Una dintre cele mai bune, dar în același timp, cea mai consumatoare de timp metoda de diagnostic de Chlamydia este prin izolarea agentului patogen in celulele cultivate tratate cu diverse anti-metaboliți ( „standard de aur“). În acest scop, cultura frecvent utilizate de celule sensibile tratate cu cicloheximidă. Sensibilitatea metodei de cultură în comparație cu PCR este de 70-80%, dar în același timp, este superioară în biologie tehnicile de diagnostic molecular prin specificitate. Literatura de specialitate descrie cazuri detectarea Chlamydia trachomatis prin PCR cu rezultate negative ale testului de cultură, și vice-versa.
- Sarcina cu istoric de anamneză obstetrică.
- Evaluarea eficacității tratamentului antibacterian.
- Detectarea sensibilității și rezistenței la medicamente antibacteriene.
- Detectarea Chlamydia in randul persoanelor infectate cu HIV, cu sau imunodeficiență secundară (pacienți cu cancer după un curs de radiatii si chimioterapie, transplantul de măduvă osoasă, care primesc medicamente imunosupresoare, pacienții cu hepatită virală și tuberculoza).
- Infertilitatea de origine necunoscută.
- Stabilirea etiologiei procesului infecțios cronic al tractului urogenital.
Cultivarea este o metodă de referință pentru evaluarea eficacității tratamentului antibacterian. Atunci când se cercetează bioteste folosind metoda PCR după un curs de chimioterapie, în unele cazuri este posibil să se obțină rezultate "false pozitive din punct de vedere clinic". Acest lucru se datorează faptului că este imposibil să se evalueze fără echivoc viabilitatea și patogenitatea unei celule microbiene bazate pe detectarea unui fragment al genomului său, folosind doar datele metodelor biologice moleculare. În acest caz, în studiul unui material clinic prin cultură, celulele microbiene care au pierdut aceste proprietăți clinic importante nu vor produce creștere în cultura celulară.
Pentru transportul și depozitarea materialului clinic se folosește un mediu nutritiv special (mediu de transport). Se toarnă în flacoane de penicilină de 1 ml și se păstrează timp de 2 luni la o temperatură de + 4 ° C (în camera comună a unui frigider de uz casnic). Compoziția mediului de transport este mijlocul MEM suplimentat cu ser 10% bovin și 50 g / ml antibiotic gentamicin.
Materialul clinic, după transferul în mediul de transport, este depozitat într-un compartiment comun al frigiderului la o temperatură de + 4 ° C și, în termen de două zile, trebuie livrat la laborator.
Procedura de însămânțare- Tratamentul unei culturi celulare de o zi de McCoy cu soluție 1% DEAE de dextran timp de 30 de minute.
- Infecția celulelor tratate cu materialul obținut de la pacienți.
- Centrifugarea celulelor infectate la 2500 g timp de 45 de minute.
- Spălarea celulelor cu mediu nutritiv.
- Adăugarea în celule a unui mediu de creștere care conține cicloheximid.
- Incubați celulele timp de două zile la + 36 ° C.
- Detectarea chlamydiilor în celule prin imunofluorescență directă sau prin PCR.
Timpul real pentru obținerea rezultatelor prin această metodă este de șapte zile.
In prezent, literatura de specialitate este creșterea numărului de cazuri de rezistență Chlamydia la antibiotice (eritromicină, tetraciclină, doxiciclină, fluorochinolone). Valoarea metodei de cultură este că până în prezent este singura metodă care vă permite să alegeți un medicament antibacterian pentru tratamentul infecției cu Chlamydia și pentru a evalua eficacitatea tratamentului cu antibiotice.
Schema metodei de detectare a rezistenței Chlamydia trachomatis la medicamentele antibacteriene- Izolatul izolat izolat de pacient în timpul însămânțării infectează celulele sensibile.
- La celulele infectate, se adaugă un mediu de creștere care conține un antibiotic.
- Celulele infectate sunt incubate timp de 5 zile la o temperatură de + 36 ° C.
Sensibilitatea chlamidiei la un antibiotic se determină prin suprimarea infecției în celulele infectate. Procedura este lungă, durează două săptămâni.
Articole similare
-
Diagnosticul de urgență al Vladivostokului necesită ajutor de urgență - portal medical
-
Cycloferonul este o aplicație pentru psoriazis, o farmacie săptămânală
Trimiteți-le prietenilor: