Cu ajutorul PCR în materialul biologic, este posibil să se identifice secvențele de nucleotide ale ADN tipice pentru agentul cauzator al pertussis # 151; Bordetella pertussis. Spre deosebire de metoda de cultură, PCR permite identificarea unui microorganism semnificativ din punct de vedere etiologic chiar și atunci când există numai bacterii moarte în materialul biologic. În același timp, atunci când se utilizează această metodă de înaltă tehnologie, este posibil să se obțină rezultate fals pozitive și false-negative.
În cursul clinic al tusei convulsive, se disting etapele catarale, paroxismice și stadiul de recuperare.
În stadiul cataral, boala este subclinică, adică manifestările clinice tipice pot fi absente și boala nu poate fi recunoscută la timp. Tusea este prezentă, dar este intermitentă. În plus, pot fi observate fenomene catarale, uneori dificil de distins de simptomele tipice ale unei infecții virale respiratorii obișnuite.
În cea de-a doua etapă a bolii, tusea are un caracter paroxistic: paroxismele tipice duc la un atac de sufocare inspiratorie sau vărsături. Boala poate apărea, de asemenea, sub formă ușoară (fără atacuri caracteristice tusei) la copii, adolescenți și adulți vaccinați anterior. Infarcturile tusei paroxistice se produc adesea noaptea, creșterea frecvenței și severității manifestărilor la înălțimea bolii și persistența timp de 2-6 săptămâni.
Faza de recuperare, caracterizată prin îmbunătățirea treptată a stării pacientului, durează, în medie, între 7 și 10 zile (4-21 zile). Tusea paroxistică devine mai puțin frecventă și de obicei dispare în 2-3 săptămâni. Cu toate acestea, o tuse non-paroxistică poate tulbura pacientul pentru încă 2-6 săptămâni și uneori mai lungă.
Copiii vaccinați sau vaccinați parțial sub vârsta de 12 luni au cel mai mare risc de a dezvolta complicații grave și care pun viața în pericol, până la un rezultat letal. La copiii mici, tusea poate avea o intensitate minima sau chiar absenta, in timp ce apneea poate fi singura manifestare a bolii.
Pentru a reduce probabilitatea unei performanțe tehnice eronate și interpretarea greșită a rezultatelor PCR care ar putea duce la un diagnostic eronat, CDC recomandă următoarele:
- Efectuarea diagnosticului PCR este recomandabilă numai la pacienții cu simptome tipice ale pertussisului. În ceea ce privește persoanele fără simptome tipice, chiar și în cazul unui contact cu o persoană infectată este o probabilitate mare de rezultate fals-pozitive. Astfel, o decizie privind efectuarea profilaxia post-expunere după un contact intim pertussis confirmat cu un pacient nu trebuie să se bazeze pe rezultatele materialului diagnostice PCR obținute din fața de contact.
- Cea mai optimă perioadă de timp pentru efectuarea diagnosticării PCR # 151; acestea sunt primele trei săptămâni de la începutul tusei, deoarece la sfârșitul acestei perioade cantitatea de ADN bacterian scade rapid, ceea ce crește probabilitatea rezultatelor false false. Diagnosticul PCR după cel puțin 5 zile de tratament cu antibiotice poate fi însoțit și de rezultate false-negative. Cu toate acestea, durata reală a posibilității de obținere a rezultatelor pozitive după administrarea de antibiotice nu este exact stabilită.
- Materialul biologic pentru stabilirea PCR trebuie obținut prin aspirație sau prin luarea unui frotiu din peretele din spate al nazofaringei. Materialul din cavitatea nazală, de regulă, este inadecvat pentru efectuarea diagnosticului PCR datorită cantității inacceptabile de ADN bacterian din acest material.
- În procesul de diagnosticare PCR, este necesar să se excludă cât mai mult posibil contaminarea materialului biologic prin molecule de ADN de B. pertussis. care sunt o componentă integrală a unor vaccinuri. Ingestia accidentală a moleculelor de ADN din B. pertussis de la suprafețele înconjurătoare poate provoca, de asemenea, rezultate fals pozitive. Pentru prevenirea contaminării încrucișate în timpul preparării vaccinurilor, sunt necesare următoarele activități:
- Pregătirea vaccinurilor și vaccinarea în locuri situate la distanță de locul de prelevare pentru diagnosticarea PCR.
- Materialul trebuie luat în mănuși.
- Dezinfecție obligatorie utilizând hipoclorit de sodiu 10%.
- Utilizarea unui mediu de transport semi-fluid sau transportul materialului rezultat într-o stare uscată fără un mediu de transport.
- Deoarece diagnosticul PCR a pertussis nu este o procedură standardizată în laboratoare clinice, înainte de a efectua diagnostice PCR este necesară pentru a specifica care (țintă) particular loci utilizate în acest laborator specific. Interpretarea rezultatelor PCR, în special în probe cu valori ridicate ale ciclurilor prag trebuie efectuate ținând cont de semnele și simptomele bolii, precum și informațiile epidemiologice disponibile.
Metodele de formulare PCR, loci (obiectivele) folosite, precum și criteriile de interpretare a rezultatelor finale în diferite laboratoare diferă semnificativ una de cealaltă. În plus, nu există valori unificate de graniță ale rezultatului pozitiv. Valori ridicate ale ciclurilor de prag ale PCR apar în mod tipic la niveluri scăzute ale ADN-ului amplificat, ceea ce poate indica prezența unei infecții, dar poate fi, de asemenea, o indicație de contaminare a materialului biologic al moleculelor de ADN din exterior în timpul materialului de admisie. Prin urmare, este extrem de important să se aplice recomandările în practică pentru a unifica abordările pentru diagnosticarea PCR cu pertussis.
Cele mai bune practici pentru medicii de îngrijire a sănătății cu privire la utilizarea reacției de polimerizare a lanțului (PCR) pentru diagnosticarea pertussis.
Diagnosticarea PCR, tuse convulsivă, recomandări, CDC
Trimiteți-le prietenilor: