PREGĂTIREA SITURILOR HISTOLOGICE
Pentru a obține secțiuni histologice, se folosesc cuțite speciale de microtom, cu diferite forme, lungimi și unghiuri ale secțiunii lamei. În formă sunt o pană complexă din oțel, în care muchia de tăiere are o ascuțire suplimentară în formă de pană. Lungimea cuțitului poate fi cuprinsă între 8 și 50 cm.
Conform configurației lamei sunt trei grupe Microtome Knife: A, B și C. în cuțite microtomice aparținând grupei A, o suprafață este plană, iar cealaltă concav (numită plano-concave, cu o mare suprafață concavă curbură). Aceste cuțite sunt adesea realizate dintr-un oțel moale sau relativ moale și concepute pentru obiecte de tăiere, udate cu celloidin.
Lame aparținând grupului B, sunt numite plano-concave, dar curbura suprafeței concave au semnificativ mai mică decât cea din grupa A. Aceste cuțite sunt realizate dintr-un oțel dur, utilizarea lor pentru secțiunile tselloidinovyh preparare și celloidin parafină.
În cuțitele aparținând grupului C, ambele suprafețe ale lamei sunt plane. Ele sunt realizate din oțel dur și sunt utilizate pentru tăierea obiectelor încorporate în parafină și, de asemenea, pentru obținerea de felii pe microtomul de congelare.
În plus, lamele magnetice metalice și cuțitele de sticlă sunt folosite pentru a prepara secțiuni parafinice și semi-fine pe microtomuri și ecografii. Lama magnetică metalică (cuțitul de unică folosință) permite obținerea de secțiuni cu blocuri de parafină de 50-60, apoi se schimbă lama. Fabricarea și utilizarea cuțitelor din sticlă - vezi capitolul 12.
NIVELURI MICROTOMALE DE UTILIZARE
Ia secțiuni histologice calitative la tselloidinovoy, celloidin-parafină și materialul de umplere parafină cu ajutorul cuțitului microtom a cărui grosime a lamei trebuie să fie de la 3 la 5 microni. Pentru lucrul la microtomele de îngheț este necesar să aveți un cuțit ascuțit fără jgheaburi pe lamă. Cuțitul trebuie să fie ascuțit în timp și înainte de fiecare tăiere
care obiecte de editat. Microfoanele sunt ascuțite cu ajutorul aparatelor speciale, de exemplu, "Za Goga" 1Japan). Cu toate acestea, până acum, ascuțirea manuală a cuțitelor nu a pierdut relevanța și este utilizată în multe laboratoare. Cuțitele microtome manuale sunt ascuțite pe o piatră care are forma unei bare. Galben, așa-numita piatră belgiană este folosită pentru ascuțirea primului, apoi continuă să se ascuțească pe o piatră albă (Arkansas), care are o granularitate mai mică. Puteți utiliza piatră aspidă naturală, care are, de asemenea, o suprafață granulată cu granulație fină și fină.
Înainte de măcinare de piatra de pe suprafața uleiului de motor sau de kerosen, glicerol, alcool diluat 70% 11 aplicat: 1) apă și săpun. Pe partea din spate a lamei purta obushok speciale 1zhelatelno folosite în mod continuu pentru ascutit același cuțit - aceasta determină unghiul de ascuțire), iar tija sau deschiderea în partea de capăt a cuțitului mâner filetat. Apoi, cuțitul este așezat cu un pic pe piatră, de-a lungul căruia lama se culisează sub propria gravitate. Cuțitul se desfășoară pe piatra de la un capăt la altul, și apoi de cotitură prin obushok, realizează mișcarea în direcția opusă.
Durata procesului depinde de calificarea asistentului de laborator și de starea marginii de tăiere a cuțitului. În medie este de 30 de minute până la 1 oră. Verificați periodic cuțitul de ascuțire de calitate usor de stabilire pe scena microscop și deplasarea acesteia, astfel încât muchia de tăiere trece prin câmpul vizual la o mărire redusă. Apoi cuțitul este condus pe o curea largă întinsă peste un pantof de lemn. Editarea este efectuată în același mod ca și ascuțirea (prin pantof).
MICROTOMELE ȘI PECULIARITĂȚILE LUCRĂRII PE ACEASTA
Microtomurile sunt dispozitive cu ajutorul cărora secțiunile de țesuturi sunt umplute în diferite medii, precum și înghețate și nefixate. Microtomurile permit obținerea secțiunilor histologice de diferite grosimi. Conform principiului acțiunii, ei disting microtomii de sanie, de rotație, de congelare, precum și de criostați și vibratoizi.
Rozetele menționate mai sus se caracterizează prin mișcarea orizontală a cuțitului și prin ridicarea verticală a suportului de bloc. Ele sunt utilizate cu succes pentru tăierea obiectelor umplute cu celloidină, violoncelă-parafină și parafină. Principalele părți ale microtomului sunt situate pe o sanie specială, de unde și numele. Principiul de funcționare a microtomei sanitare este acela că, cu cursa din spate a cuțitului, sania cuțite împinge tija cu scara regulatorului de alimentare, determinând-o să se miște. Mișcarea tijei este transmisă tijei, care, cu ajutorul cuplului, rotește clichetul. rotație
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: