CARACTERISTICILE GENERALE ALE REPREZENTANȚILOR CORONAVIRIDAE
Coronavirusurile sunt virusuri care conțin ARN care au un pachet de lipoproteine. Coronavirusurile conțin lanțuri plus ARN și au un mecanism unic de replicare. Ele nu au activitate de neuraminidază și nu se leagă la receptorii care conțin acid sialic.
O familie de coronavirusuri, inclusiv un gen, coronavirusul, include viruși ai virusului bronșitei infecțioase (IBV) virusuri infecțioase (IBV); gastroenterita porcină infecțioasă (IHD) - virusul gastroenteritei transmisibile porcine (TGEV); coronavirusul diareea vițeilor nou-născuți (DNT) - coronavirusul diareei virale neonatale (NCDCV); virusul sifilisului din Turcia (TBI) - virusul maladiei turcoanelor (TBDV), un sinonim pentru enterita coronavirus de curcan; coronavirus de câini (PIC) - coronavirus canin (CCV); Coronina infecțioasă a virusului peritonitei de pisici (FPI) - Virusul peritonite infecțioase de pește (FIPV). Ele provoacă boli la oameni și la animale.
Virion sferic cu un diametru de 80-160 nm, o cochilie cu mari distanțe mari între ele. Spiral nucleocapsid cu un diametru de 10
Plus lanțul. O moleculă. greutate moleculară 5,5-10 6. Poliadenilat, are capac, poate servi ca mRNA.
Proteine structurale
E2 glicoproteină cu cameră (180-200 kD). Nucleocapsid fosfoproteină N (50-60 kD). Matricea glicoproteinei E1 (23-30 kD).
Fuziunea celulelor, hemaglutinarea (nu toate coronavirusurile), proteina kinaza.
Locul ARNm înmuguririi
Membrana SHER și aparatul Golgi. Un set suprapus de mRNA cu un capăt 3 'comun. Când gena este tradusă, se formează o polipeptidă la capătul 5 'al fiecărui mARN.
Coronavirusurile sunt un grup separat de virusuri, care diferă în multe privințe de ortomix și paramyxovirusuri.
Genomul viral este un ARN 1-catenar (lanț plus), de 16 până la 21 nm în lungime. 6,5-11 md. Ca și în cazul altor viruși care conțin ARN plus-șir, ARN-ul genomic al coronaviruselor este contagios atunci când este introdus în celulă prin eucariote. Moleculele principalului fosfoprotein N (50-80 kD), care interacționează cu ARN genomic, formează un nucleocapsid flexibil, extins cu simetrie spirală. În funcție de planul secțiunii pe secțiuni subțiri ale virionilor, asemenea nucleocapside cu formă spirală sunt văzute sub forma unei "gogoși" sau a unui filament tubular cu un diametru de 9-11 nm. Nucleocapsidul este înconjurat de o membrană lipoproteinică formată dintr-un reticul endoplasmic brut (ER) sau un aparat Golgi al celulelor infectate. Plicul constă dintr-o bilatilă lipidică care conține 2 glicoproteine virale E (matrice E1) și o glicoproteină în formă de cenușă (E2).
Glicoproteina matricei E1 (20-30 kDa) este o proteină transmembranară, este cufundat adânc în teaca nu va fi transferat la membrana plasmatică. Se acumulează în aparatul Golgi, unde încep să se dezvolte coronavirusurile. AT la El neutralizează infecțiozitatea particulelor virale numai în prezența complementului. Glicoproteinei E2 (180-200 kDa) glicoproteine seamănă cu virusuri mari care conțin un ARN-minus catena: imersat în bistratul lipidic doar o mică parte a moleculelor glicoproteici, în timp ce cea mai mare parte a moleculei este pe exterior. Glicoproteină E2 este structural peplomerov alb-com și, prin urmare, joacă un rol antiretseptora prin care oră viral Tietz atașat la receptorii de pe suprafața celulei. AT E2 pentru a neutraliza virusul infecție onnost și prezența E2 pe membrana plasmatică de coronavirusuri infectate le face celulele sensibile la limfocitele citotoxice. Scindarea glicoproteinei E2 cu proteaze de celule gazdă pe 2 polipeptide cu mol. 90 kD induce capacitatea virusului de a induce fuziunea celulară. Ca și alte virusuri, ARN plus blocați în virion coronavirrusuri nu ARN dependent de ARN polimerază.
Cele mai multe coronaviruses are afinitate semnificativă pentru celulele epiteliale ale tractului respirator și tractului gastrointestinal. Caracteristic, coronaviruses intestinale provoca slab, infecție care apar în liniște la adulți și severe, care sunt însoțite de boala diaree la sugari si coronavirusuri zhivotnyh.Mnogie tinere provoca infecții persistente in vivo.
Variabilitatea și relația variabilă. Există 4 grupuri de coronavirusuri, care diferă în proprietățile AG. În cadrul fiecărui grup de viruși există încrucișări constante AH, totuși, virușii dintr-un grup diferă ușor în funcție de specificitate față de sindromul gazdă și clinic.
Cultivare. In celula coronaviruses cultura au perioadă de latență de 6 până la 7 ore. Când celulele infectate cultura coronavirusuri celule virulente se pot sli- vatsya, formând sincințiu sau lizat. In unele culturi de celule, umane zarazhen- GUVERNAMENTAL coronavirus (HCV -22 gE), particule virale sunt formate în timpul de câteva săptămâni, dar moartea celulelor, și se observă efectul citopatic. Multe coronavirusuri provoacă o infecție persistentă in vivo. Unul dintre factorii capabili de conversie a infecției cu coronavirus abortive în virulentă permisivă este tripsină. Pentru producția de virus și atinge CPE în mediul de cultură, coronavirusul infectate RNC trebuie să adauge coronavirus sin.Etot trip- reproduce in mod normal in intestin, unde trip-sin prezent care promovează clivaj polimerică glicoproteina E2.
Replicarea. Coronavirusurile au unele caracteristici unice în transcripția ARN, compoziția proteinelor și mecanismul de asamblare. Ei intră în celulă prin endocitoză de absorbție. După aceea, ARN-ul genomic este atașat la ribozomi, ceea ce duce la sinteza ARN-polimerazei ARN-dependente. La transcrierea ARN-ului genomic, se formează un ARN complementar cu catenă negativă cu lungime întreagă. Sinteza acestuia este finalizată în 5-6 ore după infecție. Lanțul minus al ARN servește ca un șablon pentru sinteza ambelor noi ARN-uri genomice și subgenomice. Sinteza glicoproteinelor E1 și E2 apare la polizomii atașați la reticulul endoplasmatic, dar există diferențe în transcripția lor. În aparatul Golgi sau pe membrana plasmatică, E2 este scindată de proteazele celulei gazdă în 2 glicopeptide mari (90 kD). O astfel de scindare este necesară pentru manifestarea infecțiozității virusului. Glicoproteina E1 este de asemenea sintetizată pe polizomi legați la membrane. Este surprinzător faptul că compoziția oligozaharidică a E1 în diferite coronavirusuri variază foarte mult.
Asamblarea virionilor. coronavirus nucleocapsidei Spiral format în citoplasmă celulelor infectate prin interacțiunea dintre moleculele de ARN și proteine nou sintetizate N. dimensiuni nucleocapsida aparent definite proprietăți proteice N. este capabilă de legare-Stu.
Virionii de coronavirusuri se formează prin înmuierea din membrana SHER și / sau din aparatul Golgi. Coronavirusurile încep să se cupleze numai pe acele membrane intracelulare pe care sunt localizate moleculele E1. Virionii se formează pe membranele SHER și pe aparatul Golgi. Capacitatea coronaviruselor de a părăsi celula fără liza este un factor important care oferă posibilitatea unei infecții moderate (nu citopatice).
Virionii coronavirusului sunt particule sferice sau pleomorfe cu diametrul de 60-200 nm. Acestea constau dintr-un nucleocapsid de simetrie spirală și o cochilie lipoproteică, pe suprafața căreia există protuberanțe clavate cu lungimea de 12-24 nm, formând o asemănare cu corona solară. Densitatea flotantă a virionilor în zaharoză 1,15-1,18 g / cm 3. Vyrions sunt sensibile la solvenți și detergenți de grăsime. În compoziția virionilor, proteinele 3-4 cu un mol. 18-220 kD. În celulele infectate s-au găsit 5-7 specii de ARN subgenomic, care conțin secvențe unice la capătul 5 '. Toate sunt acoperite și poliadenulate. Fiecare ARN subgenomic asigură sinteza unei singure proteine, dimensiunea căreia corespunde potențialului de codificare al secvenței 5'-terminale, care este absent în ARN subgenomic mai scurt. Maturarea virionilor are loc prin înmuierea membranelor reticulului endoplasmatic și a aparatului Golgi.
Familia Coronaviridae este formată din două genuri: Coronavirus și Torovirus.
1. Genul Coronavirus. Proteina structurală majoră este proteina coronavirus nucleotidă (N), glicoproteina membranei (ME1) și glicoproteina vârf (Process) (S. E2). În plus față de aceste proteine, inerente în toate coronavirus, coronavirus uman au detectat suplimentar RNC și glicoproteină (gp 65), care nu este asociat cu nici un sunet de la S. N polipeptide. In tulpina prototip al coronavirusului, coronavirusul uman și OS43, provoacă diaree la viței nou-născuți, sunt comune K determinanții care-gura Creditat in RN, RAC și confirmate prin detectarea seroconversiei la pacienții cu infecție coronavirus, și pentru piesele. OS43 și NCDCV (vițeii coronavirusiri) sunt mai similare în interior decât pe antigen de suprafață.
2. Genul Torovirus (din torus torus latin) include virușii Berne (virus prototip) și Breda. Virionii torovirusurilor sunt particule pleomorfe (sub formă de disc semi-lunar, biconcave, rotunjite) cu un diametru de 120-140 nm. Ele constau dintr-un nucleocapsid toroidal de simetrie spirală și un plic de lipoproteine.
Genomul constă din aproximativ 20 de mii de nucleotide. În virioni, s-a detectat fosfoproteina N (18-20 kD) de sulfocucleoză, fosfoproteina matrice M (37 kD). Monat la proteina proteină neutralizează activitatea infecțioasă și HA a virusului. Torovirusurile sunt transmise prin calea fecal-orală și cauzează, în principiu, leziuni ale intestinului la cai, bovine și oameni. Studiile serologice au arătat o circulație largă a torovirusului la porci, ovine, caprine, iepuri și șoareci sălbatici. Între torovirusurile de cai, bovine și oameni există o relație AH.
Peritonita infecțioasă a pisicilor
Peritonita infecțioasă a pielii
Caracteristicile agentului patogen, semne clinice și modificări pathoanatomice
pisici First coronavirusiri (agentul cauzal al peritonitei infecțioase) prezintă o relație antigenic cu coronavirusul canin, în timp ce a doua pisici coronavirusiri FICV (agentul cauzal al pisicilor enterită) nu este virusul peritonitei infecțioase (FIPV) si nu are nici o relație cu coronavirusul canin. Patogenitatea celor două variante ale virusului diferă foarte clar. Astfel, cele două grupe cunoscute de coronavirusuri de pisici, care sunt foarte apropiate proprietăți biologice și biochimice, dar diferă brusc în patogenitatea lor in vivo. coronavirusuri enteropatogenic de pisici (FeCV) afectează epiteliul intestinal și provoacă la animalele tinere cu ușurință pro-tech, dar enterită extrem de contagioasă. La o pisică bolnavă se dezvoltă imunitatea, dar uneori există o persistență a agentului patogen. Un alt grup constă din tulpini de FIPV. provocând peritonită severă, ca dreapta-lo, fatala la pisici cu vârsta de la 6 luni la 2 ani. În plus față de enterocite, acești viruși afectează macrofagele. AT la virusul nu creează stabilitate, chiar agravează cursul bolii. Caracteristic este dezvoltarea vasculitei. Conform titrul de anticorpi nu poate diferenția în mod fiabil între cele două forme de infecție coronavirus.
Ca tulpini de referință ale virusului sunt cunoscute pc. Welcom. au trecut 11 pasaje în cultura celulelor pulmonare ale embrionului pisicilor și a celulelor intestinale pc.79-1683.
Activitatea antigenică este caracterizată prin următoarele date. Pisicile infectate pe baza răspunsului imun și semnele clinice sunt împărțite în 3 grupe. In data de 1, cele mai numeroase, au fost înregistrate la pisici anticorpi titruri de 1: 160 - 1: 10000 la-Corolarului absența semnelor clinice. Dintre aceste grupuri, pisicile (grupul 2) au fost găsite sporadic, la care sa observat o creștere rapidă a titrurilor AT și dezvoltarea semnelor clinice urmate de deces. Pisicile al treilea grup pentru o lungă perioadă de timp uitat sănătoși, la titluri au ajuns treptat un platou, iar apoi au dezvăluit paralizia membrelor posterioare, reduce titrul de anticorpi și de moarte.
Condițiile experimentale pot fi reproduse cu ușurință după infectare de 24 de ore după infectare agentul patogen a fost localizat la nivelul amigdalelor și intestinul subțire, și în cele din urmă infecția sa extins la intestin orb și colon, ganglionii limfatici mezenterici si ficatul. Virusul ar putea fi detectat în spălările din orofaringe și din fecale, de la 2-4 și 3-5 zile după infecție, respectiv, timp de 14 zile de observare. Modificările patologice în amigdalele pisicilor infectate au fost caracterizate prin infiltrarea neutrofilelor polimorfonucleare și a macrofagelor, procese exudative.
Cresterea pisicilor coronavirusiri intestinale sht.79-1683 în celulele embrionare de pisici este inhibată în prezența a 1 ug / ml actinomicină D. In aceste culturi nu se formează virusspetsifichnaya ARNm și scăderi infecțioase recoltare a virusului cu mai mult de 100 de ori. Spre deosebire de aceasta, reproducerea PKI sht.79-1146 virus antigennorodstvennogo, independent de cazul în care-absența acetinomicină. Astfel, diferența fundamentală dintre aceste coronavirusuri de pisici este că acestea sunt diferite în funcție de funcțiile de bază codificate.
A relevat o relație interesantă între pisici virulență coronavirusiri și tropismul celular, tulpini virulente afecteaza in principal monocite, avirulent - replica in epiteliul intestinal. Virusul pătrunde membranele mucoase ale tractului respirator și gastrointestinal, în fluxul sanguin și afectează macrofage. Procesul patologic are loc cu participarea AT AT, deci crearea unui vaccin este dificilă. Vacile uciși cresc doar sensibilitatea la infecție. Vaccinuri ineficiente și vii.
Proprietățile de hemaglutinare și hemadsorbție nu au fost studiate.
Reacțiile RZGA și PH sunt sugerate. În plus, a fost elaborată metoda competitivă a EISA pentru determinarea AT la virusul peritonitei de pisici. Pentru acest mAb au fost obținute și testate pentru virali arhimedice trei componente: proteină și peplomera glicoproteină. Pune-telno reacționează într-un EY8A competitiv 98,5% probe de ser au avut anticorpi la capsidei și 4,8% - la o peplomera proteină.
IMUNITATEA ȘI PROPHILAXIA SPECIALĂ
Se propune un vaccin. Biomasa virusului este obținută prin cultivarea celulelor splenice ale animalelor infectate în condiții de suspensie. Vaccinul împotriva peritonitei infecțioase a pisicilor se dezvoltă pe baza unui mutant de virus sensibil la temperatură. Cu administrare intranazală, virusul se replică numai în tractul respirator superior și este inactivat în alte organe. Atunci când este testat pe pisici în experimental condiții-TION din cele 20 animale vaccinate după provocare bolnav 3, iar în grupul de non-vaccinate - toate 12 dintre ei au fost uciși 10. vaccinate pisici Obra apel de ser și secretorii BHA, precum și a dezvoltat un răspuns imun celular . Experimentele pe teren au confirmat siguranța și eficacitatea vaccinării. În Anglia, un vaccin viu Primucell IPV este utilizat din mutantul ts F I PV p.D F -2. Se injectează în nas. Se recomandă imunizarea puiilor la vârsta de 16 săptămâni și după 3-4 săptămâni.
Această metodă se bazează pe tipizarea tulpinilor amplificate de ADNc valoare virus fragment 400 bp regiunea N-terminală a genei glicoproteinei 52, care este tratat cu enzime și al lungimii fragmentelor de restricție a enzimei determinate prin electroforeză în SDS. Fragmentele diferitelor tulpini ale virusului sunt comparate între ele. Diferența în structura lor AG a fost confirmată în PH.
Diagnosticarea probelor clinice de coronavirus de curcan poate fi efectuată cu succes folosind sonde monocatenare monocanale, preparate prin PCR, specifice bovinelor.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: