Echipamente și reactivi: termostatate, centrifugare la 3000 rot / min, un microscop binocular, heparina, 0,3% „roșu„soluție neutră colorant, petrolatum chimic pure, pipete Pasteur sterile, eprubete, diapozitive și capacul de sticlă.
Pregătirea și vopsirea ochelarilor de diapozitive. Pentru a prepara soluție de alcool 0,3% de vopsea "roșu neutru", se amestecă 300 g de colorant cu 100 ml de alcool absolut. Pentru o mai bună dizolvare, amestecul este plasat într-un termostat la 37 ° C timp de 24 de ore, se agită periodic, apoi se filtrează prin hârtie de filtru. Pentru degresare, diapozitivele sunt conținute într-un amestec de Nikiforov (alcool și eter 1: 1). Culoarea paharelor se efectuează înainte de reacție: se aplică o picătură de colorant pe culisa degresată și se usucă la temperatura camerei. Sticla vopsită poate fi păstrată timp de mai multe luni.
Tehnica reacției. În prealabil degresat și colorate cu 0,3% soluție alcoolică de sticlă diapozitiv „roșu neutru“ aplicat 0,05ml suspensie pacient de leucocite și 0,05 ml de alergen, agitat și acoperit cu un capac de sticlă, care sunt lubrifiate cu vaselina kraya-; rămășițele șlamului se înmoaie. In paralel, frotiu de control preparare 2: 1 cu un alergen la care pacientul nu este hipersensibilitatea, lichid 2a-la-test de control, care se pregătește un alergen. Prepararea experimentală și controlul sunt plasate într-un termostat la 37 ° C timp de 15 minute; apoi, sub sistemul de imersiune al microscopului (cu o creștere de 600), sunt numărate 40 bazofile în fiecare preparat, iar numărul celulelor modificate morfologic și degranulat se numără printre ele.
Evaluarea reacției. Testul este considerat pozitiv dacă procentajul bazofililor modificați în cadrul studiului depășește nivelul controlului cu mai mult de 10%. Atunci când această reacție este considerată ca fiind slab pozitiv în cazul în care procentul de celule degranulated este de 11 - 15%, moderat pozitivă (+) - în cazul în care acesta depășește controlul la 16-20%, și puternic pozitivă (+ + +) - degranulării bazofilelor când în experimentul de mai sus controlul asupra la 20%. Numărul celulelor degranulate în control nu trebuie să fie mai mare de 1-2 (3-5%).
Trimiteți-le prietenilor: