Determinarea motilității spermatozoizilor.
Kinezisgramma - este procentul de spermatozoizi în ejaculat cu mobilitate diferită. Numărul de spermatozoizi mobili este principalul criteriu pentru evaluarea utilității acestora. Folosind fereastra fonio numărate nativ de preparare 100 spermatozoizii cu marcare cantitatea normală de motilitate (normokinospermiya) atenuat (gipokinospermiya) și staționare (akinospermiya).
Numărul de spermatozoizi cu motilitate normală (mișcări translatie la o viteză de 50 m / s), în mod normal este de 80-90%, cu un slăbit (mișcări de translatie lente) - 10-12% din fixă - 6-10%.
Prezența în spermatozoizi a mișcărilor vibraționale - dischinuspermia în normă nu este observată.
Pentru a obține o kineză dinamică timp de 24 de ore, determinați procentul de spermatozoizi mobili la anumite intervale. Un număr normal de spermatozoizi și o kineză normală la rate scăzute de cineză dinamică indică o capacitate slabă de fertilizare (astenospermie).
O picătură de material seminal depuse pe foaia de sticlă, rotiți-l cu susul în jos și a pus pe o lamelă de sticlă, cu o semilună pentru meniurile agățat, astfel încât scăderea a fost în centrul locașului. Marginile lamelei este pătată cu vaselina și determinarea microscopică procentului de normo-, hipo- și akinospermii după 3, 6, 12 și 24 de ore de la ejaculare. Testul se efectuează la temperatura camerei. În mod normal, la fiecare 3 ore, normokinospermia scade cu 20%.
Un test pentru "revitalizarea" spermatozoizilor.
Cu acinespermia în ejaculare proaspătă peste 30%, este posibilă o încălcare a fertilității, dar numai dacă este imposibil să se "reînvie" spermatozoizii. Încercarea nereușită de a "reînvia" mărturisește necrospermia spermatozoizilor imobili. Ca soluții de stimulare ("animație"), puteți utiliza următoarele:
1) Soluție Becker: Glucoză - 3 g, Na2 HP04 - 0,6 g NaCl - 0,2 g KH2 P04 - 0,01 g, apă distilată - 100 ml (pH = 7,8);
2) soluție de cafeină 0,1% (nu puteți folosi cafeina în fiole);
3) soluție de arginină 0,1 M, etc.
Testul pentru "revitalizare" ar trebui să fie efectuat în paralel cu oricare două dintre aceste soluții stimulative.
Cu o pipetă de 1 ml, se aspiră 0,1 ml de spermă (bine amestecată), apoi se ia 0,9 ml din orice soluție stimulantă prin aceeași pipetă. Suflați conținutul pipetăi pe sticlă de ceas, amestecați bine, pregătiți picăturile picăturilor pentru a determina kinegramul dinamic și examinați-le sub microscop. După 5-10 minute, spermatozoizii imobili, dar vii încep să se miște. Procentul de spermatozoizi mobili este determinat în 24 ore la fiecare 2-3 ore.
Numărătoare de spermatozoizi în 1 ml și în tot volumul de ejaculare.
Numărul de spermatozoizi din ejaculare se numără în camera de numărare a lui Goryaev. amestecat temeinic spermă câștigă în melanzher pentru leucocite la semn cu 0,5 (diluție de 20 de ori) și apoi pentru a forma marcajelor 11 pentru lichidul de diluare și umple camera Goryaev.
Pentru diluarea spermei, utilizând oricare dintre următoarele lichide: carbonat acid de sodiu: bicarbonat de sodiu - 5 ml, formol concentrat - 1 ml, apă distilată - 100 ml (poate fi preparat fără bicarbonat de sodiu, care este adăugat pentru a dizolva mucus); 2) Rubenkova lichid: principal fuksin- 0,1 g, colorant Romanovsky - 2 ml, 1% clorură de sodiu 100 - 0,02 ml acid 0,2 ml glicerină 0,1 ml, rectificat alcool etilic concentrat carbolic ml. Avantajele lichidului de la Rubenkov sunt că petele se spele pe spermatozoizi. Aceasta, împreună cu calcularea numărului total de spermatozoizi, vă permite să definiți spermogramă. Folosind ocularul 7X și 40X cristalinului, conta toate sperma in cinci patrate mari, dispuse în diagonală (ia în considerare doar capul spermei, care se află în interiorul pătrat) și multiplicată cu 1 000 000. Numărul rezultat corespunde numărului de spermatozoizi în 1 ml de material seminal investigate. și metoda de testare-tub poate fi utilizat pentru numărarea în spermatozoizii Goryaeva cameră de numărare.
Numărul de spermatozoizi din întregul ejaculare se determină prin înmulțirea numărului de spermatozoizi în 1 ml pe volum ejaculat (în ml). În mod normal, numărul de spermatozoizi din ejaculare depășește 150 de milioane.
Metoda de numărare în camera lui Goryaev poate fi utilizată pentru a determina numărul de spermatozoizi mobili. La această spermă diluată izotonică soluție caldă de clorură de sodiu și numărate într-o celulă de numai spermatozoizii imobili, iar apoi numărul total de spermatozoizi cantitatea fixă se scade.
În mod normal, 1 ml de spermatozoizi conține 60-120 de milioane de spermatozoizi, în hiperspermie - peste 120 de milioane cu oligospermie - de la 30 la 60 de milioane.
Pentru a determina numărul real de spermatozoizi cu oligospermie,
2-3 numărătoare de control cu intervale
3-4 săptămâni. La același bărbat, numărul de spermatozoizi este supus fluctuațiilor fiziologice mari.
Spermatograma este totalitatea rezultatelor unui studiu cantitativ al spermei. Pentru a determina spermograme preparatele Pappenheim colorate cu hematoxilină și eozină și numărate cu un sistem de imersie microscop minimum 200 de spermatozoizi. În acest caz, puteți utiliza aparatul pentru a număra leucograma. În sperma normală, spermatozoizii normali sunt de 80-85%, incluzând variante fiziologice care se caracterizează fie printr-un cap neobișnuit de îngustat, fie redus sau mărit. Formele tinere sau imature ale spermatozoizilor au un reziduu citoplasmatic (guler) în jurul capului și gâtului, sunt observate cu un act sexual frecvent și nu sunt capabile de fertilizare. Vechi formează spermatozoizii caracterizate hipercromicității, achromia sau cap vacuolizare apar in sperma de abstinenta dupa prelungita si nepotrivit pentru fertilizare.
Prin degenerativă forme (patologice) transporta spermatozoizii cu capete deformații: megalospermatozoidy (gigantospermatozoidy) spermatozoizii cu două capete, dar cu un gât și o coadă, și, de asemenea, fără gât, cu una sau mai multe cozi fără coadă, coada fără cap și altele.
La bărbații sănătoși cu sperma normala forme patologice de sperma nu sunt de obicei găsite, dar, uneori, numărul lor în timpul fertilității normale poate ajunge la 20%, din care aproximativ 15% dintr-o anomalie cap, 3-5% - corp 2-5% și - coada.
Cu spermatogeneza patologică și infertilitatea secretoare, spermatozoizii se găsesc predominant cu patologia capului și a gâtului. Patologia cozii este de obicei de origine excretorie, apare atunci când spermatozoizii trec prin deferente patologice modificate. Într-o spermatogramă normală, celulele de spermatogeneză reprezintă 0,5-2%.
Pentru materialul seminal microscopie fazovokontrastnok diluat cu soluție de clorură de sodiu izotonică, cu o cantitate mică de soluție apoasă 1% din Rivanol sau acid fenolic pentru a reduce motilitatea spermei.
Prin microscopie fluorescentă folosind portocaliu acridină ca fluorocrom la o diluție de 1 în 20.000 nativ sperma diferențiate cu ușurință viu colorate în verde, mort și vopsite în portocaliu spermatozoizii. Distingem formele normale și patologice ale spermatozoizilor datorită caracteristicilor lor morfologice cu ușurință.
Regulile de lucru privind contrastul de fază și microscoapele fluorescente sunt descrise în instrucțiunile pentru aceste dispozitive. Formele morfologice ale spermatozoizilor în contrastul de fază și microscopia luminescentă sunt luate în considerare în același mod ca și în microscopia cu lumină convențională.
Manual pentru lecții practice privind diagnosticarea clinică de laborator / Ed. prof. MA Bazarnova, prof. VT Morozova .- Școala K. Vyshcha, 1988.- 318 p. 212 bolnavi.
Trimiteți-le prietenilor: