Ica de luare, fixare și compactare a materialului pentru examinarea histologică

1. Luarea unui material histologic: Sau dintr-un animal viu (biopsie, puncție) sau dintr-un cadavru. Din organul corespunzător, decupați bucăți mici (0,5 x 1 x 1 cm) - unde 0,5 este grosimea. Se ia nu mai târziu de 3 ore. după moarte la temperatura camerei (la +4 nu mai mult de 12 ore). Materialul este luat la limita unui țesut sănătos și bolnav. Apoi puneți în bloc (lichid de fixare).







Dacă cercetarea toxicologice (pentru suspectate otrăvire) - doar material proaspăt (stomac și conținutul său, o bucată din intestinul subțire și conținutul său, rinichii, ficatul și zonele de leziuni evidente) Studiu .Bakteriologicheskoe - material proaspăt (ganglionii limfatici, splina, rinichi, ficat, uneori osul tubular și zonele cu modificări vizibile)

Material 2.Fiksatsiya: Fixarea se face pentru a preveni procesele de autoliză (auto-digestie) țesuturi. Acest lucru se realizează prin denaturarea (coagularea) proteinelor. Catchers: 1.Formalin (nu este potrivit pentru studii privind glicogen); 2 Alcoolul (70%) (3-4 săptămâni), magazine de droguri nu sunt potrivite pentru cercetarea privind grăsimile; 3 clipuri sofisticate (formate din mai multe componente bazate pe picric la tine ) .4 Acid osmic (pentru microscopie electronică)

3. Deshidratare: probele sunt deshidratate (altfel etanșantul hidrofob nu poate penetra țesutul). Pentru a face acest lucru, ei "cheltuiesc" pe o baterie de alcooli - 70%. 80%. 96%. 100% etanol - timp de 24 de ore în fiecare alcool. Probele sunt apoi îmbătrânite într-un amestec de etanol-xilen și xilen pur.

4. Etanșarea. Apoi probele sunt compactate, astfel încât în ​​viitor acestea pot fi tăiate pe un microtom. Adesea, parafina sau celloidina sunt folosite ca substanțe de etanșare. Umplere: puneți probele într-un amestec de xilen-parafină și apoi în parafină lichidă timp de 1-2 ore la 52-56 o C. Dați parafină, răcire, întărire; Tăiați blocul cu eșantionul închis și fixați-l pe un cub de lemn. Utilizați, de asemenea, umplutură de rășină, gelatină și congelare.







2. Tehnica de fabricatie a histozei, colorarea si concluzia.

Apoi, secțiunile sunt pregătite cu ajutorul unui microtom: 1. Cuburile sunt introduse într-un dispozitiv special - un microtom - care servește la pregătirea de felii. 2. a) Utilizarea sistemului mecanic micrometric obektoderzhatel împreună cu un cub mișcări pentru fiecare pas o anumită distanță (de ex. 10 microni), b) A Un cuțit microtom, îndreptate la un unghi față de suprafața blocului de parafină a fost tăiat de acesta printr-un corp în strat subțire (felie) de o anumită grosime. Felii sunt așezate pe suprafața apei calde pentru împrăștiere, apoi pe diapozitiv.

Înainte de colorare mostre gratuite de ceară prin efectuarea de solvent baterie de xilen, alcool 100%, 96%, 80%, 70%, 60%, apă (2-5 min) (acest număr se termină în apă dacă este apoi utilizată pentru colorarea ochelari subiect cu felii au fost plasate pentru scurt timp în soluția colorantă, se clătește cu apă, tratat cu o soluție de alt colorant (dacă este folosit prea) și se spală din nou cu apă solubil în apă colorant).. Prepararea deshidratată din nou (prin efectuarea alcoolilor bateriei cu creșterea concentrației) și apoi se aprinde (în carbol-xilen și xilen) - pentru a elimina excesul de vopsea. În cele din urmă, o picătură de balsam canadian (în cazul unei tăieturi) sau ulei de cedru (pentru frotiuri de sânge) este aplicat preparatului și acoperit cu o alunecare de acoperire.

Coloranți histologici (bază, acid, special). În primul rând, colorarea cu coloranți de bază, aceștia culorizează miezul. coloranți de bază: hematoxilină - pete nuclee culoare mov; carmine - în roșu; thionina - în albastru. Coloranți acizi (citoplasmatici pătată): eozină - în roz; portocaliu - în portocaliu; aurance - în galben; indigo carmin - albastru. coloranți speciali (colorant selectiv): picrofucsin - pete de țesut conjunctiv roșu, galben odihnă; amestec Mallory - pete țesut conjunctiv în albastru; Sudan - vopsele de grăsimi; mutsikarmin - pata mucus in purpuriu; thionină - mucus în albastru.







Articole similare

Trimiteți-le prietenilor: