TEST basophil (baza de bază + philia greacă tendință; testul Shelley sinonim) - o metodă de diagnosticare a sensibilizare specifică, bazată pe degranulării bazofilelor după adăugarea alergen specific (Fig.). Propusă de Shelley (W. Shelley) în 1962. În anii următori, un test bazofil a fost folosit de diverși cercetători pentru studierea polenului, a alergiilor medicamentoase și a alimentelor. Testul bazofil a fost recunoscut ca un test suplimentar pentru diagnosticul bolilor alergice și ca metodă de detectare a anticorpilor alergici umani. leucocitele bazofile ca celulele mastocite tesut sunt implicate in eliberarea de histamina, heparina, substanțe cu reacție lentă și serotonina. Se crede că reacția degranularii de sânge la momentul inițial indică prezența unei reacții alergen-anticorp (vezi reacția Antigen-anticorp). Natura anticorpilor care cauzează reacția de degranulare rămâne neclară. Este foarte probabil ca acestea să fie reactive (vezi Anticorpi, alergice).
Reacția directă a degranulării bazofilei cu alergia la penicilină (bazofil neschimbat în stânga).
Există două tipuri de teste basophilic: 1) test direct, cu o reacție de degranulare rom reprodus spontan pe bazofile pacientului sensibilizat (a + leucocite alergiei pacientului); 2) un test indirect, în care reacția degranularea este reprodusă în bazofile iepure sau individ sănătos (+ leucocite investigate pacientului ser alergen +); în reacție este mai bine să se utilizeze leucocite de iepure care conțin multe bazofile (4-12%). Testarea indirectă a devenit mai răspândită.
Materialele utilizate pentru testul bazofil direct: 1) sânge proaspăt al pacientului; 2) un alergen, care este susceptibil de sensibilitate crescută; 3) soluție de fixare (6 ml etanol, 2 ml cloroform și 2 ml acetonă); 4) filtre cu membrană din celuloză.
Metoda de testare bazofilă directă
Se amestecă 0,25 ml de sânge heparinizat al pacientului și 0,025 ml de alergen. După 5 minute, se adaugă o soluție de fixare răcită la 0,1 ml din amestec, ceea ce distruge celulele roșii din sânge, lăsând leucocitele intacte. După fixare peste noapte la t ° 4 °, leucocitele sunt resuspendate și filtrate prin filtre de membrană celuloză timp de 20 de minute. În acest caz, bazofilele rămân pe filtre. Filtrele sunt colorate timp de 30 de secunde cu o soluție de albastru de toluidină, deshidratată în etanol și limpezită în xilen. Numără 20 bazofili. Acestea sunt clasificate în funcție de dimensiunea, culoarea, numărul și localizarea granulelor bazofile. Pentru bazofilele "epuizate" se caracterizează prin: 1) un număr mic de granule; 2) granule mici, ușor colorate; 3) un număr semnificativ de granule situate în afara celulei. Testul este considerat pozitiv dacă mai mult de jumătate din bazofilele sunt "epuizate" (degranulate).
Materialele folosite pentru testul bazofil indirect: 1) proaspete sau depozitate la serul t ° -20 ° al pacientului; 2) alergen; 3) leucocitele iepure suspensie obținută prin centrifugarea sângelui heparinizat la o viteză de 3000 rot / min, timp de 5 minute într-un strat subțire de flacoane din sticlă sau tuburi de plastic concentrate; 4) diapozitive colorate cu o soluție de putregai neutru. Pentru fiecare alergen, un experiment care selectează concentrația care nu determină modificări nespecifice în bazofile.
Metoda de testare bazofilă indirectă
Vitamina neutralizată este acoperită cu aceeași cantitate (0,005 ml) de suspensie de leucocite, serul pacientului și alergen. Geamul glisant a fost acoperit cu un capac, marginile care sunt lubrifiate cu vaselina și puse timp de 10 minute într-un incubator (la 37 °). Introducerea simultană a probelor de control: 1) serul de testat cu o suspensie de leucocite (pentru a exclude degranularea nespecifică); 2) o suspensie de leucocite cu un alergen. Reacția este observată sub un microscop de imersie. Numără cel puțin 20 de bazofili. Principalele semne de deteriorare a bazofilelor sunt următoarele: umflarea și pierderea de sfericitate, granuloliză, eliberarea granulelor din celule. Distrugerea completă a celulei cu eliberarea granulelor în mediu (degranularea "explozivă") este extrem de rară.
Se disting trei grade ale reacției de degranulare: 1) reacția slabă (+) - degranularea în testul bazofil depășește cu 10% în control; 2) reacție moderată (+ +) - depășirea degranulării în control cu 15%; 3) puternic pozitiv (+ + +) - depășind degranularea în control cu 20% sau mai mult. Criteriul unui test bazofil pozitiv poate fi considerat dispariția granulelor în mai mult de 70% din bazofile. Valoarea este doar rezultate pozitive în mod clar, iar negativul nu exclude starea de hipersensibilitate la acest alergen.
Bibliografie: Ishimova LM și 3 Elichenko LI Reacțiile alergice ale celulelor sanguine și importanța lor pentru diagnosticare, în cartea. Alergene. boli la copii, ed. M. Y. Studenikina și TS Sokolova, p. 144, M. 1971; Polner AA Reacția degranulării leucocitelor bazofile în timpul alergiilor la polenul plantelor, Ter. Arch. 40, nr. 2, p. 103, 1968; Shelley W. V. Test de serologică pentru alergii la om, Nature (Lond.), V. 195, p. 1181, 1962; el f e, test de degranulare bazofil indirect pentru alergie la penicilină și alte medicamente, J. Amer. med. Ass. v. 184, p. 171, 1963.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: