Etapele istorice ale dezvoltării histologiei

LECTURĂ 1. INTRODUCERE LA CURSUL GISTOLOGIEI

Definiția histology as a science

Obiectivele cercetării histologice

Prepararea preparatelor histologice

Etapele istorice ale dezvoltării histologiei







1. Histologia este știința structurii microscopice și submicroscopice, a dezvoltării și a activității vitale a țesuturilor organismelor animale. În consecință, histologia studiază unul dintre nivelurile de organizare a țesutului țesut viu. Distingeți următoarele niveluri ierarhice de organizare a materiei vii:

· Unități structurale și funcționale ale organelor;

Histologie, ca disciplină academică. include următoarele secțiuni: citologie, embriologie, histologie generală (studiază structura și funcțiile țesuturilor), histologie privată (studiază structura microscopică a organelor).

Obiectul principal al studierii histologiei este corpul unei persoane sănătoase și, prin urmare, această disciplină este menționată ca o histologie umană.

Sarcina principală a histologiei este de a studia structura celulelor, țesuturilor, organelor, a stabili legături între diferite fenomene, a stabili modele generale.

Histologia, ca și anatomia, se referă la științele morfologice, a căror sarcină principală este studierea structurilor sistemelor vii. Spre deosebire de anatomie, histologia studiază structura materialului viu la nivel microscopic și microscopic. În același timp, studiul structurii diferitelor elemente structurale se realizează în prezent, luând în considerare funcțiile pe care le îndeplinesc. O astfel de abordare a studiului structurilor materiei vii se numește histofiziologie, iar histologia este adesea menționată ca histofiziologie. In plus, studiul materiei vii la nivel celular, țesuturi și organe considerate nu numai forma, mărimea și dispunerea structurii de interes, dar de cyto- și histochimie este adesea determinată de compoziția și substanțele care formează aceste structuri. În cele din urmă, structurile studiate sunt de obicei luate în considerare ținând seama de evoluția lor, atât în ​​perioada intrauterină (embrionară), cât și în timpul ontogeniei postembrionice. Aceasta este legată de necesitatea includerii embriologiei în cursul histologiei.

Histologia, ca orice știință, are propriile sale obiecte și metode de a le studia. Obiectele imediate ale studiului sunt celule, fragmente de țesuturi și organe, special pregătite pentru a le studia sub microscop.

2. Obiectivele cercetării sunt împărțite în:

· Vii (celule într-o picătură de sânge, celule în cultură și altele);

· Dead sau fix, care pot fi luate atât de la un organism viu (biopsie), cât și de la cadavre.

În orice caz, după preluarea pieselor, ele sunt expuse acțiunii de fixare a soluțiilor sau de înghețare. Atât obiectele fixe cât și cele științifice sunt folosite în scopuri științifice și educaționale. Preparatele preparate într-un anumit mod, utilizate pentru a studia sub microscop, se numesc preparate histologice.

Specimenul histologic poate fi sub forma:

O tăietură subțire a organului sau a țesutului;

· Smear pe sticlă;

· Imprimarea pe sticlă cu o pauză în organ;

Produs subțire de film.

Un specimen histologic de orice formă trebuie să îndeplinească următoarele cerințe:

· Păstrarea stării de viață a structurilor;

· Să fie suficient de subțire și transparentă pentru a studia sub microscop în lumină transmisă;

· Să fie contrastiv, adică structurile studiate trebuie definite clar sub microscop;

· Preparatele pentru microscopie ușoară ar trebui păstrate pentru o perioadă lungă de timp și utilizate pentru reexaminare.

Aceste cerințe sunt îndeplinite la pregătirea preparatului.

3. Următoarele etape ale preparării unui preparat histologic

Luând un material (bucată de țesut sau organ) pentru a prepara medicamentul. Următoarele puncte sunt luate în considerare: materialul trebuie luat cât mai curând posibil după moartea sau sacrificarea animalului și, dacă este posibil, dintr-un obiect viu (biopsie), pentru a păstra mai bine structura celulei, țesutului sau organului; Eșantionarea pieselor trebuie făcută cu un instrument ascuțit, astfel încât să nu se rănească țesuturile; Grosimea plăcii nu trebuie să depășească 5 mm, astfel încât soluția de fixare să poată pătrunde în grosimea plăcii; marcarea unei bucăți este obligatorie (numele organului, numărul animalului sau numele persoanei, data gardului etc.).

Fixarea materialului este necesară pentru a opri procesele de schimb și pentru a păstra structurile degradate. Fixarea se realizează cel mai adesea prin imersarea unei bucăți în lichide de fixare, care pot fi simple alcooli și formalină și soluția complexă Carnoy, fixativul Zincera și altele. Fixatorul provoacă denaturarea proteinei și astfel oprește procesele metabolice și stochează structurile în starea lor intravitală. Fixarea poate fi, de asemenea, realizată prin congelare (răcirea într-un curent de CO2, azot lichid etc.). Durata fixării este selectată experimental pentru fiecare țesut sau organ.

Turnarea pieselor în medii de etanșare (parafină, celloidină, rășini) sau congelare pentru subțierea ulterioară.







Pregătirea secțiunilor pe dispozitive speciale (microtome sau ultramicrotom) cu ajutorul cuțitelor speciale. Secțiunile pentru microscopie ușoară sunt lipite în diapozitive și pentru microscopie electronică - montate pe rețele speciale.

Colorarea secțiunilor sau contrastului lor (pentru microscopie electronică). Înainte de etanșarea secțiunilor, mediul de etanșare (deparafinarea) este îndepărtat. Contrastul structurilor studiate se realizează prin colorare. Coloranții sunt împărțiți în bază, acide și neutri. Cele mai utilizate pe scară largă sunt coloranții de bază (de obicei, hematoxilina) și coloranții acide (eozina). Adesea folosiți coloranți complexi.

Iluminarea secțiunilor (în xilen, toluen), închisoare în rășini (balsam, polisterol), închidere cu alunecare.

După aceste proceduri efectuate în mod consecvent, preparatul poate fi studiat sub microscopul luminos.

În scopul microscopiei electronice, există anumite trăsături în etapele de pregătire a preparatelor, dar principiile generale sunt aceleași. Principala diferență constă în faptul că pregătirea histologică pentru microscopia ușoară poate fi stocată mult timp și reutilizată. Secțiunile pentru microscopia electronică sunt utilizate o singură dată. În același timp, obiectele de interes sunt fotografiate mai întâi, iar structurile sunt studiate deja pe modelele de difracție electronică.

consistență lichidă din țesuturi (sânge, măduvă osoasă, etc.) sunt realizate sub forma preparatelor frotiu pe o lamelă de sticlă, care este fixat, colorate și apoi examinate.

Din organe parenchimatoase casante (ficat, rinichi, etc.) sunt realizate în amprenta Preparatele sub forma corpului: după interstițiul fracturii sau organ la organ defectoscopie aplicat sticlă diapozitive pe care sunt lipite unele celule libere. Apoi, medicamentul este fixat, colorat și studiat.

În final, unele dintre corpurile (mezenter, PIA) sau de preparate de țesut conjunctiv în vrac sunt realizate prin întindere a filmului sau zdrobirea între cele două geamuri și cu fixarea ulterioară, colorare și turnarea în rășină.

· Microscopia de lumină (puterea de rezoluție de 0,2 microni) este cel mai frecvent tip de microscopie;

· Microscopie ultravioletă (rezoluție 0,1 microni);

· Microscopie fluorescentă (fluorescentă) pentru determinarea substanțelor chimice în structurile luate în considerare;

· Microscopie cu contrast de fază pentru studierea structurilor în preparate histologice nevopsite;

· Microscopie de polarizare pentru studierea, în principal, a structurilor fibroase;

· Microscopie într-un câmp întunecat pentru studierea obiectelor vii;

· Microscopie în lumină incidentă pentru studierea obiectelor groase;

· Microscopie electronică (rezoluție 0.1-0.7 nm), două variante sale translucide (transmisie) microscopie electronică și microscopia de scanare sau de cartografiere raster dă suprafață ultrastructures.

Metodele histochimice și citochimice permit determinarea compoziției substanțelor chimice și chiar a cantității lor în structurile studiate. Metoda se bazează pe efectuarea reacțiilor chimice cu reactivii utilizați și substanțele chimice din substrat pentru a forma un produs de reacție (contrast sau fluorescență), care este apoi determinată prin lumina sau microscopie cu fluorescență.

Metoda de centrifugare diferențială permite studierea organelurilor individuale sau chiar a fragmentelor izolate din celulă. Pentru a face acest lucru, o bucată din organul testat este triturat, umplut cu soluție salină fiziologică și apoi dispersat într-o centrifugă la diferite viteze (de la 2 la 150 mii) și obținând fracții de interes, care sunt apoi studiate prin diferite metode.

Metoda de interferometrie face posibilă determinarea masei uscate de substanțe în obiecte vii sau fixe.

Metode Immunomorfologichesky permite utilizarea reacțiilor pre-imune efectuate pe baza interacțiunii antigen-anticorp, pentru a determina o subpopulație de limfocite pentru a determina gradul de celule străinătății efectua tipizarea histologice a țesuturilor și organelor (determinarea histocompatibilitate) pentru transplantul de organe.

Metoda de cultură celulară (in vitro, in vivo) este creșterea celulelor într-un tub de testare sau în capsule speciale în organism și studiul ulterior al celulelor vii sub microscop.

Unitățile utilizate în histologie

Pentru a măsura structurile în microscopie luminoasă, se utilizează în principal micrometre: 1 μm este 0,001 mm; electron microscopie foloseste nanometri: 1 nm este 0.001 μm.

5. În histologia dezvoltării histologice se disting trei perioade convenționale:

Perioada Domikroskopichesky (în IV. BC. E. La 1665 YG) asociate cu numele lui Aristotel, Galen, Avicenna Vesalius, caracterizat uterină și încercările de izolare la animale și oameni de țesut neomogene (tare, moale, lichide și așa mai departe) și folosind metode de disecție anatomică.

O atenție deosebită a fost acordată studiului structurii celulei. Jan Purkinje a descris prezența "protoplasmului" (citoplasma) și a nucleului la animale, iar puțin mai târziu R. Brown a confirmat prezența unui nucleu în cele mai multe celule animale. Botanistul M. Schleiden a devenit interesat de originea celulelor. Rezultatele acestor studii au permis T. Schwan, pe baza rapoartelor lor, să formuleze o teorie celulară (1838-1839) sub forma a trei postulate:

· Toate plantele și animalele sunt compuse din celule;

· Toate celulele se dezvoltă conform principiului general din citoplastie;

· Fiecare celulă are o activitate vitală independentă, iar activitatea vitală a organismului este suma activității celulelor.

Cu toate acestea, în curând R. Virchow (1858) a clarificat faptul că dezvoltarea celulelor se realizează prin împărțirea celulei originale (orice celulă din celulă). Dispozițiile elaborate de T. Shvan, teoria celulelor sunt relevante pentru ziua de azi, deși este formulată diferit.

Teorii moderne ale teoriei celulare:

Celula este cea mai mică unitate a celor vii;

· Celulele de organisme animale sunt similare în structură;

· Proliferarea celulelor are loc prin divizarea celulei originale;

· Organismele multicelulare sunt ansambluri complexe de celule și derivații lor, unite în sistemele de țesuturi și organe, legate de forme celulare, umorale și nervoase de reglementare.

· Îmbunătățirea în continuare a microscoapelor, în special crearea obiectivelor achromatice, a permis descoperirea în celule a unor structuri mai mici:

· Centrul de Cell Hertwig, 1875.;

· Dispozitiv de plasă sau placă din Golgi, 1898;

· Îndoiți mitocondria, 1898

Stadiul actual de dezvoltare a histologiei începe în 1950, când microscopul electronic a fost folosit pentru a studia obiecte biologice, deși microscopul electronic a fost inventat mai devreme (E. Ruska, M. Knoll, 1931). Cu toate acestea, pentru stadiul modern al dezvoltării histologice, introducerea nu numai a unui microscop electronic, dar și a altor metode este tipică: cito- și histochimie, istoriografia și alte metode moderne menționate mai sus. În acest caz, se folosește de obicei un complex de metode diferite, ceea ce face posibilă compilarea nu numai a unei imagini calitative a structurilor studiate, ci și pentru obținerea unor caracteristici cantitative exacte. În mod special utilizate pe scară largă în prezent sunt diferite tehnici morfometrice, inclusiv sisteme automate de prelucrare a informațiilor primite prin intermediul calculatoarelor.







Articole similare

Pagina anterioară

Pagina următoare

Trimiteți-le prietenilor: