Răspunsuri colorate la proteine
Prezența proteinelor în soluții biologice, sau pot fi determinate prin reacție de culoare, care curg datorită prezenței grupărilor de proteine specifice și legături peptidice.
Reactivi: o soluție apoasă de albuș de ou (proteina de gălbenuș de ou de pui separat de dizolvat în 15-20 de ori volumul său de apă distilată, apoi soluția se filtrează prin tifon, împăturit în 3-4 straturi, și depozitate în frigider, o soluție de hidroxid de 10% sodiu, 30% soluție de hidroxid de sodiu, soluție de sulfat de cupru 1%, soluție de acetat de plumb 1%, acid azotic concentrat, 0,5% ninhidrină soluție de th.
Echipamente: tuburi de testare; o baie de apă sau o lampă de duș.
Sarcina 1. Reacția biuret.
Într-un mediu alcalin proteine și produsele lor de hidroliză - peptidele dau o culoare violet sau roșu-violet, cu săruri de cupru. Reacția se datorează prezenței legăturilor peptidice în proteine:
Intensitatea culorii depinde de lungimea polipeptidei.
- Într-un tub de testare, se toarnă 5 picături de soluție de ou alb, apoi 10 picături dintr-o soluție de alcalină 10%.
- Adăugați 1-2 picături de soluție de sulfat de cupru, amestecați amestecul. Apare colorarea roșu-violet.
Sarcina 2. Reacția xantoproteinelor.
Caracteristica de reacție a unor aminoacizi aromatici (fenilalanină, tirozină, triptofan), precum și pentru peptidele care le conțin. Sub acțiunea acidului azotic, se formează un compus nitro în galben. În plus, derivații nitro pot reacționa cu alcalii pentru a forma o sare de sodiu având o culoare galben-portocalie:
Acest lucru trebuie efectuat într-o hota de fum, având grijă deosebită!
- Într-un tub de testare, se toarnă 5 picături de soluție de albus de ou și ATENȚIE pe perete se adaugă 3-4 picături de acid azotic concentrat.
- Se încălzește cu grijă amestecul. Se precipită un precipitat, care devine galben.
- După răcire într-un tub ATENȚIE pe perete, se adaugă 10 picături dintr-o soluție de NaOH de 30%, culoarea galbenă devine portocalie.
Sarcina 3. Reacția la aminoacizii cu conținut de sulf (reacția lui Fole).
Reziduurile conținând sulf aminoacizi cisteină și cistină sulf clivate prin hidroliză alcalină pentru a forma sulfuri. Sulfurile, care interacționează cu acetat de plumb, formează un precipitat de sulfură de plumb negru sau maro-negru.
- Într-un tub de testare, se amestecă 5 picături de soluție de albus de ou, 5 picături de soluție alcalină 30% și 2 picături de soluție de acetat de plumb.
- Amestecul este încălzit cu grijă pe o lampă de duș la fierbere și se fierbe. După un timp, există o culoare maro-negru sau neagră.
Caracteristica de reacție a grupărilor amino din α-poziție și se datorează prezenței de a-aminoacizi din molecula de proteină. Când proteina este încălzit cu o soluție apoasă de aminoacizi ninhidrină sunt oxidate și se descompun pentru a forma dioxid de carbon, amoniac și aldehida corespunzătoare. amoniac reciclat condensat cu ninhidrină și molecula ninhidrină oxidat pentru a forma un compus cu albastru-violet:
În a face tubul 5 picături de soluție albuș de ou 1% se adaugă 3 picături de soluție 0,5% de soluție ninhidrină și se încălzește până la fierbere. După 2-3 minute, există o culoare roz, rosu si apoi albastru-violet.
Finalizați cercetarea sub forma unui tabel.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: