau faianță (evitați metalul).

• Volumul lichidului de fixare trebuie să fie de 20-30 ori mai mare decât volumul materialului care trebuie fixat.

• Fluidul de fixare se schimbă până devine transparent (este necesar să scapi de impuritățile de sânge).

• Materialul este fabricat dintr-o etichetă de hârtie groasă, cu un creion de grafit sau cu cerneală.

• Blocarea se face fără acces la lumină.

• Creșterea temperaturii accelerează fixarea. Temperatura optimă de fixare este de 37 ° C.

• Metoda cea mai comună de fixare standard este formalinul. Formalinul este o soluție apoasă 40% de gaz formaldehidic (HCOOH).

Fixarea în formalină

1. Difuzia formalinică în probă (aproximativ 1 mm / h)

2. Fixarea chimică Componenta chimică a fixării în formalină

Fixarea frotiurilor citologice






Metoda de fixare de urgență:

• o bucată de material cu o grosime mai mică de 0,5 cm este plasată într-un tub cu formalină de apă 20%

• se încălzește timp de 3-5 minute, înainte de apariția bulelor (nu se fierbe)

Formația de formalin nu atinge obiectivul studiului:

• structuri citologice subțiri • substanțe solubile în apă (glicogen, acid uric) • Avantajele fixării formalinei • Simplitatea și ieftinitatea. • Siguranța bună a structurilor.

• Lipsa de fixare în formalină • Incapacitatea de a detecta substanțele solubile în apă (glicogen, acid uric). • Depistarea slabă a structurilor citologice (chondriomii, aparatele Golgi etc.).

• Pentru a detecta substanțele solubile în apă, se utilizează fixative anhidre (alcool absolut, alcool 96%).

Reguli de luare a probelor din organele și țesuturile fixe. De la un obiect fix (țesut, organ sau fragment de organ) tăiați cu atenție un fragment din locul dorit cu o grosime de aproximativ 3 mm, o suprafață de aproximativ 0,5-2,5 cm2

Spleen-Tăiați un fragment de aproximativ 3 mm grosime de la partea centrală în planul frontal

Intestin - Din fiecare parte a intestinului, tăiați fragmente de aproximativ 3 mm grosime în planul frontal

-din un rinichi fragment de rinichi tăiat de aproximativ 3 mm grosime prin întregul corp al părții de mijloc în planul sagital din fragmentul de rinichi al doilea tăiat de la 2 mm grosime porțiune de mijloc care cuprinde poarta de rinichi în plan frontal.

Ficat - Se taie fragmente de 3 mm grosime din partea centrală a lobilor laterali stângi, laterali stângi, în planul frontal

Inima - Se taie un fragment de 2-3 mm grosime din partea centrală a organului, incluzând arcul aortic din planul frontal.

Plămânii - Se taie fragmente de aproximativ 3 mm grosime din mijlocul lobilor cranieni și caudali drept și din partea centrală a lobului stâng.

• Deshidratarea țesăturii se face treptat (astfel încât să nu existe o încrețire), transportând-o prin spiritele cu rezistență crescătoare: 50º, 60º, 70º, 80º, 90º, 96º, 100º. În fiecare alcool, piesele sunt de la câteva ore până la o zi, în funcție de dimensiunea piesei.

Fixarea frotiurilor citologice

• Fixarea în formalină tamponată (aproximativ 24 ore)

• Spălarea cu apă de la robinet (3 ore).

•% etanol 50 (1 h). • 70% etanol (2 h.) • 80% etanol (1 h). • 96% etanol (două schimburi de 30 min.) • etanol 96% (lăsați peste noapte)

• Alcool absolut (2 schimburi de 30 de minute) • Etanol absolut: xilen (1: 1, 20 min.)

• Xilen (trei treceri de 20 de minute) - 3 schimburi la t = 56 # 8304; C • Amestec de xilen: parafină 1: 1 (20-25 minute la o temperatură de 56 # 8304; C)

• Parafina 1 la o temperatură de 56 ° C # 8304; C (1h) • Parafina 2 la o temperatură de 56 ° C # 8304; Cu (1 oră) • Ceară 3 pentru a se răci

Stații de turnare • Stații de alimentare modulare • Stații de cabluri și de umplere







Articole similare

Trimiteți-le prietenilor: