Metoda poate fi utilizată în medicină, în special în transplant, și menține sistemul imunitar al destinatarului, atât înainte, cât și după transplant și transplantul într-un timp mai scurt. Destinatarului i se oferă pre-pregătire cu transplantul ulterior al organelor și țesuturilor. În treapta de pretratare în eritrocite beneficiare izolate care apoi încărcate antigene de histocompatibilitate din clasa I, derivate de la donator, destinatarul este administrat parenteral încărcat de eritrocite și în transplant utilizarea efectivă de la același donator. 1 tab.
Invenția se referă la domeniul imunologiei și poate fi utilizată atât în transplantul de organe și țesuturi umane, cât și în viitor în tratamentul pacienților cu cancer.
Este cunoscut faptul că transplantul convențional, chiar și cu un pre-tratament, au condus la următoarele complicații: 1) respingerea organului transplantat (care, în cazul organelor vitale poate duce la deces destinatarului); 2) modificare a statutului imunologic al pacientului din cauza reacțiilor - grefă contra gazdă sau gazdă vs grefă, care, la rândul său, duce la apariția diverselor complicații ale infecțiilor secundare, și cu care organismul nu poate face față; 3) organe de șoc toxic (inimă, ficat și rinichi) a destinatarului și transplant de sine la un rezultat al „protecției grefă medicală“, în scopul de a obține respingerea de frânare.
Metodele sunt cunoscute pentru transplantul de insule pancreatice in diabet, unde scopul inhibării alogenice respingerea țesutului primitor (uman) s-a adăugat o soluție de globulină antitimocitară umane, de exemplu: \ Hu Y.-F. Gu Z.F. Zhang H.D. et al. transplantul de lslet la pacienții cu diabet zaharat de tip i din China. " (Diabetes 1989, vol 38 Suppl 1 p 316).
Dezavantajul metodei este încălcarea sistemului de recunoaștere imunologică în recipient, efectul pe termen scurt al unei astfel de "protecții" asupra țesuturilor transplantate și încălcări ale sistemului de coagulare a sângelui.
Toți pacienții cu excepția un singur copil, obținut chimioterapie de întreținere și / sau radioterapie pentru infuzie de măduvă osoasă alogenă (aproximativ 6-7 zile înainte de transplant) ca anti-respingere pre-tratament preventiv. Donatorii pentru 3 pacienți au fost adaptate fenotipic pentru toate HLA-A, B, Dr, Dw loci loci, 9 alți donatori au fost slab compatibile cu primitorul și ales în mod clar un singur locus HLA-A sau B și Dw loci. După transplant toți pacienții au fost supuși reacției profilaxie grefă - contra-gazda a bolii, care a inclus oferind metotrexat și prednison, în asociere cu ciclosporină-A (6 pacienți), globulina antitimocitară (5 pacienți) sau anti-CD5 imunotoxină al catenei de ricin (1 pacient).
Această metodă este aleasă de noi ca un prototip și are următoarele dezavantaje.
1. Nevoia de donator histocompatibil, cel puțin un locus HLA.
2. Utilizarea chimioterapiei și / sau radioterapiei ca o "pre-pregătire" a beneficiarilor cu 6-7 zile înainte de transplant, ceea ce conduce în plus la deteriorarea celulelor sanguine și a celulelor din tractul gastro-intestinal.
3. Utilizarea agenților imunosupresori puternici capabili să rupă diviziunea celulară, cum ar fi ciclosporina-A, metotrexatul etc.
4. Eliminarea celulelor imunocompetente (seria T) cu globulină antithymocyte sau imunotoxină anti-CD5 cu lanțul A de ricină în destinatari. Această manipulare duce la întreruperea interacțiunilor intercelulare și slăbește apărarea antiinfecțioasă a corpului.
5. Durata extrem de scăzută a "vieții" copiilor (aproximativ 2 ani) după astfel de proceduri complexe și periculoase pentru corpul copilului.
Scopul metodei propuse este de a elimina dezavantajele de mai sus. Scopul este atins prin aceea că, într-o metodă de transplant de organe și țesuturi prin pre-tratament destinatarului urmat de transferul efectiv de organe și țesuturi relevante în etapa de pretratament eritrocitelor beneficiare izolate care apoi încărcate antigene de histocompatibilitate din clasa I, derivată de la donator, administrat parenteral la destinatar, aceste încărcate eritrocite și în stadiul de transplant adecvat, se utilizează același donator.
În metoda propusă, succesul transplantului de organe și țesuturi se realizează menținând în același timp sistemul imunitar al destinatarului, atât înainte, cât și după transplant, este absolut sigur pentru pretratarea (care este validat clinic) și lipsa nevoii de selecție atentă a donatorilor.
Metoda propusă este după cum urmează.
1. pre-tratament atunci când destinatarul este luat din sânge venă (la om, de aproximativ 5-10 ml). Izolați celulele roșii din sânge. țesut donor simultan transplantat sau organ este izolat într-un mod convențional, clasa histocompatibilitate 1 solubil antigeni, de exemplu, prin metoda Strominzhera (Strominger JL / Structura produselor complexului major de histocompatibilitate la om și șoarece / Prog. Immunol. N 4, p. 541-554 1980), care apoi "încarcă" celulele roșii din sânge ale destinatarului. (Există modalități diferite de celule „de sarcină“ antigeni străini - de exemplu, „combinate“ ox celule roșii din sânge și anticorpul monoclonal / Berthold F. Schumacher R. Schneider A. et al./ indepartarea celulelor neuroblastom din maduva osoasa printr-un anticorp monoclonal rosetting directă tehnica / Transplantul măduvei osoase 4, 273-278, 1989). Apoi, astfel de „încărcate“ celule roșii din sânge sunt administrate la destinatar, la sistemul imunitar nu este doar celulele roșii din sânge, dar, de asemenea, toate capturate antigenele lor (inclusiv antigene solubile histocompatibilitate 1 clasa donator) va fi perceput ca fiind „propria lor“, pentru că acum ei nu vor merge prin calea endozomale comune tuturor antigenele exogene căzuți, și va fi percepută ca o „interne“ antigene endogene față de care nu produc anticorpi.
2. Transplantul real al celulelor sau țesuturilor de la un donator neînrudit. Această procedură se efectuează conform metodelor uzuale practicate la 7 zile după pre-preparare.
Metoda propusă face posibilă depășirea histocompatibilitate barierele nu numai între specii genetic strâns legate de organisme, menținând în același timp imunitatea destinatarului, așa cum sa demonstrat în experiment, dar, de asemenea, să pună în aplicare în xenotransplantare clinica de insule pancreatice de la iepure adult la pacientii cu o forma severa a diabetului zaharat. Probabil, acest lucru se poate datora faptului că, după histocompatibilitate de pretratament antigenele donator potențial sunt exprimate nu cu antigene de histocompatibilitate clasa II este tipică pentru toți exogen au primit antigene „străine“, ocolind calea endozomale in celule ale sistemului imunitar, și vor fi exprimate ca " lor ", antigeni interni, cu un complex de histocompatibilitate a primei clase. Acest lucru ar trebui să ducă la grefarea ulterioară a organului sau țesutului transplantat.
Exemplul 1. Transplantarea alogenă a hibridomului murinic ICO 31 (care este exclusiv pasivat în șoareci Balb / c) la șoareci hibrid F1 (CBA C57 BL / 6).
La bărbații F1 (CBA C57 BL / 6j) s-a luat sânge. Prin metoda obișnuită, fracția de eritrocite a fost izolată. Volumul final este de 1,5 ml. Antigeni de histocompatibilitate clasa I solubili de la șoareci Balb / c au fost izolați și au încărcat eritrocitele de F1 masculin (CBA C57 BL / 6j). Au fost adăugate 9 ml de mediu 199 și toate acestea au fost administrate intraperitoneal (ip) la 1 ml de 10 șoareci F1 (CBA C57 BL / 6j).
După 7 zile de hibrizi astfel tratate F1 (CBA C57 BL / 6j) au fost administrate intraperitoneal la 15 Mill. Celulele hibridom 31 IPP (passiruemyh exclusiv pe șoareci din linia Balb / c) într-un volum de 3,5 ml.
Ca martor, au fost utilizați hibridoame F1 de sex masculin netratate (CBA C57 BL / 6j) și hibridoame feminine Baib / c convenționale. De asemenea, au fost injectate 15 milioane de celule de hibridom IKO 31 într-un volum de 3,5 ml.
După 10 zile (ca de obicei) la toate femelele Balb / c, ascitele s-au dezvoltat și au început să moară (control pozitiv). La toți bărbații F1 prealabil (CBA C57 BL / 6j), ascitele au început să apară la numai 20 de zile după începerea experimentului (grup experimental), au fost testate în laborator de A.Yu. Baryshnikova (Centrul de Cercetare al Cancerului din cadrul Academiei de Științe Medicale din Rusia), unde sa arătat că acestea sunt celule cu hibridom ICO 31 și lucrează la o diluție de 1:10 000. La șoarecii de control (control negativ) nu au existat abateri de la organele interne pe întreaga perioadă de observație (7 luni). (Datele sunt prezentate în tabel).
Exemplul 2. Implementarea transplantului xenogenetic al insulei pancreatice de la un iepure adult la om.
Lucrarea a fost efectuată pe baza NIIT și IO (Institutul de Cercetări Științifice pentru Transplant și Organe Artificiale) la pacienții cu diabet zaharat sever.
Pacientul din vena ulnară a fost luat sânge - 8 ml. Au fost izolate eritrocitele. De la un iepure specific (pentru fiecare pacient - propriu) antigene solubile izolate de clasa 1 de histocompatibilitate. Ea a fost legată de eritrocite (volumul final al amestecului a fost de aproximativ 6 ml). Și astfel de eritrocite "încărcate" într-un volum de 6 ml (aproximativ 50.000.000 de eritrocite) au fost injectate sub protecția soluției de novocaină în mușchiul rectus abdominis. Această introducere nu a provocat nici o complicație la pacient (sistemul de coagulare-anticoagulant al sângelui, funcția renală, inima, ficatul etc.), iar manifestările alergice au fost absente. După 7 zile, acest pacient a suferit transplant de insule pancreatice precondiționate prin metoda NN. Skaletsky (laboratorul de culturi de țesuturi NIIT și IO) 2 zile.
Exemplul 3. Pacient L. cu vârsta de 45 de ani. Diagnoza: diabet zaharat, formă severă cu afectare a funcției hepatice, angiopatie a extremităților superioare și inferioare. El suferă de diabet de 25 de ani. În anamneză - comă. Transplantul de insulină pancreatică nu a fost efectuat înainte.
Pacientul din vena cubital sângerat - 8 ml. Au fost izolate eritrocitele. Iepurele special (pentru fiecare pacient - a) izolate antigene solubile clasa histocompatibilitate 1. Ea a fost legată de eritrocite (volumul final al amestecului a fost de aproximativ 6 ml). Și astfel de eritrocite "încărcate" într-un volum de 6 ml (aproximativ 50.000.000 de eritrocite) au fost injectate sub protecția soluției de novocaină în mușchiul rectus abdominis. Această introducere nu a cauzat complicații la pacienții (sistem de coagulare-anticoagulare, rinichii, inima, ficat, și așa mai departe. D.) Și fără manifestări alergice. După 7 zile de la acest pacient insulita transplant pancreatic a fost realizat anterior prin metoda NN prokultivirovannyh Skaletsky (laboratorul de culturi de țesuturi NIIT și IO) 2 zile.
La 2 luni după transplant, eficacitatea sa a fost evaluată ca fiind pozitivă. Pacientul a suferit neuropatie, nevoia de insulină exogenă a fost redusă cu 50%. Au existat îmbunătățiri ale funcției hepatice. Pacientul lucrează și până în prezent (a refuzat "concediul medical deschis").
Datele de mai sus indică faptul că metoda este versatil, potrivit pentru transplanturile atât alogenice și xenogeneice și imunologică este perfect sigur.
Metoda de transplant de organe și țesuturi, prin pre-tratament destinatarului urmat de transferul efectiv de organe și țesuturi relevante, caracterizat prin aceea că treapta de pretratare a destinatarului este izolat eritrocite care apoi încărcate antigene de histocompatibilitate din clasa I, derivată de la donator, administrat parenteral la receptor eritrocite încărcate și în etapa transplantul efectiv, folosind același donator.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: