Microscopie într-un câmp întunecat de vedere. câmp întunecat bacterioscopia de vedere al metodei de bază de investigare a leziunilor cutanate, cum ar fi sancrul de sifilis primar sau condyloma sifilis secundar. Atunci când microscopie cu câmp întunecat materiale centre maculopapulare uscate de sifilis secundar pentru a detecta agentului patogen nu este întotdeauna posibil, deci cel mai bine este de a expune studiul aspirate ganglionilor limfatici. Suprafata ce urmeaza a fi examinate ulcerative vatra purificată tampon de bumbac-tifon, apoi masat ușor cu un tampon de tifon steril, astfel încât să nu provoace sângerare. Apoi, leziunea este ușor stoarsă pentru a provoca eliberarea transudatului seros, o picătură de care este plasată pe un diapozitiv. Dacă transudat necesar este amestecat cu un volum egal de soluție izotonică (fără adaos de agenți bacteriostatici), se acoperă cu un capac de sticlă și imediat examinat în câmpul întunecat vizual sau sub un microscop cu contrast de fază pentru prezența agentului patogen. Cercetarea trebuie efectuată de un lucrător experimentat. Un singur rezultat negativ nu exclude prezența sifilis, deoarece treponemes de detectare în 1 ml transudat trebuie să conțină cel puțin 10 organisme microbiene din aprilie și un rezultat negativ se poate datora aplicării locale anterioare a camerei antiseptic sau curățare produse de pacient subiect. În acest sens, este necesar să se evite curățarea leziunii sau de actualitate medicamente, precum și de cercetare în domeniul întunecat de vedere trebuie repetată timp de trei zile consecutive, înainte de a fi luate în considerare rezultatele negative.
Imunofluorescență directă. Cele mai multe cazuri de sifilis sunt diagnosticate în medicii privați de plasament, dar dintr-un motiv sau altul nu folosesc studiu în întuneric de Nola, iar acest lucru a necesitat dezvoltarea unor metode alternative de identificare a treponemes în exudat.
Așa cum este utilizat în laboratoare centrale de testare anticorpi imunofluorescență directă (DFA-TR), se bazează pe utilizarea anticorpilor policlonali fluoresceină conjugat pentru a detecta T. pallidum în frotiuri fixe preparate din mageriala obținute de la leziuni suspecte de sifilis. Prezența anticorpilor reacție încrucișată cu spirochete nepatogene sanrofitiruyuschimn și colorarea le provoacă antiser de absorbție minuțioasă folosind agentul cauzal adevărat, în scopul de a obține un reactiv specific.
A fost dezvoltată o tehnică îmbunătățită pentru reacția imunofluorescenței directe, în care sunt utilizați anticorpi monoclonali specifici numai pentru spirochetele patogene. În studiile clinice ale acestei tehnici sa demonstrat că este, de asemenea, sensibilă și specifică, precum și un studiu într-un câmp întunecat.
Identificarea T. Ra ilidum în țesuturi. În prezența semnelor clinice sau histologice sugestive pentru diagnosticul de sifilis, pentru a confirma că este adesea necesar să se identifice T. pallidum in tesut. Deși microorganismul poate fi detectat relativ ușor prin metoda de argintare, rezultatele trebuie evaluate cu prudență. Pentru a descoperi adesea artefacte. Mai fiabilă este detectarea treponemiei în țesuturile care utilizează anticorpi monoclonali sau policlonali pentru treponemul palid.
Diagnosticul serologic al sifilisului. Varietatea reacțiilor serologice pentru diagnosticarea sifilisului conduce la dificultăți inutile. infecție sifilitică determină formarea a două tipuri de anticorpi, anticorpi reaginic nespecifice și anticorpi specifici anti-treponemice, care sunt determinate prin teste care vizează identificarea componentelor n treponemale respectiv netrenonemnyh (Tabel. 122-1). Atât aceste, cât și celelalte teste sunt folosite la persoanele cu orice infecție provocată de treponema, indiferent dacă este vorba de șuierătoare, pingi sau sifilis endemic.
Anticorpii non-treponemice produse în sifilis conțin IgG- și IgM-imunoglobuline împotriva antigenului lipidelor formate prin reacția T. pallidum cu țesuturile microorganismului și probabil împotriva antigenului lipidelor însăși T. pallidum. Termenul de reactiv este nereusit, deoarece anticorpii non-IgE implicați în unele fenomene alergice sunt, de asemenea, cunoscuți ca reactivi.
Cele mai utilizate teste de laborator pentru a identifica non-treponemal sau anticorpii reaginic sunt accelerate plasmă test de detectare a reagin (RPR), care pot fi automatizate (ART), si VDRL-test pe sticla (denumit dar laborator titlu Venereal Disease Research Laboratory, sugereaza el a dezvoltat un antigen special-prim). Alte mai puțin frecvente teste non-treponemice detecta anticorpii la definițiile de testare sunt reagin neîncălzită ser (USR) și cele Art Skr Yining reagin (RST). In aceste teste, sunt detectate anticorpii pe baza microscopice (VDRL, USR) sau macroscopică (RPR, RST) suspensii antigen floculare (vezi. Tabelul. 122-1)
Testul RPR este mai scump decât testul VDRL, dar este mai ușor de realizat și nu necesită încălzirea serului. Este o metodă de alegere atunci când este necesară diagnosticarea urgentă în mediile clinice sau în ambulatoriu. Reactivii pentru testul VDRL sunt mult mai puțin costisitori, dar trebuie pregătiți zilnic. Deși înlocuire întrebări VDRL-test sunt concepute metode macroscopice mai simple, cum ar fi ser RPR-studiu utilizat în multe laboratoare, VDRL-test ramane standard pentru studiul lichidului cefalorahidian.
Testele RPR și VDRL sunt la fel de sensibile și pot fi utilizate pentru screening-ul inițial sau determinarea cantitativă a serului anticorpului reactiv. Reaginic titrul de anticorpi reflectă activitatea procesului: sifilisul primar nrogressirovanii se poate observa o de patru ori sau mai mare creștere a titrului de anticorpi reaginic; titrurile determinate de VDRL sunt în general de 1:32 și mai mari cu sifilis secundar; Declinul persistent în titru după tratamentul sifilisului timpuriu este o dovadă importantă a eficacității terapiei. Titrurile stabilite prin RPR nu se corelează complet cu titrurile VDRL și cu cuantificarea ulterioară a titrurilor (pentru a evalua eficacitatea tratamentului), trebuie utilizat un test.
Pentru detectarea anticorpilor specifici împotriva treponemes există trei metode standard: răspunsul anticorpilor fluorescenți la absorbția treponemes (FTA-ABS), reacția mikrogemagglyutinatsii pentru detectarea anticorpilor la T. pallidum (MHA-TP) n reacția gemagglyutnnatsii treponemes sifilis (HATTS). Ultimul test de hemagglutinational este utilizat pe scară largă în Canada și în Europa, dar nu a răspândit în Statele Unite.
Pentru stabilirea ser reacția FTA-ABS pacientului pre-diluat cu o substanță care conține o antigeni spirochete non-patogene (adsorbant), în scopul de a lega gruparea anticorp care poate fi format în organism ca răspuns la vegetirovanie spirochete în acestea, orale sau genitale - saprofite. Apoi, serul pacientului absorbit este plasat pe sticla, care este fixat T. pallidum. Dacă serul pacientului conține anticorpi specifici pentru sifilis, ei se leaga de spirochetes fixe uscate și apoi detectată prin adăugarea de fluoresceină marcat gama globulina anti-uman și de droguri studiu ulterior prin microscopie fluorescentă. Reacțiile de hemaglutinare T. pallidum (MHA-TP Natta și TPHA), sunt de asemenea utilizate pentru diluare sorbentopodobnye legarea anticorpilor la spirochete grup. Anticorpii specifici pentru sifilis sunt detectate prin aglutinarea acoperite cu eritrocite pallidum ovine sau curcan T.. Testul de laborator cel mai specific este de a testa imobilizarea agentului, în care T. pallidum imobilizarea vie prin utilizarea ser imun și se completează. Cu toate acestea, această reacție este foarte laborioasă și, prin urmare, în SUA este utilizată numai în laboratoarele de cercetare. Atât reacția - hemaglutinare și FTA-ABS - un foarte specific, iar în cazul aplicării lor pentru confirmarea rezultatelor pozitive ale testului reaginic foarte eficiente în diagnosticul de sifilis. Cu toate acestea, chiar și aceste reacții pot produce la 1 la 2% în greutate rezultate lozhnopolozhitslnyh când screening-anchete asupra populației.
Reacțiile sensibilității relative VDRL, FTA-ABS și fluxul MHA-TP în diferite stadii de infecție sifilis se reflectă în tabel. 122-2. Testele non-treponemice dovedesc ineficiente în aproximativ 30% dintre pacienții cu sifilis primar sau tardive. In stadiile incipiente ale sifilis primar de detecție maximă anticorp poate fi obținută fie prin aplicarea testului FTA-ABS, sau pur și simplu repetarea reacției VRDL la fiecare 1--2 saptamani sau setarea primar acest rezultat de reacție au fost negative. Cu toate acestea, rezultatele unui test cu întârziere sifilis simptomatice suspectate insuficiente reaginic, în acest caz, pentru a utiliza un mai sensibil FTA-ABS-test. În sifilis primar reacții de hemaglutinare sunt chiar mai puțin sensibile decât testele reaginic, dar ele sunt la fel de sensibile ca ALS-ABS în alte etape ale bolii. Când toate sifilis netreponemnye n teste treponemice secundare suficient de sensibile și rezultatul lor negativ să excludă diagnosticul de sifilis la un pacient cu prezența leziunilor suspecte pe piele și membranele mucoase (vă rugăm să rețineți că 1-2% dintre pacienții cu sifilis secundar nu reacționează sau reacționează slab la VDRL reacție cu ser nediluat, la diluții mai mari se poate obține un fenomen proagglyutinatsionnoy-zone pozitiv - prozonă).
Reacții serologice serioase pozitive la sifilis. Deoarece antigenul utilizat în reacțiile non-treponemale se găsește în alte țesuturi, testele pot produce rezultate pozitive la persoanele care nu au infecție treponemală, deși titrul în acest caz rar depășește 1: 8. Sa constatat că printre cei care au reacționat pozitiv la testele reactive, de la 20 la 40% dau reacții false, dar asta
Tabelul 122-1 Diagnosticul serologic al sifilisului
Reacții non-treponemale (reactive)
Microfocalizarea microscopică: Laboratorul de cercetare al bolilor transmise sexual (VDRL) Floculare macroscopică: Reactivul seric rapid (RPR)
Imunofluorescență: absorbția fluorescentă a anticorpilor la treponem
(FTA-ABS) Hemaglutinarea: determinarea hemaglutinării T. pallidum (MHA-TP,
HATTS, TRNA) Imobilizarea: imobilizarea lui T. pallidum (TPI)
Tabelul 122-2. Eficacitatea reacțiilor serologice de diagnostic la sifilisul netratat
centul variază în funcție de componența populației studiate. În rândul populației selectate pentru screening-ul datorită prezenței simptomelor de sifilis similare, antecedente de expunere indică infecție sau care prezintă un risc crescut de infecție, procentul de rezultate fals pozitive este semnificativ mai mic. reacții fals pozitive Reaginic sunt clasificate ca acută în cazul în care acestea devin negativ în termen de 6 luni. Reacțiile fals pozitive reaginic acute sunt observate într-un număr de boli, cum ar fi infecții virale, pneumonie mycoplasma și malaria, precum și prin imunizarea împotriva unor infecții. , reacțiile cronice persistă timp de 6 luni sau mai mult, observate la abuzul de droguri, boli autoimune, precum și la vârstnici. Reacțiile fals pozitive au fost raportate la 25% dintre persoanele dependente de droguri, iar in 10-20% dintre pacienții cu lupus eritematos sistemic activ. In 15-45% dintre persoanele cu reactii fals pozitive cronice, ei trebuie să fie de natură autoimună, cauzată de prezența la pacienții cu lupus eritematos sistemic sau alte boli ale țesutului conjunctiv. Dintre anticorpii cu o frecvență ridicată a indivizilor serice detectabile cu reacții fals pozitive, sunt anti-nucleare, anticorpii mitocondriali si antitiroidieni si factorul reumatoid si crioglobulinele. Anticorpii Donat-Landsteiner sunt responsabili pentru gemoglobulinuria paroxistice Kholodov, se referă la hemolizinei detectabil în sifilis. Ca vârstă crește frecvența reacțiilor fals pozitive crește și la pacienți cu vârsta peste 70 de ani 10% randament reacții fals pozitive la reagin sifilis. Alte boli asociate cu hiperglobulinemie, în special lepra, poate provoca reacții fals pozitive cronice.
La pacienții cu diagnostic fals-pozitiv al reacțiilor de sifilis reaginic este eliminat prin rezultate negative ale testelor treponemice specifice. Rezultate FTA-ABS-test sunt, de obicei negativ, echivoce sau pozitiv. Rezultatele indoielnice (limită) sunt observate mai ales la femeile gravide sau la pacienții care suferă de boli care sunt caracterizate prin nivele anormale sau crescute de globuline, care nu este de obicei asociată cu dovezi serologice clinice, anamnestic sau alt sifilis. În consecință, reacțiile îndoielnice trebuie să fie întotdeauna repetate și interpretate cu extremă precauție. Rezultatele tipice sunt pozitive testul FTA-ABS, de obicei, indică prezența sifilis. Deși rezultate fals pozitive FTA-ABS-test raportat la 15% dintre pacienții cu LES activ, colorație fluorescentă și în majoritatea cazurilor fost incerte sau atipice, dezvăluind structuri sub formă de perle. După toate probabilitățile, acest lucru se datorează atașamentului anticorpilor antinucleari la nucleoproteine ADN Treponema sau infiltrațiilor prin fantele din membrana exterioara a microorganismului. Cu toate acestea, din cauza reacțiilor FTA-ABS probabilitatea lozhdopolozhitelnyh TPI numai rezultate pozitive sunt considerate a fi concludente în ceea ce privește curentul sau infecției sifilitice trecut.
Pentru scopuri practice, cei mai mulți medici trebuie să fie familiarizat cu cele trei direcții principale de utilizare a testelor serologice pentru sifilis: pentru testarea unui număr mare de seruri pentru screening sau de diagnostic (de exemplu, RPR sau VDRL); pentru evaluarea cantitativă a titrului de anticorpi reactivi în scopul determinării activității clinice a sifilisului sau a eficacității tratamentului (de exemplu, VDRL sau RPR); pentru a confirma diagnosticul de sifilis pacienților cu rezultate pozitive reacții reaginic sau prezenta suspiciune clinică de sifilis (de exemplu, FTA-ABS, MHA-TP, HATT).
Evaluarea neurosifilisului asimptomatic. Implicarea Asymptomatic a sistemului nervos central al procesului este detectat în investigarea lichidului cefalorahidian (LCR). In etapa de sifilis primar modificări de compoziție LCR sunt rare, dar sifilis sau creștere pleiocitoză nivelurile secundare sau latente de proteine detectate la 40% dintre pacienți. Când iepuri infectează obținute de la pacienți CSC Fără cu sifilis secundar, agentul este detectat în 40% din probe cu sifilis latent - mult mai puțin. Prezența Treponema pallidum în LCR este adesea însoțită de prezența oricăror alte modificări în compoziția sa, dar în același timp, microorganismul poate fi detectată în probele de LCR de la pacienți fără dovezi de pleiocitoză sau niveluri crescute de proteine. În epoca riscului dopenitsillinovuyu neurosifilisului simptomatică este corelată în mare măsură cu intensitatea modificărilor compoziției CSF într-un stadiu incipient al bolii. Investigarea CSF trebuie recomandată tuturor pacienților cu reacții pozitive și serologice semne sau simptome neurologice, și pacienții cu sifilis netratat cu durată necunoscută sau cu sifilis de mai mult de 1 an. Posibilitatea ca neurosifilis asimptomatice deja dezvoltate la unii pacienți cu boală latentă secundară și la începutul anului, nu exclude recomandările. Datorită faptului că terapia standard pentru sifilis precoce, nu permite atingerea bactericid LCR pentru concentrațiile de medicamente inovatoare, unii experți recomanda pentru a face puncția sifilisul lombară latentă secundară și precoce, urmat de observare pe termen lung a pacienților cu modificări detectate în compoziția CSF.
CSF este examinat pentru prezența pleocitozei, niveluri crescute de proteine și reactivitate în VDRL. Reacția CSF-VDRL este extrem de specifică dacă CSF nu conține o impuritate din sânge. Cu toate acestea, acest răspuns este relativ insensibil și poate fi negativ chiar și în cazul neurosifilisului simptomatic progresiv. Testul FTA neabsorbit utilizat pentru a examina CSF are mult mai multe șanse de a produce rezultate pozitive în toate stadiile de sifilis decât VDRL, dar poate reflecta penetrarea pasivă a anticorpilor serici în
Ea încearcă să găsească un marker mai sensibil și specific pentru diagnosticul de neurosifilis se referă CSF oligoclonale produse de măsurare anti-treponemala IgM și IgG de legare și. LCR izolat de la 80% dintre pacienții cu scleroză multiplă, și de la aproximativ 40% dintre pacienții cu alte boli inflamatorii ale sistemului nervos central (neurosifilis, meningita bacteriană, encefalita virală, subacută sclerozantă subacută), există o legare oligoclonale discretă regiune globulină gamma imunoglobulină influențat CSF electroforeză gel de agaroză. Se crede că acești anticorpi produși intratecal și au specificitate împotriva agentului etiologic (de exemplu, T. sifilis paiiidum si pojar virusului in subacută sclerozantă subacută). Cu toate acestea, testul de legare oligoclonale nesnetsifichen per se pentru neurosifilis la pacienți cu reacții serologice pozitive. producția intratecală de anticorpi specifici IgG și IgM antisifiliticheskih au diferite metode, dar problema este. este în faza de cercetare.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: