la cursul "Microbiologie cu fundamentele epidemiologiei și metodelor de cercetare microbiologică"
secțiunea "Morfologia microorganismelor"
Un ghid pentru studenți
Departamentul 060110 «Diagnosticare de laborator»
pe ghidul de studii practice
la cursul "Microbiologie cu fundamentele epidemiologiei și metodelor de cercetare microbiologică"
secțiunea "Morfologia microorganismelor"
compilate de profesorul de microbiologie A.V. Palienko
Lucrarea prezentată este compilată în conformitate cu Standardul de Stat și caracteristicile de calificare ale specialității 060110 "Diagnosticul de laborator". Este construit în conformitate cu cerințele pedagogice și metodice moderne. Acest manual va asigura independența studenților în munca lor în clasele practice de microbiologie și va facilita procesul pedagogic. Pentru a stăpâni în mod efectiv materialul există întrebări și sarcini de testare pentru auto-controlul elevilor. Pentru fiecare lecție este indicată cantitatea de muncă practică. Algoritmii, diagramele, schemele care sunt puse în funcțiune vor contribui la sistematizarea și consolidarea cunoștințelor studenților cu privire la acest subiect.
Metoda manuală este studiul microscopic al microorganismelor, care permite studierea proprietăților tinctoriale și morfologice ale purității culturii microb selectate, localizarea microorganismelor în frotiurile detecta structurile celulare - spori, capsule, determina microbul mobilitate diferentierea bacteriilor acidorezistente. Toate aceste semne sunt necesare pentru identificarea microorganismului. Cu ajutorul acestei metode este posibilă confirmarea diagnosticului clinic al bolilor infecțioase.
Manualul este destinat utilizării în cursurile practice din secțiunea de microbiologie "Morfologia microorganismelor", precum și pentru munca independentă a studenților la domiciliu.
Examinator. Glinskaya EV PhD Profesor asociat al Departamentului de Microbiologie și Fiziologie a Plantelor, Facultatea Biologică, SSU. N.G.Chernyshevsky
Introducere în atelier ...................................................... .6
Răspunsuri la sarcini de testare .............................................. 31
Clasele de laborator se desfășoară în camere special amenajate, care au o conexiune electrică la fiecare loc de muncă, precum și o chiuvetă cu apă de la robinet. Suprafața meselor de lucru este acoperită cu sticlă pentru o dezinfecție mai bună. Fiecare elev are un loc de muncă permanent, pe care trebuie să existe echipament necesar pentru a îndeplini o sarcină specifică, un registru de lucru, un stilou și un creion. Pentru lucrurile personale este atribuit un loc special.
La începutul lecției, elevii se familiarizează cu o sarcină specifică, prezentată în manualul de instruire, notează principalele tehnici din registrul de lucru și apoi procedează la realizarea lucrării sub supravegherea profesorului. Rezultatele studiilor sub formă de desene, descrieri ale morfologiei microorganismelor sunt înregistrate într-un notebook și lucrarea este prezentată profesorului pentru verificare.
Datorită faptului că, în clase practice, elevii lucrează cu bacterii vii culturi, coloranți anilină, produse chimice, și de a folosi aparate electrice (lumini) și o lampă de alcool, acestea trebuie să respecte normele de securitate de bază (anexa №1,2).
Toate însărcinările efectuate de studenți sunt efectuate independent, în conformitate cu sarcinile stabilite în manualul de instruire.
INTRODUCERE ÎN PRACTICĂ
Microscopul (figura 1) este un dispozitiv optic pentru studierea microobiectelor. Laboratoarele de laborator sunt adesea echipate cu microscoape MBI-1. În laboratoarele de microbiologie științifice și practice folosesc microscoape branduri interne: BDM - 1, IBI-1, IBI-2, IBI-3 Biolam P-1 și altele. Acestea sunt concepute pentru a studia forma, structura, mărimea și alte semne ale microorganismelor, a căror mărime nu este mai mică de 0,2-0,3 microni. Deoarece micro-ar fi foarte mici, ele sunt măsurate în micrometri (microni - o miime de milimetru) și, prin urmare, studiul lor este posibilă numai cu ajutorul unor microscoape care asigură o creștere suficient de mare. Mărirea totală a microscopului este alcătuită dintr-un produs de mărire a lentilei și a ocularului. De obicei, la studii microbiologice pentru a obține o creștere utilă în 600-1000 de ori folosind lentile cu o mărire de 90-100 de ori și ocularele, mărind imaginea de 7-10 ori.
Lentilele sunt împărțite în apă uscată și scufundate (scufundate). Când lucrați cu obiecte uscate între lentila frontală și obiectul studiat, există aer. În acest caz, având în vedere diferența dintre indicele de refracție al geamului obiectiv și al aerului, unele dintre razele luminoase deviază și nu intră în obiectiv.
Lentilele de imersie sunt desemnate cu literele O.I. și cifrele x90 și x100.
Microscoapele moderne au o serie de îmbunătățiri. Astfel, un microscop binocular cu două tuburi permite observarea unilaterală a ambilor ochi.
Pentru a studia obiecte necolorate, se utilizează un dispozitiv de contrast de fază. cu care puteți obține o imagine clară a contrastului de microorganisme transparente, incolore. Când lumina trece prin preparatul colorat, intensitatea luminii se schimbă (amplitudinea undei luminoase), care este ușor prinsă de ochi. Atunci când un fascicul de lumină trece printr-un obiect nevopsit, transparent, se schimbă numai viteza mișcării sale; faza de deplasare a fasciculului luminos, care nu poate fi detectată de ochi. Principiul dispozitivului de contrast de fază constă în traducerea oscilațiilor invizibile ale luminii în amplitudine vizibile.
Într-o serie de studii speciale, în special în studiul structurilor intracelulare ale microorganismelor, se utilizează microscopie luminescentă. bazată pe capacitatea anumitor obiecte cu o colorare specială a fluorochromurilor de a străluci în lumină cu undă scurtă (ultraviolet, albastru, etc.). Fluorocromii includ galben acridină, pironină, portocalie acridină. Microscopia fluorescența este realizată cu un microscop obișnuit, sursa de somn-bzhennym de raze ultraviolete și un set de filtre, FISIONABIL-lungimi de undă mai scurte.
Cele mai avansate instrumente, care fac posibilă obținerea unei creșteri utile în obiect în 200-500 mii și mai multe ori, sunt microscoapele electronice. în care în loc de razele de lumină se utilizează un fascicul de electroni. Cu ajutorul microscoapelor electronice este posibil să se ia în considerare moleculele de proteine.
1 - ocular, 2 - tub,
4 - revolver de lentile,
5 - un tabel de subiect,
7 - micro-șurub, 8 - macro-rotor
9 - oglindă, 10 - bază
SESIUNEA PRACTICĂ №1
Metode simple și complexe de colorare. Colorarea medicamentelor folosind metoda Gram. Metode de preparare a coloranților.
Studentul ar trebui să știe:
- siguranța în laborator (laborator) de microbiologie (anexa nr. 1);
- cerințele pentru spațiile și echipamentele din laborator (anexa nr. 2);
- caracteristic zonei "murdare" și "curată" a laboratorului. Lista de camere și funcția lor,
- cerințele de lucru în laboratorul bacteriologic,
- prevenirea specială a laboratoarelor,
- etapele pregătirii pregătirii, fixarea sa: specie și scop,
- metode simple de colorare,
- metode complexe, esența metodei Gram,
- Caracteristicile de colorare Gram, coloranți și reactivi,
- Prepararea de soluții apoase saturate și coloranți.
Studentul trebuie să poată:
- livrarea de material patologic. Material pentru agenții biologici patogeni (PBA),
- recepția materialului în registru,
- prelucrarea deșeurilor și a obiectelor de sticlă de laborator,
- comportamentul în "accident" în laborator,
- prepararea unui preparat bacterian,
- culoarea medicamentului prin metoda lui Gram,
-microscopia preparatelor colorate utilizând un sistem de imersie,
- respectarea muncii sigure cu culturi microbiene vii,
- stație de lucru și des. substanțe.
Etape de lucru independente în clasă:
1. Pregătiți preparatele și colorați-le cu o metodă simplă și folosind metoda Gram
2. Preparate pentru microscopie cu imersie
3. Procesați locurile de muncă și mâinile
4. Desenați rezultatele microscopiei în jurnal
Retete pentru prepararea colorantilor
1. Carbolic fuchsin Tsilya:
- soluție saturată de alcool de fucsină de bază - 10 ml
- soluție de acid carbolic 5% - 90ml
Atenție vă rog! Acidul carbolic este turnat în vopsea și nu invers. Amestecul este agitat, filtrat și drenat într-o fiolă
- fucsin de bază în pulbere - 1 gr
- acid carbolic cristalin -5 g
- alcool 96% - 10 ml
- apă distilată - 100 ml
2. Soluții de alcool saturat (inițial):
- alcool 96% - 10 ml
Amestecul este plasat într-un termostat timp de câteva zile până când se dizolvă complet. Se agită zilnic, se depozitează cu dopuri din sticlă măcinată
3. Fuchsine Pfeiffer:
- fuchsin Tsilya - 1 ml
- apă distilată - 9 ml
Pregătiți-vă imediat înainte de utilizare, tk. soluția este instabilă.
4. Carte despre Sinev:
- 1% soluție alcoolică de violet cristalin:
pentru 100 ml de alcool 96% se adaugă 1 g colorant uscat și 3 ml glicerol
Benzi de hârtie de filtru sunt impregnate cu o soluție și uscate.
ETAPELE DE PREGĂTIRE A PREPARATULUI
1. Pregătirea frotiului
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: