Principiul. Sub acțiunea enzimei plasmocoagulazei, se activează sistemul natural de coagulare a sângelui (plasminogenotrombin).
Prepararea plasmei proaspete. Steril de sânge luate dintr-o inimă de iepure într-o cantitate de 3 ml se introduce într-o eprubetă cu 2 ml dintr-o soluție sterilă de 5% citrat de sodiu se amestecă și se centrifughează pentru sedimente celule sanguine timp de 10 min la 1500 rot / min.
Plasma este aspirată, diluată de 5 ori cu soluție salină sterilă și turnată în tuburi sterile de 0,5 ml.
Cursul studiului. O bucla a culturii de agar zilnic a tulpinii de testare, care este suspendată în plasmă, este introdusă în tub. Trepiedul cu tubul este plasat într-un termostat la 37 ° C și rezultatele înregistrate după 1, 2, 4 și 18 ore de incubare.
Evaluarea rezultatelor. Apariția pe fundul unui tub cu cheag de tip gel, de orice dimensiune, este considerat un rezultat pozitiv al reacției. Lipsa coagulării plasmei timp de 18 ore este considerată ca un rezultat negativ. Ca un control, se recomandă să se pună reacția cu tulpini deliberate de coagulare și necoagulabile și, de asemenea, să se lase un tub cu plasmă nelocuită.
Identificarea finală a S. aureus necesită stabilirea a încă două teste. În prima etapă, prezența plasmocoagulazei este determinată în tulpini. Dacă după aceea tulpina nu poate fi identificată, se determină suplimentar unul dintre următoarele două semne suplimentare: prezența ADN-ase (care este preferată) sau capacitatea de fermentare a manitului în condiții anaerobe.
În prezența unor rezultate pozitive în reacția de plasmă de coagulare și cel puțin unul dintre cele două teste preliminare (pigment Lecithinase) tulpina de testare pot fi legate de specia S. aureus (2-3 variante).
Absența plasmocoagulazei și cel puțin unul dintre primele două semne sugerează că tulpina nu aparține S. aureus (variantele 5-7).
Discrepanțele dintre rezultatele reacției plasma-coagulare, pe de o parte, și cele două teste preliminare - pe de altă parte (4 și 8 variantelor de realizare) necesită stabilirea unuia dintre cele două teste suplimentare (DNază sau fermentarea manitol în condiții anaerobe). În cazul în care rezultatele rezultatele testelor suplimentare cu reacție de plasmă de coagulare este fie o tulpină aparținând speciei S. aureus la rezultate pozitive (alternative 4a și 4b), sau nu are legătură cu acesta (dacă este negativ, exemplele de realizare 8b și 8d) sau negativă (aparținând altor tipuri, variantele 4b și 4d) ale rezultatelor.
Nu se recomandă identificarea S. aureus numai pe baza rezultatelor unui test.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: