Transformarea agrobacteriană este ceea ce, definiția, semnificația, raportul, abstractul,

Transformarea agrobacteriană este o metodă de obținere a plantelor transgenice prin introducerea Agrobacterium (Agrobacterium), o bacterie a solului. formarea unei tumori în timpul infectării plantelor.







Introducerea biotehnologiei pentru producerea intenționată de plante transgenice a accelerat îmbinarea metodelor de obținere a țesuturilor embrionare din celulele și țesuturile din plante prin utilizarea de materiale artificiale nutritive. vitamine, hormoni și microelemente și creșterea acestor țesuturi la o plantă matură cu realizările ingineriei genetice.

Principalul dezavantaj al metodei clasice de schimbare a eredității este că, atunci când două organisme cu diferite genotipuri se traversează, se produce recombinarea reciprocă a genelor valoroase și valoroase din punct de vedere economic. Ca rezultat, soiul creat va fi transferat, în plus față de acele gene care sunt de dorit pentru cercetătorul genetic, și genele care degradează proprietățile soiului.

Atunci când se aplică metoda de transformare agrobacteriană, această problemă este ușor de rezolvat.

Infecția cu agrobacterium

În celula plantei, o varietate de plante care doresc să se îmbunătățească, se introduce o genă valoroasă și o plantă matură este crescută din această celulă. Pentru a introduce o anumită genă în celulă, o plasmidă a bacteriei din sol Agrobacterium este utilizată ca moleculă vectorică. În natură, atunci când sunt infectate cu această specie, bacteriile din plante sunt deteriorate. Ca urmare a diviziunii dezordonate a celulelor plantei infectate, se dezvoltă o tumoare pe aceasta, care este cauzată de un segment al ADN-ului (ADN care cauzează tumora) a genomului de plasmidă Ti. Apariția tumorii se bazează pe introducerea TDN în genomul celulei vegetale și schimbarea acesteia în proprietățile celulei (Figura 11). Această caracteristică a TDNC este utilizată pe scară largă în ingineria genetică.

Proiectare vectorială

Destul de înaltă rezoluție Agrobakteriuma Ti-plasmide (peste 20 de perechi de nucleotide tysyach) complică oarecum utilizarea sa în ingineria genetică. Prin urmare, pentru ajustarea plantelor ereditate prin inginerie genetică folosind segmentul TDNK enzimei de restricție obținute, care leagă plasmida cu plasmida pBR 322 (pi-bi-er 322) și se donează. Plasmida artificială creată este oarecum mai mică decât plasmida Ti, iar utilizarea sa este mult mai ușoară și mai eficientă. Astfel de molecule (create de plasmidele artificiale) se numesc construcții vectoriale. Gena vegetativă este transplantată într-un segment al vectorului de transcripție al constructului vector. Ca rezultat TDNK isi pierde capacitatea sa de a provoca tumori deoarece este deja împărțit în două bucăți ale genei străine.







Vector construct care cuprinde TDNK disecă și o genă străină este introdusă în inofensive pentru plante tulpini speciale Agrobakteriuma, Ti plasmid care nu conține TDNK. La infectarea plantelor de către aceste bacterii plasmida Ti Agrobakterium cu transformarea ta un aparat special construiește o genă străină în genomul plantei. Recent, metode pentru introducerea într-o celulă de plantă sau animal a unei gene străine, ca parte a unui construct de vector prin câmp electric grele sau tunuri de gene dezvoltate. Cu toate acestea, aceste metode sunt utilizate numai în cazuri speciale datorită complexității lor tehnice și costului ridicat.

Prepararea unei plante transgenice

Prin conectarea plasmidei Ti (1) obținută din Agrobacterium cu plasmidul (2) cu un situs de restricție unic, se creează o construcție vectorială (3). O genă străină (4) este recombinată într-un segment al TADN al constructului vector și este obținut un vector (5) pe baza plasmidei Ti, care este incapabilă să formeze o tumoare. Acest vector este introdus într-o tulpină specială de Agrobacterium cu o plasmidă Ti care nu conține o regiune de TDNK (6). Atunci când sunt cultivate în condiții artificiale ale agrobacteriilor recombinante (7) create împreună cu protoplastia de plantă, vectorul (8) se recombină în genomul plantei.

Țesutul de țesut

Ca rezultat al împărțirii celulei vegetale transformate se formează un set de celule, care se dezvoltă conform unui anumit program. Un astfel de set este numit un țesut de calus. Celulele individuale de țesut de calus sub influența hormonilor de plante sau a altor substanțe reglatoare încep să se împartă în funcție de un anumit program. Ca urmare, din astfel de celule țesuturile de țesut de fag sunt obținute treptat și normal în toate privințele, o plantă matură transgenică. Cromozomii fiecărei celule conțin o genă transplantată. Prin urmare, atunci când planta transgenică este reprodusă sexual, gena străin transplantată este moștenită.

Prin metoda transformării agrobacteriene, se disting, de exemplu, varietățile de bumbac și cartofi, care sunt rezistente la viermele de cutie și la gâsca Colorado.

Poze (fotografii, poze)

    Fig. 11. Formarea unei tumori pe plante atunci când sunt infectate cu unele specii de Agrobacterium sub influența unui segment de plasmidă Ti TID. TdnC, care se recombina în cromozomul plantei, perturbă programul de diviziune celulară a plantelor
  • Fig. 12. Principalele etape de obținere a unei plante transgenice






    Trimiteți-le prietenilor: