Siswal - definiția tripsinei

Determinarea tripsinei

Se investighează acțiunea digestivă a acestei enzime asupra proteinelor.

Eșantion cu film de raze X. Metodă de execuție. În tuburile 10-12, sunt îmbuteliate 2 ml de soluție 5% de bicarbonat de sodiu.







Una dintre aceste tuburi este turnată cu 2 ml de suc de pancreatic care trebuie examinat și amestecat bine.

Din primul tub pipetă se transferă aproximativ 2 ml în al doilea, de la al doilea - în al treilea, etc. Astfel, o serie de diluții de 1: .. 2, 1: 4, 1: 8, 1. 16, 1. 32, etc ... apoi din fiecare tub a fost luată și 1 picătură aplicată filmului radiografic nedezvoltate (strat de film compus în principal din gelatină, t. e. dintr-o proteină care conține substanța). Pentru a evita îmbinarea picăturilor, acestea trebuie aplicate astfel încât să existe o distanță suficientă între picăturile individuale.







Pelicula este plasată timp de 1 oră într-un termostat la 37 ° și apoi spălată cu apă rece.

Evaluare. În mod normal, cel puțin pe locurile primelor picături, stratul proteic este digerat, adică aceste locuri devin luminoase și transparente, care nu apar dacă sucul pancreatic conține o cantitate insuficientă de tripsină.

Evaluarea cantitativă a acestei probe nu este susceptibilă la volatilitatea extremă a compoziției sucului duodenal și la diferențele mari în stratul de gelatină pe filmele cu raze X.

Notă. Testul de cazeină se bazează, de asemenea, pe acțiunea digestivă a tripsinei asupra proteinelor.

Fig. 52. Determinarea tripsinei utilizând o probă cu un film de raze X. A - la reflexul eteric; B - după reflexul eteric; B - absența completă a enzimelor în sucul pancreatic.

La 10 ml de soluție 1% de cazeină în soluție de sodă 1% se adaugă 1 ml de suc de duodenal și se lasă timp de 10 minute la 37 ° la un termostat. În prezența tripsinei, soluția proteică este digerată, adică proba cu acid acetic devine negativă.

Gross-Field a elaborat o versiune a acestei mostre pentru cuantificare.







Articole similare

Trimiteți-le prietenilor: