În prezent, posibilitățile terapeutice includ efectul tratamentului CHD asupra simptomelor clinice ale bolii și pentru a reduce riscul de infarct miocardic, moarte cardiacă prin reducerea dezechilibrului dintre cererea de oxigen miocardic și livrarea acesteia, prevenirea progresiei bolii, restabilirea fluxului sanguin coronarian prin angioplastie coronariană sau revascularizarea miocardului. In ciuda progreselor in tratamentul bolii coronariene, rata mortalitatii de aceasta boala ramane ridicat, ceea ce impune dezvoltarea unor noi abordări în tratamentul bolii coronariene. Terapia genetică, în special prin utilizarea factorilor de creștere angiogenici, este o metodă potențial nouă de tratare a bolilor cardiovasculare. In ultimii ani au existat numeroase studii experimentale de factori ai angiogenezei și primele studii clinice la pacienții cu boală arterială coronariană și boala vasculară periferică [3, 5]. Angiogeneza este un proces complex în mai multe etape de formare a unor noi vase prin înmuiere sau despărțire de cele existente [2, 4]. Angiogeneza constă în mai multe etape succesive: 1) vasodilatație, 2) migrația și adeziunea la proliferarea celulelor endoteliale și 3) se formează un perete vascular trei straturi noi tuburi vasculare care se dezvoltă ca recuperare circulant [4]. Pentru formarea vaselor de sânge mai mari decât capilare necesare migrarea celulelor musculare netede și adeziunea lor la matricea nou format de noi vase. În experiment, modificarea acestor etape poate stimula și inhiba angiogeneza. Printre o serie de factori implicați în reglarea angiogenezei, cel mai important este factorul de creștere vascular endotelial VEGF (factorul de crestere vascular endotelial - VEGF) și omologii săi [4]. VEGF, fiind un inductor major al angiogenezei, este o glicoproteină, crește permeabilitatea vasculară, exercitând selectiv efecte mitogene asupra celulelor endoteliale, este produs de celulele endoteliale în condiții hipoxice [1, 3]. Nivelul de expresie a VEGF scade progresiv după naștere și este minimă în majoritatea țesuturilor adulte, cu excepția locurilor de angiogeneză activă - cum ar fi ovare, uter, piele (creștere a părului). Un nivel ridicat de VEGF în plămâni la adulți poate fi asociat fenestratului endotelial [3]. Cu toate acestea expresia VEGF poate fi reactivat în anumite condiții - cum ar fi prezența ischemiei miocardice, inflamație retiniană, tumoră [1; 9; 10; 12].
Rețeaua capilară a miocardului joacă un rol important în transportul oxigenului și nutrienților către cardiomiocite. Densitatea capilară crescută în miocard asigură o activitate mai mare a fluxului sanguin miocardic, a perfuziei și a metabolismului miocardic în condiții de ischemie. Modificarea densității și a suprafeței de schimb a sistemului capilar al patului microcirculator poate fi indusă de procesul de angiogeneză.
Scopul acestui studiu a fost de a investiga influența VEGF-164 asupra creșterii și dezvoltării, precum infarctul gemomikrotsirkulyatsii de stat deteriorat cauzat de ocluzia descendente anterioare ramură a arterei coronare în peri-infarct, și la distanță de zonele focale ale miocardului în experiment.
Experimentele au fost efectuate pe 22 de șobolani mongrel alb la masculi cântărind 200-250 g. Primul grup de animale a constat din șase șobolani intaci, al doilea grup (n = 8) - animale de control de control, care au produs o ocluzie a arterei coronare descendente anterioare. Cel de-al treilea grup de animale experimentale (n = 8) a fost injectat intravenos cu VEGF-164 la o doză de 0,3 μg / kg și a ocolit artera coronară.
Preparatul VEGF, care este o polipeptidă constând din 164 aminoacizi, a fost administrat la o doză de 0,3 mg / kg după dizolvarea în 1 ml tampon și centrifugare timp de 5 minute. Medicamentul a fost administrat intra-miocardic.
necroză miocardică Experimental reproduse prin ocluzia descendente anterioare stângi arterei coronare (LCA) în sternotomie lăsat sub anestezie cu Nembutal (i.p., 40 mg / kg) într-o ventilație mecanică. Înainte de injectarea anestezicului animalelor transportate atropină 0,04 m 2 / kg pentru a preveni edem la nivelul mucoasei intubarea traheala. Decapitarea a fost efectuată în a 7-a zi după ocluzie în anestezie nembutală.
Pentru a studia starea morfologică a miocardului, a fost utilizată o metodă convențională de colorare cu hematoxilină-eozină.
Hemomicrocirculatory canal microscopic studiat pe preparatele miocardice tratate cu metoda modificată de Gomori S.A.Sisakyanu [7]. Cu micrometru ocular măsurat diametrul mediu al capilarelor (d), densitatea calculată (lungimea totală - L), capilarele de suprafață de schimb (DIC) și capacitatea patului capilar (ERC) pentru țesutul miocardic 1 mm 3.
Procesarea statistică a datelor a fost efectuată în conformitate cu criteriul t al Studentului.
Datele noastre arată că în a 7-a zi după ocluzie în focii necrotice s-au găsit un număr semnificativ de celule necrotice și fragmente izolate ale capilarelor, în timp ce după administrarea de VEGF răspunsului vascular a fost mai pronunțat.
La studiul patului microcirculator al miocardului la animalele intacte s-au găsit capilari paralele și uniform umplut, precum și strivirea transversală a cardiomiocitelor (fig.1).
Fig. 1. Miocardul animalelor intacte. Capilare paralele și spărtări transversale ale fibrelor musculare. 7 x 40.
Animalele de control au fost caracterizate prin prezența a numeroase câmpuri luminoase, lipsite de elemente vasculare. În zonele miocardului adiacent la necroză, s-au detectat capilare deplasate dens și capilare neregulate. În același timp, pereții capilarelor au fost mai intens colorați, mulți dintre ei fiind înclinate, cu contururi neuniforme. În multe domenii de vizibilitate, nu a existat o bandajare transversală completă a fibrelor musculare (figura 2). In miocardul animalelor care au primit VEGF detectate mai aranjament densa de capilare anastomiruyuschih între ele și formând un fel de rețea de capilare în zonele imediat adiacente necroză (Fig. 3). În zonele mai îndepărtate de necroză, capilarele erau situate paralel unul cu celălalt, având cursul corect cu contururi netede.
Fig. 2. Ocluzia arterei coronare stângi. Zona paranecrotică. Contururile capilarelor sunt inegale, culoarea pereților este neuniformă, capilarele formează extinderi microaneurisme. 10 x 40
Fig. 3. Rețeaua capilară formată în locurile de miocard, adiacente necrozei în a 7-a zi după ocluzia arterei coronare. 10 x 40.
aproape că nu diferă de cea la animalele de control în fiabilitate (3,3%, p> 0,1), la un sistem de evaluare morfometrică perinekroticheskoy medii capilare capilare diametru .Otmechalos creștere funcțională densitate din zona capilară (14,7%, p<0,05) и ОПК (12,1 %, р<0,05) в этих участках (табл.1). В более отдаленных отделах миокарда капилляры располагались параллельно друг к другу, их средний диаметр и количество функционирующих капилляров в пределах достоверности не отличались от таковых в перинекротической зоне.
Tabelul 1
Modificări morfometrice în patul microcirculator al miocardului în zona perinrotică cu ocluzie LCA și aplicarea VEG
Parametrii MCH miocardic
Notă: * p <0,05, достоверность разницы с интактными животными; #p <0,01 – достоверность разницы между животными с окклюзией ЛКА и животными, дополнительно получившими VEGF.
În grupul de animale care au primit o injecție prealabilă de VEGF-164, a fost observat un aranjament capilar mai dens atât în zona perinrotică (o creștere de 24,8%, p<0,01), так и в отдаленных от него участках. Морфометрические измерения показали отсутствие изменения среднего диаметра капилляров от таковых у контрольных крыс (2,8 %, р>0,1), cu toate acestea, numărul capilarelor funcționale a atins valori semnificativ mai mari atât în zona perinrotică (24,8%, p<0,01), так и отдаленных от него участках. Именно благодаря увеличению количества функционирующих капилляров наблюдалось значительное увеличение ОПК (25,1 %, р<0,01).
Una dintre direcțiile promițătoare în cardiologia experimentală este tratamentul ischemiei miocardice prin neovascularizarea inimii cu așa-numiții "angiogene", mediatori ai inducției vaselor. Angiogeneza miocardică are loc în organism și poate fi stimulată prin ischemie acută, precondiționare ischemică [1, 6]. În acest proces, inducerea angiogenezei este însoțită de activarea unui număr de factori de transcripție - Staf 3; SP-1 Pax-5 [4]. Un număr de studii au arătat că sistemul vascular colateral protejează miocardul ischemic în ocluzia coronariană acută.
În prezent, există multe întrebări nerezolvate privind metodele de introducere a VEGF în scopul angiogenezei terapeutice. Rezultatele studiilor efectuate utilizând factori de angiogeneză sunt contradictorii. In primul studiu a arătat o creștere a toleranței la efort în timpul administrării de proteine intracoronariana factor de creștere fibroblastic bazic (b-FGF) la pacienții cu vârsta peste 65 de ani cu angină severă. In Revasc studiu randomizat a comparat 2 grupe de pacienți cu angină severă administrarea VEGF-121 gena constând din adenovirus peretelui ventriculului stâng după minitoranotomii observat testul treadmill date îmbunătățite (timp a crescut înainte de apariția durerii) înainte de apariție a subdenivelarea segmentului ST mai mare de 1 mm) a fost observată după 26 săptămâni [8]. Administrarea intravenoasă sau administrare în „fluxul sanguin arterial distal“ factori de creștere angiogenici poate provoca reacții sistemice, de exemplu, creșterea vas în tumorile nedetectate, hipotensiune arterială [2, 3]. În acest sens, efectul injectării intramusocardice a VEGF este de interes pentru a evita un număr de efecte secundare nedorite sistemice. Având în vedere cele de mai sus, în experimentele noastre am testat această metodă de introducere a VEGF.
Rețeaua capilară joacă un rol-cheie în transportul de oxigen către substraturile energetice și cardiomiocite. Densitate crescută capilară în miocard în timpul ischemiei observată, indicând relevanța fiziologică gipoksiindutsirovannogo crește nivelul mitogeni endoteliale si receptorii lor [2, 10]. În special, la 24 de ore după ligarea arterei coronare stângi în condiții experimentale, sa observat o creștere semnificativă a nivelului de VEGF la modelele animale [12]. Se știe că activarea expresiei endogene a VEGF este un răspuns precoce la ischemia miocardică. Acest răspuns, efectuat la nivel molecular, este unul dintre primele mecanisme de adaptare a miocardului la ischemie [1, 3, 13].
In modelele experimentale de necroză și angiogeneza terapia cu factor de VEGF am descoperit ca terapia activeaza factorul numit proces angiogeneza în zona perinekroticheskoy și în zone îndepărtate de necroză prin creșterea numărului de funcționare capilare și suprafețele de schimb ale patului capilar. Severitatea răspunsului vascular la a 7-a zi a experimentului, aranjamentul dens al capilarelor și prezența unor multiple anastomoze care indică activarea circulației colaterale în zona perinekroticheskoy în grupul de control al șobolanilor. Aceste modificări sunt mecanisme adaptive-adaptive în ischemia miocardică acută și sunt descrise în numeroase studii experimentale privind modelarea infarctului miocardic și la pacienții cu AMI. Un mecanism posibil pentru aceste modificări este activarea angiogenezei endogene în inimă, implicând o serie de factori de creștere. Pretratarea cu VEGF, in contrast cu animalele de control, având ca rezultat o creștere a densității sistemului vascular, nu numai în zona perinekroticheskoy, dar în zone îndepărtate de ea.
Trimiteți-le prietenilor: