Subiect: Diagnosticul microbiologic al infecțiilor meningococice și gonococice.
Obiectiv: Pe baza cunoașterii biologiei meningococi, Neisseria gonorrhoeae, și caracteristicile interacțiunii acestora cu microorganismul să fie în măsură să justifice tactica de diagnostic microbiologic, prevenirea si tratamentul bolilor cauzate de acestea.
1. Caracteristicile biologiei meningococilor și gonococilor, determinarea rolului lor în patologia infecțioasă umană.
2. Patogeneza dezvoltării infecțiilor meningococice și gonococice.
3. Material și metode de diagnostic microbiologic al infecțiilor gonococice și meningococice.
4. profilaxia și terapia specifică a infecțiilor meningococice, gonococice.
1. Să poată microscopia preparatelor din CSF, puro uretra și să interpreteze rezultatele obținute.
2. Livrați, luați în considerare și evaluați rezultatele reacției de aglutinare a latexului cu ser pentru meningococ și CSF.
3. Pregătiți frotiuri fixe din culturi pure, microscopiați-le și interpretați rezultatele.
4. Să țină cont și să evalueze rezultatul studierii proprietăților biochimice și determinarea antibioticogramei culturilor studiate.
5. Determinarea speciilor aparținând culturilor studiate.
1. Clasificarea și proprietățile morfobiologice ale meningococilor, gonococilor.
2. Factori de virulenta a meningococilor si gonococilor.
3. Ecologie, caracteristici ale epidemiologiei, patogeneza infecțiilor meningococice și gonococice.
4. Material și metode de diagnostic microbiologic al infecțiilor meningococice, gonococice.
5. Prevenirea specifică a infecțiilor meningococice.
6. Terapia specifică a infecțiilor gonococice.
Sarcini efectuate în timpul lecției (OIRS):
1. Efectuați un studiu de CSF al unui pacient cu un diagnostic clinic de meningită:
1.1. Pentru a microniza produsul finit dintr-o peletă CSF colorată cu albastru de metilen, pentru a evalua rezultatul obținut.
1.2. Pentru a pune, ia în considerare și a evalua rezultatele reacției de aglutinare a latexului cu CSF și serul meningococ.
1.3. Pe baza rezultatelor obținute, dați o concluzie.
2. Să efectueze un studiu bacteriologic de descărcare nazofaringiană pentru a stabili transportul meningococic:
2.1. Citiți tamponul folosit pentru a ridica mucusul din partea din spate a faringelui (demonstrație).
2.2. Evaluați rezultatele însămânțării mucusului de la peretele faringian posterior până la agarul seric cu ristomicină.
2.3. Se prepară medicamentul din cultura de agar izolat de subiect, pecul Gram și microscopia.
2.4. Pentru a lua în considerare și a evalua rezultatele inoculării culturii care urmează să fie studiată pentru agar nutrițional normal, 2 tuburi cu agar seric (37 ° C, 22 ° C), "serii pestrițe".
2.5. Determinați antibioticograma culturii.
2.6. Obțineți rezultatele obținute în protocol și trageți o concluzie; completați o direcție goală și un formular de răspuns din rezervor. laborator.
3. Pentru a promikroskorrovat un preparat dintr-un puro uretra al pacientului cu suspiciune pe o gonoree. Pentru a da o concluzie.
4. Să ia în considerare și să evalueze rezultatele DSC cu serul pacientului cu gonoree cronică suspectată. Pentru a da o concluzie.
5. Citiți și descrie Biologics protocol: chimic meningococice vaccin A + C meningococică ser seroaglutinare de diagnostic pentru aglutinare latex meningococe gonoallergen vaccin gonococici, subliniind faptul că acestea sunt, pentru ce și cum să se aplice.
6. Activitatea de testare: cocci patogeni.
Instrucțiuni metodice pentru îndeplinirea sarcinii de cercetare:
I. Efectuarea unui studiu CSF al unui pacient cu diagnostic clinic de meningită, pentru care:
· Microscopia produsului finit dintr-o peletă CSF colorată cu albastru de metilen, se evaluează rezultatul obținut.
Unul dintre agenții patogeni ai meningitei purulente sunt meningococii. Pentru detectarea lor, utilizarea CSF, obținută prin puncție lombară. Este recomandabil să luați materialul imediat după admiterea pacientului la spital și înainte de începerea tratamentului.
Luarea CSF - manipulare medicală, efectuată în conformitate cu regulile de asepsie. CSF transparent, înainte de analiză centrifugat la 3500 rot / min timp de 5 min și frotiuri preparate din extractul concentrat. Din CSF turbid, frotiurile sunt preparate fără centrifugare. Frotiurile sunt colorate cu albastru de metilen și Gram. Detectarea side Gram negative diplococci în formă de boabe, concavă cu care se confruntă reciproc și sunt în leucocite, svidetelstvet de etiologie meningita meningococică.
· Puneți, examinați și evaluați rezultatele aglutinării latexului cu CSF și serul meningococ.
Meningita este o boală gravă și în plină dezvoltare. Prin urmare, este important pentru a diagnostica în stadii incipiente și rapid pentru a începe un tratament etiotropic în timp util. Dintre aceste metode, în plus față de ser imun luminescent RIF se referă detectia aglutinare latex antigenelor polizaharidice specifice de N. meningitidis A, B, C, Y / W CSF. Trebuie avut în vedere faptul că microscopia LCR nu este întotdeauna posibil pentru a detecta meningococi.
Pentru a seta reacția de aglutinare a latexului, CSF este încălzit timp de 3 minute la 100 ° C și centrifugat timp de 5 minute. Prin picătură de supernatant și reactiv conținând particule de latex cu anticorpi monoclonali la meningococci, aplicați la ... și amestecați folosind un stick special. În paralel, puneți reacția cu un control pozitiv în mod deliberat și reacția cu CSF și cu particule de latex cu IgG la iepurele neimunizată.
Interpretarea rezultatelor se face după 10 min prin fenomenul de aglutinare, se pare cu ochiul liber. Reacția pozitivă - o aglutinare clară, în cazul aglutinării cu un control pozitiv cunoscut și absența aglutinării cu latex fără IgG imunizați iepure, indică prezența unor antigene specifice ale N. meningitidis în LCR și subliniază rolul său etiologic în dezvoltarea meningitei. Reacția nu este interpretată dacă aglutinarea a fost efectuată cu latex pentru controlul negativ. În acest caz, trebuie să repetați testul cu o altă porțiune din CSF.
· Înregistrați rezultatele examenului microscopic și aglutinarea latexului în protocol și trageți o concluzie; completați direcția martor și formularul de răspuns din rezervor. laborator.
II. Efectuați un studiu bacteriologic al descărcării nazofaringiene pentru a stabili transportul meningococic.
1 etapă. În nazofaringe, meningococii pot fi detectați nu numai la pacienți, ci și la purtători. Materialul pentru examinare este luat pe stomacul gol sau nu mai devreme de 3-4 ore după masă, înainte de începerea tratamentului cu antibiotice. Pentru a face acest lucru, utilizați un tampon nazofaringian special, care este îndoit la ¾ din lungime la un unghi de 45 °. Tamponul este condus pe palatul moale și de 2-3 ori este efectuat pe peretele din spate al nazofaringei, fără a atinge limba, dinții și membrana mucoasă a obrajilor. Materialul de testare este semănat imediat sau livrat la laborator, nu mai târziu de 2 ore, prin plasarea tamponului într-o eprubetă astfel încât să nu atingă pereții. Materialul de testat și culturile ar trebui protejate de răcire și uscare, deoarece meningococul este foarte sensibil la acești factori. Prin urmare, pentru livrare utilizați o pungă specială cu încălzitoare.
Inocularea cu metoda "bar-with-pad" se efectuează pe plăci cu agar nutritiv care conține sânge, ser sau lichid ascitic. În paralel, acest mediu este utilizat cu adăugarea de ristomicină, ceea ce întârzie înmulțirea cocilor gram-pozitivi din nazofaringe care urmează să fie separați. Culturile sunt incubate la 37 ° C și concentrație crescută de dioxid de carbon (5-10%) timp de 24-48 ore.
Etapa 2. Evaluați rezultatele mucusului de însămânțare de la peretele faringian posterior până la agarul seric cu ristomicină.
Meningococii formează colonii mici, rotunde și transparente, care au o nuanță albăstruică în lumina transmisă. Coloniile izolate caracteristice au fost transferate pe agar seric pentru a obține o cultură curată și au fost incubate la 37 ° C timp de 18-24 ore.
Etapa 3. Se prepară medicamentul din cultura de agar izolată de subiectul respectiv, microscopie colorată conform Gram.
Cultura este identificată prin trei teste care îi permit să fie atribuită genului Neisseria. Aceasta este o morfologie caracteristică (diplo- și tetracocci polimorfici), colorare gram-negativă și o reacție pozitivă la oxidază. Pentru determinarea oxidazei, cultura studiată se aplică pe discuri speciale. Dacă apare imediat o pată roșie-violetă, cultura este pozitivă la oxidază. Pentru identificarea și diferențierea speciilor față de Neisseria ne-patogenă, care locuiește permanent în tractul respirator superior, utilizați un complex de proprietăți (Tabelul 1).
Proprietățile diferențiate ale unor specii din genul Neisseria
Legenda: "+" - 90% sau mai mult din tulpinile sunt pozitive;
"-" - 90% sau mai mult din tulpinile sunt negative;
d - 11-89% din tulpinile sunt pozitive.
Determinarea antibioticogramei meningococilor se realizează prin metoda disco-difuzie (DDM).
4. Etapa: luați în considerare și evaluați rezultatele inoculării culturii care trebuie studiată pentru agar nutritiv normal, 2 tuburi cu agar seric (37 ° C, 22 ° C), "rând variat".
Culturile meningococice identificate definesc o serogrupă în RA cu seruri specifice tipului (A, B, C, D, 29E, 135W, X, Y, Z).
Pe baza rezultatelor pe care le introduceți în protocol, determinați speciile aparținând culturii, sensibilitatea acesteia la antibiotice și trageți o concluzie; completați direcția martor și formularul de răspuns din rezervor. laborator.
III. Microscopie un medicament colorat de gram din puroiul uretral al unui pacient cu gonoree suspectată. Dă o concluzie.
În cazul în care un rezultat pozitiv în prepararea exponat gonococi - Gram negativ diplococci de fasole în formă în interiorul leucocitele. Această imagine microscopică este observată în gonoreea acută înainte de utilizarea antibioticelor. In gonoreea cronica examen microscopic este negativ, deoarece gonococi sunt forme atipice, sunt variabile în culoare și prepararea Gram prezintă diferite microflora străine.
IV. Luați în considerare și evaluați rezultatele RSK cu serul pacientului cu gonoree cronică suspectată. Obțineți rezultatele în protocol și faceți o opinie (consultați Sesiunea nr. 11).
V. Citiți și descrieți în rezervorul de protocol. medicamente: vaccin meningococic A + C meningococică ser seroaglutinare diagnostic chimic pentru aglutinare latex meningococică, gonococici gonoallergen vaccin, ceea ce indică faptul că acestea conțin, ce și cum să se aplice.
Întrebări pentru auto-control:
1. Reguli de admisie și de livrare separate de peretele posterior al nazofaringe pentru a diagnostica nasofaringită meningococice și purtător.
2. Explicați posibilitatea utilizării unei metode de diagnostic microscopice pentru infecțiile meningococice.
3. Justificați necesitatea cunoașterii patogenezei infecției meningococice pentru o alegere în cunoștință de cauză a materialului pentru diagnosticul microbiologic.
4. Justificați metode de selecție microbiologice de diagnostic în rinofaringită meningococică, meningococcemia epidemie meningita meningococică.
5. În ce scop efectuat serotipare abjecție la menigokokkovyh și infecții gonococice?
6. Ce metodă de diagnosticare microbiologică Infecțiile cu gonococi menigokokkovyh și, ajută la clarificarea alegerea de medicamente pentru tratamentul cauzal.
7. Care sunt metodele de diagnosticare expresa a infectiilor meningococice? Care este esenta lor?
8. Care sunt trăsăturile caracteristice ale Neisseriei patogene din cele nepatogene.
9. Ce tip de vaccin este utilizat pentru prevenirea specifică a infecțiilor meningococice, tactica utilizării lor.
10. Denumiți caracteristicile diagnosticului microbiologic al gonoreei acute și cronice, justificați alegerea metodelor.
11. Alocarea gonovacinei.
12. Numirea provocărilor (biologice, fiziologice, alimentare etc.) cu infecții gonococice.
Prelegeri privind microbiologia.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: