Cu privire la problema decontaminării laboratoarelor PCR

Una dintre problemele cele mai urgente ale ramurilor microbiologice ale organizațiilor de îngrijire medicală din întreaga lume este contaminarea zonelor de laborator de către microorganisme, produsele lor metabolice, toxine, și în Vol. H. Acizi nucleici, dintre care distribuția devine relevantă în zone care prezintă reacție în lanț a polimerazei (PCR). Reacția PCR - o metodă extrem de sensibil, teoretic, permite detectarea prezenței numai o copie a unui fragment ADN al microorganismului dorit în prezența a milioane de alte molecule, ceea ce face absolut necesară în special atentă dispozitiv de laborator PCR și evidențiază problema care se încadrează mediului în amestecul de reacție de molecule de ADN capabile Să servească ca ținte în reacția de amplificare și să dea rezultate fals pozitive.







Intrarea în tubul de reacție de urme ale ADN-ului pozitiv (ampliconi produșilor de amplificare ADN specific; standard de ADN utilizat drept control pozitiv, ADN-ul pozitiv eșantion clinic) conduce la amplificarea în timpul fragmentelor de ADN specific PCR și, în consecință, apariția unor rezultate fals pozitive.

Două tipuri de contaminare pot apărea în timpul lucrului:

contaminarea încrucișată din eșantion către eșantion (în timpul procesării probelor clinice sau la digestia amestecului de reacție), conducând la rezultate fals pozitive sporadice;

contaminarea produselor de amplificare (ampliconi), care are cea mai mare valoare, adică. a. în ampliconi PCR se acumulează în cantități mari și sunt ideale pentru produsele reamplifikatsii.

De regulă, este foarte dificil să se determine sursa de contaminare și necesită timp și bani considerabili. Există mai multe modalități de a combate acest fenomen neplăcut. Unul dintre acestea este efectul fotochimic asupra moleculelor ADN. Pentru a face acest lucru, utilizați psoralen sau isopsoralen, care sunt activate prin iradiere pe termen scurt cu lumină ultravioletă. Moleculele ADN modificate de acești compuși nu pot participa la reacția de amplificare.







Cu toate acestea, după cum știm, nici o reacție chimică sau biologică nu este 100% eficace și, respectiv, după inactivarea produșilor de amplificare a miliarde de copii ale fragmentului amplificat de cel puțin câteva rămân intacte, ceea ce reduce semnificativ valoarea acestei abordări. În plus, există întotdeauna un risc de contaminare încrucișată din eșantion pe eșantion în timpul preparării probelor. Astfel, această metodă permite doar într-o oarecare măsură să elimine sursa de contaminare și nu garantează rezultate fals pozitive.

eliminarea tuturor reactivilor din zona contaminată;

utilizarea materialelor studiate în toate etapele intermediare de prelucrare (cu excepția celor inițiale);

curățarea generală, dezinfecția chimică și ultravioletă a tuturor suprafețelor spațiilor de laborator;

dezinfecția mobilierului, a suprafețelor de lucru, precum și a suprafețelor corpurilor de instrumente și a echipamentelor prin metode chimice și prin radiații ultraviolete.

Astfel, utilizarea unităților cu pulsuri de ultraviolete cu lămpi cu xenon permite:

asigură siguranța angajaților laboratoarelor bacteriologice care lucrează cu agenți biologici ai grupurilor de patogenitate III-IV;

pentru decontaminarea laboratoarelor biologice din toate tipurile de microorganisme, inclusiv tulpinile lor rezistente și formele rezistente la medicamente multidrucite, cu eficiență mai mare de 99,9%;

asigură calitatea și fiabilitatea preparării probelor și a analizei PCR ca urmare a inactivării extrem de eficiente a contaminanților microbiologici;

reduce semnificativ numărul de reacții false pozitive la stabilirea analizelor PCR;

Creșterea productivității laboratoarelor PCR datorită reducerii semnificative a timpului pentru dezinfecție.

Este evident că noua tehnologie cu plasmă optică pulsată și instalațiile bazate pe aceasta sunt mult mai eficiente, mai fiabile și mai convenabile în utilizarea instrumentului de prelucrare a laboratorului în comparație cu alte metode existente.

Citiți cel mai apropiat număr al revistei "Directorul șefului KDL"







Trimiteți-le prietenilor: