Departamentul de Microbiologie cu Virologie și Imunologie

Academia de stat Kirov din Învățământul Superior

Dezvoltarea metodologică a cadrelor didactice

Lecție practică # 16 privind microbiologia

pentru studenții anului III de facultăți medicale și pediatrice.







Tema: "Virușii sunt agenți ai encefalitei provocate de căpușe, rubeolei, rabiei. Virusi oncogeni. "

Scop: să promoveze formarea de competențe pentru studiul infecțiilor virale, stăpânind principiile diagnosticării lor de laborator.

să ia în considerare proprietățile biologice ale virusurilor - agenți patogeni ai encefalitei brute, rubeolă, rabie;

să studieze epidemiologia, patogeneza, caracteristicile clinice, bolile cauzate de acestea, principiile prevenirii și tratamentului acestora;

precizează metodele de diagnosticare a infecțiilor virale în laborator.

Studentul ar trebui să știe:

1) înainte de studierea temei - morfologie, structură, moduri de reproducere a virușilor, metode de diagnosticare a bolilor virale;

2) după teme de studiu - proprietati patogenilor encefalită, rubeola, rabie, metode de cultivare, epidemiologia, patogeneza si tratamentul specific manifestărilor clinice și prevenirea bolilor cauzate de acestea.

Studentul trebuie să poată:

selectați materialul patologic de la pacienți pentru cercetarea virologică;

desfășoară activități de cercetare privind proprietățile biologice ale virușilor;

să efectueze metode serologice de diagnosticare a infecțiilor virale;

să efectueze măsuri preventive.

Ce știți despre istoricul studiului encefalitei, a rubeolei, a rabiei?

Care sunt principalele proprietati biologice ale acestor virusuri?

Ce rol joacă în patologia umană?

Descrieți epidemiologia, patogeneza, manifestările clinice, imunitatea rubeolei, rabia.

Ce metode sunt utilizate pentru diagnosticul de laborator al acestor boli virale?

Descrieți principiile de bază ale prevenirii și tratamentului acestora.

2.1. Controlul nivelului inițial al cunoașterii. Metoda este controlată programată.

2.2. Bazele aproximative ale muncii independente a studenților:

- efectuarea muncii practice;

- proiectarea și protejarea protocoalelor.

3. Rezumatele materialului studiat

3.1. Virusurile encefalitei transmise de căpușe.

(Encefalomielita sin Taiga encefalita, meningoencefalită Far Eastern căpușă, encefalita rusească de primăvară-vară, encepalitis căpușe.) Encefalitei de căpușă - este o boală virală acută caracterizată prin leziuni ale creierului și materia cenușie a măduvei spinării, ceea ce duce la dezvoltarea de paralizie si pareza.

Istoria studiului bolii.

Așa cum a fost izolat unitate nosologică KE în 1937, ca urmare a unei expediții complexe L.A.Zilberom (virusologi proeminent Chumakov, V.D.Solovev a lucrat în expediție) a condus. Regularitățile, focalitatea naturală, sezonalitatea, legătura cu activitatea căpușelor au fost stabilite. Sunt descrise caracteristicile clinicii și patomorfologiei CE, sunt dezvoltate metode de prevenire și tratament.

A doua expediție condusă de E. N. Pavlovsky a identificat rolul și importanța căpușelor ca purtători și un rezervor natural al virusului în natură. Rezultatele au servit drept bază pentru teoria focarelor naturale ale CE.

În timpul celei de-a treia expediții conduse de IO Rogozin, s-au studiat abordările privind dezvoltarea prevenirii specifice a CE.

Familie - Flaviviridae (în 1984 a fost izolat ca independent de familia Togaviridae). Numele familiei și genul a fost dat de numele de febră galbenă (lat.-flava-galben), care este un reprezentant tipic al acestui grup.

Rod - Flavivirus, include 63 de reprezentanți, grupate în 10 complex antigenic. Există două tipuri de virus encefalitei tic-suportate - Vest (purtători - căpușelor Ixodes persulcatus) și orientale (purtători - căpușelor Ixodes ricinus), care diferă ca severitate și evoluția clinică a compoziției antigenice a virusurilor patogene. În ultimii ani, un al treilea tip de virus izolat izolat în Grecia de la căpușe Rhipicephalus Bursa.

Forma virusului este sferică. Dimensiunea este de 40-45 nm. Tipul de simetrie este cubic. Organizația este complexă, spini ai naturii glicoproteinei sunt localizați la suprafață. Greutatea moleculară este de 46 * 10 4 kD. Coeficientul de sedimentare este de 175-218 C.

Genomul este un ARN monocatenar, infecțios, plus, cu o greutate moleculară de 4,2 x 103 kD, o constantă de sedimentare de 45 ° C, conține aproximativ 14 perechi de nucleotide.

ARN - 5,5 - 6,3%, Proteine ​​- 57-60%, Lipide - 27-30%, Carbohidrați - 6,5%

Complementare, grup; este dezvăluit în DGC;

Tip hemaglutinin; este detectat în PH, RTGA.

Adsorbție prin receptori de fosfolipid și glicoproteină.

Penetrarea prin endocitoză mediată de receptor (viropeksis) la confluența învelișului viral cu peretele vacuolelor trece ARN viral în citoplasmă.

ARN îndeplinește funcția de ARNm. Replicarea este lentă (40-60 ore).

Asamblare: formarea nucleocapsidului pe EPS a celulei.

Randament prin înmugurire (atașarea supercapsidului la ieșirea din celulă).

În țesutul cerebral al șoarecilor albi (cu vârste cuprinse între 3 și 4 săptămâni).

În cultura celulelor - fibroblaste de pui, rinichi de maimuță, celule transplantate. În RC există un CPD.

Pe culturile de legume - în sacul de gălbenuș și pe cojile caryolantoid.

Virusul este distrus prin acțiunea eterului, detergenților, formalinei, la fierbere - după 2 minute. Când este încălzit la 56-60 ° C timp de 10-30 minute. în lapte persistă până la 2 luni. Rezistent la UVD, persistă mult timp în glicerină.

Boală focală transmisibilă naturală cu sezonalitate primăvară-vară.

Mecanismul de infecție este transmisibil.

transmisibil (cu o mușcătură);

alimentar (atunci când mănâncă capră brută infectată, lapte de vacă și produse lactate);

contaminare (la zdrobirea și frecarea aspiratorului);

transplacentar (fătul de la mamă).

Transportatorii sunt căpușe Ixodes persulcatus și Ixodes ricinus.

Cisternele și vectorii de infecție în natură sunt acarieni ixodidici, care sunt obișnuiți în aproape toate țările Europei, în partea europeană a Rusiei și în Siberia; animale sălbatice. După ce se hrănesc cu animale infectate după 5-6 zile, virusul pătrunde în toate organele de căpușă, concentrarea glandelor reproductive ale sistemului, intestinal și salivare. Virusul persistă de-a lungul vieții acarianului, adică de 2-4 ani, ceea ce face ca căpușele să fie un "rezervor natural" de infecție. Rata de infectare a acarienilor este eterogenă de la o regiune la alta și de la un sezon la altul, variind de la 1 la 20% (rata maximă înregistrată este de 70%). Virusul este transmis între generații de căpușe. Insectele sunt capabile să paraziteze pe 100 de specii de animale.







Perioada celei mai mari activități de acarieni cade în primăvara și prima jumătate a verii, care se reflectă în numele infecției pe care o poartă - "encefalita primăvară-vară".

Acarienii nu pot zbura sau sari, ei pot prinde doar trecând și atingându-le victima sau cad pe ea. Ca și în sânge supt alte insecte, musca căpușă poate trece neobservat pentru o lungă perioadă de timp, datorită prezenței în saliva diluanti sale speciale de sânge (anticoagulante) și substanțe analgezice. Din acest motiv, o măsură simplă, dar foarte eficientă, pentru a detecta un acarian de aspirație, este autoexaminarea și examinarea reciprocă după părăsirea pădurii și oprirea. Masculii acarieni, spre deosebire de femele, suge pentru un timp foarte scurt, ceea ce este un alt motiv pentru care mulți oameni nu-și amintesc de faptul că mușcă.

Nu este exclus și infecția persoanelor care nu au vizitat pădurea. Acest lucru se poate întâmpla atunci când acarienii sunt purtați de animale (câini, pisici) sau oameni - pe haine, cu flori, ramuri etc.

Cei mai expuse riscului sunt persoane ale căror activități sunt legate de șederea în lucrătorii pădure de exploatare forestieră, părțile geologice, construcția de drumuri și căi ferate, conducte de petrol și gaze, linii electrice, topografi, vânători, turiști. În ultimii ani, printre bolnavi, până la 75% sunt locuitorii orașului, infectați în pădurile suburbane, în grădinile și grădinile.

Virusul pătrunde prin piele sau membranele mucoase in celulele, sistemul mononuclear fagocitar, unde reproducerea primară a virusului. Apoi merge în sânge (viremie), provocând intoxicații. Cu fluxul de sange intra in celule ale sistemului nervos central, multiplies, provocând modificări degenerative în materia cenușie a măduvei spinării sau ale creierului (in special leziunile severe observate în celulele nervoase din cornul anterior al colului uterin nucleelor ​​coloanei vertebrale SM ale cerebelului și bulbul rahidian). Membranele ale creierului, rădăcini spinarii, nervilor periferici dezvolta inflamatie exudativa.

Perioada de incubație este de 1,5-2 săptămâni, uneori prelungind până la 3 săptămâni. Durata diferită a perioadei de incubație poate fi explicată prin natura mușcăturii - cu cât cocoșul a fost aspirat mai mult, cu atât mai mulți viruși au pătruns în organism și cu cât boala se dezvoltă mai rapid.

Boala se dezvoltă brusc, timp de mai multe zile.

Formele de bază ale CE.

Virusul afecteaza mater PIA, materia cenușie (cortex) al creierului, neuronii motori ai măduvei spinării și a nervilor periferici care exprimau clinic convulsii, paralizie a grupelor musculare individuale sau a membrelor intregi si pentru a aborda sensibilitatea pielii.

Mai târziu, atunci când inflamația virală cuprinde întregul creier, dureri de cap marcate cerebrale simptomy- persistente, vărsături persistente, pierderea conștienței până la comă sau, dimpotrivă, se dezvoltă agitație psihomotorie pierderea de orientare în timp și spațiu.

Încălcări ale sistemului cardiovascular (miocardită, insuficiență cardiovasculară, aritmie), sistemul digestiv - retenția scaunului, ficatul mărit și splina.

Toate aceste simptome sunt observate pe fundalul unei deteriorări toxice a corpului - o creștere a temperaturii corpului la 39-40 ° C.

Într-un procent mic de cazuri, cu leziuni ale nervilor spinării, boala poate să apară ca un tip de "radiculită" (poliradiculoneurită).

Severitatea bolii depinde de vârstă - probabilitatea ca leziunile cerebrale severe să crească brusc de la vârsta de 40 de ani, cu o vârstă maximă de 60 de ani se înregistrează letalitatea maximă.

Complicațiile encefalitei pe căpușe sunt observate la 30-80% dintre pacienții care s-au recuperat din forma clinică exprimată și sunt în principal reprezentați de paralizia flascată a extremităților predominant superioare.

Letalitatea variază de la 2% în forma europeană la 20% în Orientul Îndepărtat (mai greu și mai periculos). Moartea are loc în decurs de 1 săptămână de la debutul bolii.

Variantele atipice mai puțin comune ale bolii sunt șterse, forme asemănătoare gripei; poliomielită. Poate că este un purtător cronologic prelungit al virusului.

După infecția transferată, se formează o imunitate stabilă de-a lungul vieții, ca urmare a producerii de anticorpi de neutralizare, completare-legare și hemaglutinare a virusului. Dezvoltat HRT.

Materialul investigat este sânge, CSF, acarieni, materiale secționate.

Metoda virologică este izolarea și identificarea;

Metoda serologică - RN, RSK, RTGA, ELISA, RZGA, RNGA cu seruri pereche (crește de 4 ori și de mai multe ori);

Metoda Express - RIF, RPGA, ELISA, RIA;

Metode biologice și moleculare biologice - ELISA, RNGA

Măsurile generale de prevenire a mușcăturilor de căpușe includ:

îmbrăcăminte specială în pădure - cizme, jachete cu mâneci strânse; o batistă sau o plasă care acoperă gâtul; capul care acoperă părul; examinări de sine și reciproce la ieșirea din pădure și la opriri; cosit iarba si arbusti scazut, taie lemnul mort, curatarea molozului si a pietrelor; Aplicarea de substanțe repellente lichide și de aerosoli (substanțe chimice speciale pentru combaterea insectelor); În cazul în care este înregistrată encefalita transmisă pe cale taină, fierbere de capră și lapte de vacă.

Cercetarea specifică (pentru encefalita cauzată de căpușe) este efectuată cu ajutorul vaccinurilor inactivate. Rapid (în decurs de 24 de ore de la administrare), prevenirea poate fi făcută și cu o singură injecție de imunoglobulină, care protejează timp de până la o lună.

Primul ajutor cu o mușcătură. Pentru a elimina bifa blocat pre-lubrifiate cu unele grăsimi (vaselina, smântână, ulei de floarea soarelui) și 15-20 de minute trageți cu atenție bucla firului sau forcepsul, agitând dintr-o parte în alta. Distrugerea acarienilor ar trebui evitată. Insecta capturat ar trebui să ardă sau se toarnă apă clocotită, dar, de asemenea, poate aduce la centrul medical pentru a stabili o infectie tick de virus. Locul de muscatura se recomandă a fi tratat cu iod, peroxid de hidrogen sau cu un preparat care conține alcool și se spală bine mâinile.

În nici un caz nu ar trebui să se zdrobească strivirea, deoarece în acest caz poate apărea și infecția cu un virus conținut în organele interne ale acarianului.

Vaccin. În esență, toate vaccinurile pentru prevenirea encefalitei tic-suportate sunt crescute pe ouă embrionate de găină, virus inactivat cu formalină adsorbit la un adjuvant (o substanță pentru a spori răspunsul imun) - hidroxid de aluminiu. În plus, se utilizează componente stabilizatoare, gelatină sau albumină.

În prezent, în Rusia sunt utilizate patru vaccinuri.

Un vaccin de cultură (PR-în ONG Virion, Tomsk). Este indicat pentru vaccinarea copiilor de la 4 ani și adulți până la 65 de ani. Cursul de vaccinare constă în trei doze conform schemei: 0-1-4. O schemă alternativă pentru o protecție rapidă constă din două doze cu un interval de 1-2 luni, ultima doză fiind administrată cel mult 2 săptămâni înainte de a intra în focarele naturale ale infecției.

Vaccin de cultură concentrat (produs de Institutul de Poliomielită și Encefalită Virală, Moscova, Rusia, tulpina Sofiyin). Primul diferă în sensul că poate fi folosit de la vârsta de 18 ani. Cursul de vaccinare constă în două doze cu un interval de 5-7 luni. Prima revaccinare se face cu o singură doză de vaccin după 1-2 ani, a doua și ulterior - în trei ani.

«FSME-Immun-Inject» (pr-va Immuno AG, Austria în compania companiei Baxter, SUA). Produs sub formă de doze de seringă, volumul dozei - 0,5 ml pentru toate vârstele. Protejează împotriva ambelor variante de infecție - Europa și Orientul Îndepărtat. Cursul de vaccinare constă în 2 doze, care se administrează la un interval de 2 săptămâni până la 1 lună (după această vaccinare, 95% dintre cei vaccinați sunt protejați). Prima revaccinare se efectuează la 9-13 luni după a doua doză; repetarea repetată - 3 ani de la introducerea celei de-a treia doze. Poate fi administrat concomitent cu imunoglobulina. Nu are restricții de vârstă.

Cea mai răspândită și are o vastă experiență în aplicarea "Encepur" (pr-va Chiron Behring, Germania, tulpina virulentă K23).

Din cele anterioare diferă prin prezența unei scheme de vaccinare suplimentare - trei doze conform schemei de 0-1-3 săptămâni. A doua diferență este un număr ușor mai mare de reacții adverse datorate prezenței gelatinei în vaccin.

Toate aceste vaccinuri au o activitate imunogenă mare. La două săptămâni după introducerea ultimei doze de vaccinare primară, 90 până la 97% din vaccinuri sunt imune.

Prevenirea de urgență, adică prevenirea după o mușcătură de căpușe, poate fi efectuată cu ajutorul imunoglobulinelor. Termenul pentru o astfel de prevenire este limitat la trei zile, după care devine lipsit de sens.

În Rusia, există:

Imunoglobulină împotriva encefalitei encefalite transmise de căpușe (Pr-Biomed-Perm, Rusia). Introduceți intramuscular, o dată la vârsta de 12 ani - 1 ml, 12-16 ani - 2 ml, 16 ani și peste - 3 ml.

Imunoglobulină împotriva encefalitei provocate de căpușe (din serul calului), în Rusia.

FSME-Bulin (Immuno AG, Austria).

Eliberați în sticle de 1, 2, 5 și 10 ml. Pentru a preveni (înainte de mușcăturile de căpușe) injectarea unei doze de 0,05 ml pe kg de greutate corporală. Acțiunea începe în 24 de ore și durează o lună. O reintroducere este posibilă pentru o protecție mai lungă.







Trimiteți-le prietenilor: